[發明專利]高速逆流色譜分離制備高純度DHA方法

有效

• 申請號: 201310011888.4
• 申請日: 2013-01-11
• 公開（公告）號: CN103086873A
• 公開（公告）日: 2013-05-08
• 發明（設計）人: 林祥志;榮輝;馬瑞娟;林汝榕;楊善軍;王昭凱;馬勇;陳水波
• 申請（專利權）人: 國家海洋局第三海洋研究所
• 主分類號: C07C57/03
• 分類號: C07C57/03;C07C51/47;C07C51/42
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 關暢

1.一種提取二十二碳六烯酸的方法，包括如下步驟：

1）將微藻油進行皂化處理，得到皂化處理后溶液；

2）將所述皂化處理后溶液進行高速逆流色譜分離，得到二十二碳六烯酸；

所述微藻油為從微藻細胞中提取的油脂。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：

步驟2）中，所述高速逆流色譜采用的溶劑為正庚烷-乙腈-乙酸-甲醇混合液；所述正庚烷-乙腈-乙酸-甲醇混合液為將正庚烷、乙腈、乙酸和甲醇按照體積比為4:5:1:1混合得到；

所述高速逆流色譜的轉速為850-900rpm；所述高速逆流色譜的溶劑的流速為2-3mL/min；

所述高速逆流色譜的溶劑的下相為流動相，溶劑的上相為固定相。

3.根據權利要求2所述的方法，其特征在于：

步驟1）中，所述皂化處理為將微藻油在氫氧化鉀–甲醇溶液中進行皂化處理，具體按照包括如下步驟的方法進行：

A、將所述微藻油與所述氫氧化鉀–甲醇溶液混合后，調pH值為酸性，得到酸性混合液；

B、用乙醚萃取所述酸性混合液，收集乙醚相；

C、去除所述乙醚相中的乙醚，再溶解，得到皂化處理后溶液；

步驟2）中，所述高速逆流色譜的轉速為900rpm；

所述高速逆流色譜的溶劑的流速為3mL/min。

4.根據權利要求3所述的方法，其特征在于：

步驟A中，所述氫氧化鉀-甲醇溶液的濃度為0.4-0.6mol/L；

所述微藻油和所述氫氧化鉀-甲醇溶液的配比為（18-22）mg：1ml；

所述混合為在65-75℃水浴下混合1-2h；

所述調pH值采用濃度為20%的硫酸水溶液，所述調pH值為酸性為調pH值為1-3；

步驟B中，所述用乙醚萃取所述酸性混合液為將所述酸性混合液和所述乙醚等體積混勻萃??；

步驟C中，所述去除所述乙醚相中的乙醚采用旋轉蒸發去除；

所述溶解所需的溶劑為所述正庚烷-乙腈-乙酸-甲醇混合液靜置后的下相。

5.根據權利要求4所述的方法，其特征在于：

步驟A中，所述氫氧化鉀-甲醇溶液的濃度為0.5mol/L；

所述微藻油和所述氫氧化鉀-甲醇溶液的配比為20mg：1ml；

所述混合為在70℃水浴下混合1.5h；

步驟B中，所述萃取的次數為3次。

6.根據權利要求1-5中任一所述的方法，其特征在于：

所述微藻為裂壺藻Schizochytrium?sp.；所述裂壺藻Schizochytrium?sp.具體為裂壺藻Schizochytrium?sp.TIO1101CGMCC?No.4603。

7.高速逆流色譜在從微藻中提取DHA中的應用；所述微藻具體為裂壺藻Schizochytrium?sp.；所述裂壺藻Schizochytrium?sp.進一步具體為裂壺藻Schizochytrium?sp.TIO1101CGMCC?No.4603。