[發(fā)明專利]腎上腺皮質(zhì)刺激激素的檢測方法及吸附劑

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310010173.7
• 申請日: 2013-01-11
• 公開（公告）號: CN103207278A
• 公開（公告）日: 2013-07-17
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 鶴岡禮奈
• 申請（專利權(quán)）人: 希森美康株式會社
• 主分類號: G01N33/74
• 分類號: G01N33/74;B01J20/26
• 代理公司: 中國國際貿(mào)易促進(jìn)委員會專利商標(biāo)事務(wù)所 11038
• 代理人: 羅菊華

【技術(shù)領(lǐng)域】

本發(fā)明涉及腎上腺皮質(zhì)刺激激素（ACTH）的檢測方法及ACTH的吸附劑。

【背景技術(shù)】

在血液中含各種各樣的肽，但在其中，在處于特定的病態(tài)的活體中，存在示與健康時不同的血中濃度的肽。那樣的肽在臨床檢查的領(lǐng)域中，作為疾病的標(biāo)志物而被關(guān)注。例如，由垂體激素的分泌降低而發(fā)生的西蒙斯病、席漢綜合征等可通過以ACTH作為標(biāo)志物肽檢測來進(jìn)行臨床檢查。但是，有臨床檢查中使用的活體樣品中含的雜質(zhì)給ACTH的檢測帶來影響的情況。因此，期望可抑制活體樣品中的雜質(zhì)的影響的ACTH的檢測方法。

本發(fā)明旨在提供可選擇性地吸附ACTH的新穎材料。另外，本發(fā)明旨在提供使用此新穎材料檢測液體樣品中的ACTH的方法。

【發(fā)明內(nèi)容】

本發(fā)明的范圍僅由隨附的權(quán)利要求定義，且不受本發(fā)明內(nèi)容部分的任何局限。

本發(fā)明人令人驚訝地發(fā)現(xiàn)，由酪蛋白得到的凝膠可選擇性地吸附ACTH，從而完成本發(fā)明。

從而，本發(fā)明提供：

【1】腎上腺皮質(zhì)刺激激素的檢測方法，其包括：

使含腎上腺皮質(zhì)刺激激素的液體樣品和凝膠化酪蛋白接觸，使腎上腺皮質(zhì)刺激激素吸附到凝膠化酪蛋白的步驟，以及

檢測上述吸附到凝膠化酪蛋白的腎上腺皮質(zhì)刺激激素的步驟；

【2】上述【1】所述的方法，其中腎上腺皮質(zhì)刺激激素吸附步驟通過使液體樣品和凝膠化酪蛋白在pH6.5以上的條件下接觸來進(jìn)行；

【3】上述【1】或上述【2】所述的方法，其還包括：

回收使與液體樣品接觸的凝膠化酪蛋白的步驟，以及

使回收的吸附到凝膠化酪蛋白的腎上腺皮質(zhì)刺激激素游離的步驟；

【4】上述【3】所述的方法，其中腎上腺皮質(zhì)刺激激素的游離步驟通過使回收的凝膠化酪蛋白和水系介質(zhì)在pH5.5以下接觸，使吸附到凝膠化酪蛋白的腎上腺皮質(zhì)刺激激素游離到上述水系介質(zhì)中來進(jìn)行；

【5】上述【1】或上述【2】所述的方法，其中凝膠化酪蛋白是由交聯(lián)劑凝膠化的酪蛋白；

【6】上述【5】所述的方法，其中交聯(lián)劑是水溶性碳二亞胺；

【7】上述【1】或上述【2】所述的方法，其中腎上腺皮質(zhì)刺激激素是具有至少腎上腺皮質(zhì)刺激激素的1～24位的氨基酸序列的多肽；

【8】上述【1】或上述【2】所述的方法，其中腎上腺皮質(zhì)刺激激素與白蛋白形成復(fù)合物；

【9】上述【1】或上述【2】所述的方法，其中液體樣品是血液、血漿、血清或尿；

【10】腎上腺皮質(zhì)刺激激素的吸附劑，其含凝膠化酪蛋白；

【11】上述【10】所述的吸附劑，其中凝膠化酪蛋白是由交聯(lián)劑凝膠化的酪蛋白；

【12】上述【11】所述的吸附劑，其中交聯(lián)劑是水溶性碳二亞胺；

【13】上述【10】～【12】之任一項(xiàng)所述的吸附劑，其中腎上腺皮質(zhì)刺激激素是具有至少腎上腺皮質(zhì)刺激激素的第1～24的氨基酸序列的多肽；

【14】上述【10】～【12】之任一項(xiàng)所述的吸附劑，其中腎上腺皮質(zhì)刺激激素與白蛋白形成復(fù)合物。

本發(fā)明的ACTH的吸附劑中含的凝膠化酪蛋白可選擇性地吸附液體樣品中的ACTH。因此，本發(fā)明的ACTH的檢測方法，通過將液體樣品中的ACTH選擇性地吸附到凝膠化酪蛋白，可在抑制其他雜質(zhì)的影響的狀態(tài)下檢測ACTH。

【附圖說明】

圖1是示對于由各種材料制備的凝膠載體的ACTH的吸附能的坐標(biāo)圖。

圖2是示對于凝膠化酪蛋白的各種肽的吸附能的坐標(biāo)圖。

圖3是示凝膠化酪蛋白與在用四甲基若丹明（TMR）標(biāo)記的ACTH中肽部分吸附的坐標(biāo)圖。

圖4是將吸附到凝膠化酪蛋白的ACTH由SDS-PAGE法及其后的銀染色法檢測之時的照片。

圖5是將吸附到凝膠化酪蛋白的，與白蛋白形成復(fù)合物的ACTH由SDS-PAGE法及其后的熒光成像法檢測之時的照片。

圖6是將凝膠化酪蛋白不吸附白蛋白由SDS-PAGE法及其后的銀染色法確認(rèn)之時的照片。

圖7是示凝膠化酪蛋白和ACTH的親和性隨pH變化的坐標(biāo)圖。

圖8是由SDS-PAGE法及其后的銀染色法及熒光成像法示由本發(fā)明的ACTH的檢測方法，可檢測血清中的ACTH的照片。

圖9是由SDS-PAGE法及其后的銀染色法及熒光成像法示由本發(fā)明的ACTH的檢測方法，可檢測尿中的ACTH的照片。

【實(shí)施方式】

［1］ACTH的檢測方法