[發明專利]一種頭狀葡萄球菌選擇性培養基及其制備方法

無效

• 申請號: 201310010757.4
• 申請日: 2013-01-13
• 公開（公告）號: CN103014129A
• 公開（公告）日: 2013-04-03
• 發明（設計）人: 陳淑香
• 申請（專利權）人: 陳淑香
• 主分類號: C12Q1/14
• 分類號: C12Q1/14;C12R1/44
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及醫學檢驗領域，具體涉及一種頭狀葡萄球菌選擇性培養基及其制備方法。

背景技術

葡萄球菌屬是從臨床標本檢出的革蘭陽性球菌中最為常見的一群細菌，其中，頭狀葡萄球菌（Staphylococcus?capitis）則為一種低毒力條件致病菌，但其檢出率和多重耐藥性呈逐年增高趨勢，已成為醫院感染的主要病原菌之一。頭狀葡萄球菌感染后癥狀不典型，且呈現多重耐藥現象，給臨床診斷和治療帶來一定困難，高效可靠的檢驗方法已是必然需要。

所謂微生物培養是一種用人工方法使微生物生長繁殖的技術，而選擇性選擇性培養基是用來促進或抑制一定類型的生物體（如細胞或細菌等）而設計的選擇性培養基，利用這種選擇性培養基可以將所需要的微生物從混雜的微生物中分離出來。

目前臨床上普遍使用的葡萄球菌選擇性培養基為甘露醇高鹽瓊脂（Manitol?Salt?Agar），用于金黃色葡萄球菌的選擇性分離培養。培養基成分為：蛋白胨、雞蛋蛋白液、D-甘露醇、氯化鈉、酚紅、瓊脂。金黃色葡萄球菌菌落為黃色，大腸桿菌和沙門氏菌菌落為無色。但是，該種培養基并不能選擇性培養頭狀葡萄球菌，其原因在于在目前的選擇性培養基中雜菌比頭狀葡萄球菌生長更快，很快覆蓋了培養基，頭狀葡萄球菌無法生長。

發明內容

本發明的技術任務是針對以上現有技術的不足，提供一種對頭狀葡萄球菌分離率高的選擇性培養基。

本發明解決其技術問題的技術方案是：一種頭狀葡萄球菌選擇性培養基，其特征在，配制1000ml選擇性培養基的配方中含有：

麥芽浸粉15g；

雞蛋蛋白液150ml；

氯化鈉5g；

枸櫞酸鎂0.5g；

瓊脂15g；

假細錐甲素8~12mg；

阿波酮酸?0.8?g；

磷酸二氫鉀0.2g；

蒸餾水加至1000ml。

優化方案中，每1000ml選擇性培養基還含有硫酸銅6mg。

優化方案中，每1000ml選擇性培養基還含有L-半胱氨酸0.1g。

優化方案中，每1000ml選擇性培養基還含有濃度200g/L的百合水煮液200~300ml。

最優化方案中，每1000ml選擇性培養基還含有硫酸銅6mg；L-半胱氨酸0.1g；濃度200g/L的百合水煮液200~300ml。

一種頭狀葡萄球菌選擇性培養基的制備方法，其特征在于包括以下步驟：

（1）取百合加水煮沸1小時，過濾，取濾液，調整體積到濃度為200g/L，得百合水煮液；

（2）取麥芽浸粉；雞蛋蛋白液；氯化鈉；枸櫞酸鎂；瓊脂；假細錐甲素；阿波酮酸；磷酸二氫鉀；L-半胱氨酸及硫酸銅溶于步驟1所得百合水煮液中，混勻過濾后，蒸餾水定容，低溫滅菌2次，每次45?min，滅菌后分裝。

其中所述的麥芽浸粉、雞蛋蛋白液提供碳氮源和能量；枸櫞酸鎂和磷酸二氫鉀為緩沖劑，并可以抑制雜菌生長；阿波酮酸、L-半胱氨酸屬氨基酸類，為營養劑，阿波酮酸為頭狀葡萄球菌特異性營養劑，可以特異性的促進頭狀葡萄球菌繁殖。；瓊脂是選擇性培養基的凝固劑；假細錐甲素對于金葡菌具有特異的抑菌作用，對于頭狀葡萄球菌無效；雞蛋蛋白液含有各種多肽、脂肪、生長因子、激素等，這些物質對促進頭狀葡萄球菌的繁殖和生長都是很重要的因素，此外雞蛋蛋白液還具有維持選擇性培養基pH?值恒定的作用。銅離子屬于重金屬離子，在6mg/L這個濃度劑量下，沉積于金葡菌內部，導致胞壁消失或變薄，核糖體聚集成團塊，最終導致細菌變形及破裂，呈現重金屬源性損傷，而頭狀葡萄球菌對重金屬的運輸能力和滲透能力低于金葡菌，也即重金屬的抗性較高，故而加入硫酸銅可以有效地抑制金葡菌生長。百合為百合科植物卷丹Lilium?lancifolium?Thunb.、百合Lilium?brownii?F.E.Brown?var.?viridulum?Baker?或細葉百合Lilium?pumilum?DC.?的干燥肉質鱗葉，含有蛋白質、脂肪、淀粉、還元糖、維生素B1、B2、泛酸、維生素C、β-胡蘿卜素等多種成分，可以提供能量代謝、細胞發育、新陳代謝因子，有助于促進頭狀葡萄球菌生長，尤其是重金屬環境下菌落的生長。

本發明與現有技術相比較，具有檢出可靠、頭狀葡萄球菌分離率高的特點。

具體實施方式

以下結合實際情況，對本發明的具體實施方式作詳細說明。