[發明專利]一種路鄧葡萄球菌選擇性培養基及其制備方法

無效

• 申請號: 201310010739.6
• 申請日: 2013-01-13
• 公開（公告）號: CN103014124A
• 公開（公告）日: 2013-04-03
• 發明（設計）人: 姜美婷
• 申請（專利權）人: 姜美婷
• 主分類號: C12Q1/14
• 分類號: C12Q1/14;C12R1/44
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及醫學檢驗領域，具體涉及一種路鄧葡萄球菌選擇性培養基及其制備方法。

背景技術

路鄧葡萄球菌，由Freney等于1988年首次報道。近年來，路鄧葡萄球菌引起的侵襲性感染的報道日趨增多。它作為具有顯著臨床微生物學特征的致病菌引起學者廣泛關注，更有學者將其稱為Surreptitious?Staphylococcus或?“披著羊皮的狼”。路鄧葡萄球菌與多種臨床疾病密切相關，包括膿腫、心內膜炎、腹膜炎、泌尿道感染、中樞神經系統感染、骨關節感染等。

由于路鄧葡萄球菌為人體皮膚的正常菌群，采血操作消毒不徹底的話，路鄧葡萄球菌很容易混入血液中，造成血液污染而傳播疾病。故而，高效、可靠的路鄧葡萄球菌培養是用于研究、鑒定該菌種的基礎。

由于既往路鄧葡萄球菌常被作為培養污染菌，因此目前尚缺乏用于路鄧葡萄球菌選擇性培養的培養基。

發明內容

本發明的技術任務是針對以上現有技術的不足，提供一種對路鄧葡萄球菌分離率高的選擇性培養基。

本發明解決其技術問題的技術方案是：一種路鄧葡萄球菌選擇性培養基，其特征在，配制1000ml選擇性培養基的配方中含有：

麥芽浸粉15g；

雞蛋蛋白液150ml；

氯化鈉5g；

枸櫞酸鎂0.5g；

瓊脂15g；

假細錐甲素8~12mg；

6-O-乙酰黃豆苷?0.03g；

磷酸二氫鉀0.2g；

蒸餾水加至1000ml。

優化方案中，每1000ml選擇性培養基還含有硫酸銅6mg。

優化方案中，每1000ml選擇性培養基還含有L-半胱氨酸0.1g。

優化方案中，每1000ml選擇性培養基還含有濃度200g/L的山藥水煮液200~300ml。

最優化方案中，每1000ml選擇性培養基還含有硫酸銅6mg；L-半胱氨酸0.1g；濃度200g/L的山藥水煮液200~300ml。

一種路鄧葡萄球菌選擇性培養基的制備方法，其特征在于包括以下步驟：

（1）取山藥加水煮沸1小時，過濾，取濾液，調整體積到濃度為200g/L，得山藥水煮液；

（2）取麥芽浸粉；雞蛋蛋白液；氯化鈉；枸櫞酸鎂；瓊脂；假細錐甲素；6-O-乙酰黃豆苷；磷酸二氫鉀；L-半胱氨酸及硫酸銅溶于步驟1所得山藥水煮液中，混勻過濾后，蒸餾水定容，低溫滅菌2次，每次45?min，滅菌后分裝。

其中所述的麥芽浸粉、雞蛋蛋白液提供碳氮源和能量；枸櫞酸鎂和磷酸二氫鉀為緩沖劑，并可以抑制雜菌生長；L-半胱氨酸屬氨基酸類，為營養劑；瓊脂是選擇性培養基的凝固劑；假細錐甲素對于金葡菌具有特異的抑菌作用，對于路鄧葡萄球菌無效；雞蛋蛋白液含有各種多肽、脂肪、生長因子、激素等，這些物質對促進路鄧葡萄球菌的繁殖和生長都是很重要的因素，此外雞蛋蛋白液還具有維持選擇性培養基pH?值恒定的作用。6-O-乙酰黃豆苷為針對路鄧葡萄球菌的特異性營養劑，可以特異性的增加路鄧葡萄球菌繁殖速度。銅離子屬于重金屬離子，在6mg/L這個濃度劑量下，銅離子沉積于金葡菌內部，導致胞壁消失或變薄，核糖體聚集成團塊，最終導致細菌變形及破裂，呈現重金屬源性損傷，而路鄧葡萄球菌對重金屬的運輸能力和滲透能力低于金葡菌，也即重金屬的抗性較高，即使6mg/L這個濃度也可以耐受，故而加入硫酸銅可以有效地抑制金葡菌生長。山藥為為薯蕷科植物薯蕷Dioscorea?opposita?Thunb.?的干燥根莖，含有蛋白質、脂肪、淀粉、還元糖、氨基酸等多種成分，可以提供能量代謝、細胞發育、新陳代謝因子，尤其是山藥塊莖含薯蕷皂甙元（diosgenin）和多酚氧化酶，有助于促進路鄧葡萄球菌生長，尤其是重金屬環境下菌落的生長。

本發明與現有技術相比較，具有檢出可靠、路鄧葡萄球菌分離率高的特點。

具體實施方式

以下結合實際情況，對本發明的具體實施方式作詳細說明。

實施例1，配制1000ml選擇性培養基的配方中含有：麥芽浸粉15g；雞蛋蛋白液150ml；氯化鈉5g；枸櫞酸鎂0.5g；瓊脂15g；假細錐甲素8mg；6-O-乙酰黃豆苷?0.03g；磷酸二氫鉀0.2g；蒸餾水加至1000ml。制備方法：取麥芽浸粉；雞蛋蛋白液；氯化鈉；枸櫞酸鎂；瓊脂；假細錐甲素；6-O-乙酰黃豆苷；磷酸二氫鉀溶于蒸餾水中，混勻過濾后，蒸餾水定容，低溫滅菌2次，每次45?min，滅菌后分裝。