[發明專利]一種混合酶解制備膠原蛋白短肽的方法

無效

• 申請號: 201310012998.2
• 申請日: 2013-01-15
• 公開（公告）號: CN103060413A
• 公開（公告）日: 2013-04-24
• 發明（設計）人: 曹榮軍;任憲君;武鑫;劉少芳;張秋艷;金海明;姚秀芬;臺文靜
• 申請（專利權）人: 青島貝爾特生物科技有限公司
• 主分類號: C12P21/06
• 分類號: C12P21/06
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及一種膠原蛋白短肽的制備方法，尤其涉及一種混合酶解制備膠原蛋白短肽的方法。

背景技術

膠原蛋白是一種功能性蛋白質，與細胞增生、分化、運動、免疫中、關節潤滑、傷口愈合等密切相關，目前已被廣泛應用于醫藥、食品、日用化工、生物合成等工業領域。膠原蛋白具有保護胃黏膜的抗潰瘍，抑制血壓上升，提高骨骼強度；膠原蛋白分子量小，更容易被人體吸收，在營養品和日用品方面有一定的市場，可將其開發成各種美容護膚品、美容飲料、或者降血壓預防骨質疏松等功能的保健品；?膠原蛋白屬于高蛋白，低熱量食物，適合用作減肥食品；?膠原蛋白由于其在胃腸道的吸收速度特別快，適合運動后補充能量，可以作為運動保健食品的原料。

目前膠原蛋白制備主要以比較原始的水解、酸堿法、單一酶解法為主，其產品無論從顏色、味道，還是實質作用，都與國際標準的產品有較大差距。其中，以酸堿法生產的膠原蛋白因技術與成本限制，最后會使用雙氧水、過氯酸鈉等強氧化劑進行除色除味，其結果是導致生成大量自由基團，具有非常強的致癌作用，會嚴重地損害國人的健康，同時酸堿廢液的排放也嚴重污染了環境。以單一的酶解方法制備膠原蛋白，膠原蛋白的得率低，經濟效益低。

發明內容

為了解決現有技術中的問題，本發明的目的是提供一種混合酶解制備膠原蛋白短肽的方法。

為達到上述目的，本發明所采用的技術手段是：一種混合酶解制備膠原蛋白短肽的方法，其步驟包括：

將新鮮畜類動物皮膚刮脂洗凈繳碎測定干基含量,?取測定后的上述原料加入發酵罐，置于磁力攪拌器上,按照質量比5.5%的濃度向發酵罐中補充自來水；

連接發酵罐和超級恒溫水浴，然后啟動磁力攪拌器和超級恒溫水浴,將料液加熱到96℃-98℃保持4min,降溫至55℃后在發酵罐上安裝pH計電極,然后在攪拌下依次加入中性蛋白酶、風味蛋白酶進行水解，中性蛋白酶加入量為30μl/g，風味蛋白酶加入量為總量的3%，保持pH在7-8之間；

水解9h后，水解液經過?95℃下加熱5min高溫滅活,在6000r/min?轉速下離心,取上清液分析，同時取出全部殘渣,經充分干燥后測定降解率。

進一步的，所述測定干基含量是指105℃下干燥至恒重。

本發明的有益效果在于：通過本方法制備膠原蛋白，動物皮膚的降解率可達95.6%,蛋白質的水解度可達18.5%,水解物中分子量小于1000(10個氨基酸以下的肽)的短肽選擇性達到了44.7%。生產過程綠色環保無污染，且制備方法簡便，利于規模生產。

具體實施方式

下面結合具體實施例對本發明作進一步說明，以助于理解本發明的內容。

實施例1

一種混合酶解制備膠原蛋白短肽的方法，其步驟包括：

將新鮮豬皮1kg刮脂洗凈繳碎，在105℃下干燥至恒重，測定干基含量,?取測定后的上述原料加入發酵罐，置于磁力攪拌器上,按照質量比5.5%的濃度向發酵罐中補充自來水；

連接發酵罐和超級恒溫水浴，然后啟動磁力攪拌器和超級恒溫水浴,將料液加熱到96℃-98℃保持4min；

降溫至55℃后在發酵罐上安裝pH計電極,然后在攪拌下依次加入中性蛋白酶、風味蛋白酶進行水解，中性蛋白酶加入量為30μl/g，風味蛋白酶加入量為總量的3%，保持pH在7-8之間,水解9h后，水解液經過?95℃下加熱5min高溫滅活,在6000r/min?的條件下離心,取適量上清液供分析用，同時取出全部殘渣,經充分干燥后用于測定降解率。

所述降解率為底物投料量剩余參渣量和底物投料量的比率。

經過分析得到降解率95.6%,蛋白質的水解度18.5%,水解物中分子量小于1000(10?個氨基酸以下的肽)的短肽選擇性達到了44.7%。

實施例2

一種混合酶解制備膠原蛋白短肽的方法，其步驟包括：

將新鮮牛皮1kg刮脂洗凈繳碎，在105℃下干燥至恒重，測定干基含量,?取測定后的上述原料加入發酵罐，置于磁力攪拌器上,按照質量比5.5%的濃度向發酵罐中補充自來水；

連接發酵罐和超級恒溫水浴，然后啟動磁力攪拌器和超級恒溫水浴,將料液加熱到96℃-98℃保持4min；