[發明專利]用于篩選有瘤/無瘤黃瓜果實類型的顯性分子標記有效

申請號：	201310013138.0	申請日：	2013-01-14
公開（公告）號：	CN103074338A	公開（公告）日：	2013-05-01
發明（設計）人：	楊緒勤;蔡潤;何歡樂;朱文瑩;潘俊松	申請（專利權）人：	上海交通大學
主分類號：	C12N15/11	分類號：	C12N15/11;C12N15/29;C12Q1/68
代理公司：	上海科盛知識產權代理有限公司 31225	代理人：	楊元焱
地址：	200240 ***	國省代碼：	上海;31
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摘要：
搜索關鍵詞：	用于篩選黃瓜果實類型顯性分子標記
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【權利要求書】：

1.用于篩選有瘤/無瘤黃瓜果實類型的顯性分子標記，命名為Y68，其核苷酸序列如SEQ?ID?NO.1所示，有瘤黃瓜品種含有該標記，無瘤黃瓜品種不含有該標記。

2.根據權利要求1所述的用于篩選有瘤/無瘤黃瓜果實類型的顯性分子標記，其特征在于：由SEQ?ID?NO.2所示的上游引物和SEQ?ID?NO.3所示的下游引物擴增得到，其擴增程序為：94℃5min；35cycles，94℃25s；54℃25s；72℃30s；72℃5min。

3.用于控制黃瓜果瘤性狀的果瘤基因，其蛋白編碼序列由SEQ?ID?NO.4所示的213個氨基酸組成，無瘤品種不含有該213個氨基酸。

4.根據權利要求3所述的用于控制黃瓜果瘤性狀的果瘤基因，其特征在于：所述果瘤基因為鋅指蛋白基因，該鋅指蛋白基因的蛋白編碼序列含有6個C₂H₂鋅指蛋白的特異氨基酸序列結構-QALGGH，是一個轉錄因子，該蛋白能促進黃瓜果實表皮緊靠表皮毛基部部位的細胞的分裂。

5.根據權利要求3所述的用于控制黃瓜果瘤性狀的果瘤基因，其特征在于：所述蛋白編碼序列存在于黃瓜品種9930基因組序列Scaffold000083和黃瓜品種Gy14黃瓜基因組序列Scaffold02633中。

6.根據權利要求3所述的用于控制黃瓜果瘤性狀的果瘤基因的鑒定，其特征在于：利用有瘤親本和無瘤親本雜交獲得F₁，F₁再自交獲得F₂群體，再利用F₂群體的2808株個體，根據果瘤基因初步定位結果，結合公布的黃瓜基因組序列開發多態性標記，使用染色體步移技術將果瘤基因定位于SSR42和SNP18之間的候選區域含有41.6kb的核苷酸序列內，該含有41.6kb的核苷酸序列包含磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因和C₂H₂鋅指蛋白基因，其中C₂H₂鋅指蛋白基因CDNA區域序列在兩親本之間存在巨大差異，而磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因不存在差異，最后得出C₂H₂鋅指蛋白基因就是控制黃瓜果瘤性狀的果瘤基因。