[發明專利]一種免疫避孕核酸疫苗及其制備方法在審
| 申請號： | 201310006851.2 | 申請日： | 2013-01-29 |
| 公開（公告）號： | CN103961718A | 公開（公告）日： | 2014-08-06 |
| 發明（設計）人： | 汪莉;王玉民;侯小強;田利源;郭振東;張斌;胡亞歐 | 申請（專利權）人： | 中國人民解放軍軍事醫學科學院生物工程研究所 |
| 主分類號： | A61K48/00 | 分類號： | A61K48/00;A61K39/00;A61P15/18;C12N15/85;C12N15/66 |
| 代理公司： | 北京太兆天元知識產權代理有限責任公司 11108 | 代理人： | 張韜 |
| 地址： | 100071 北*** | 國省代碼： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 免疫 避孕 核酸 疫苗 及其 制備 方法 | ||
1.一種免疫避孕核酸疫苗，其包含編碼精子特異膜蛋白Izumo的DNA序列。
2.權利要求1所述的免疫避孕核酸疫苗，其中所述編碼精子特異膜蛋白Izumo的DNA序列插入到真核表達載體中，從而能夠在真核細胞中表達精子特異膜蛋白Izumo。
3.權利要求1-2任一項所述的免疫避孕核酸疫苗，其中所述編碼精子特異膜蛋白Izumo的DNA序列是小鼠的Izumo編碼序列。
4.權利要求3所述的免疫避孕核酸疫苗，其中所述真核表達載體為pCAGGS，并且所述小鼠編碼精子特異膜蛋白Izumo的DNA序列插入到真核表達載體pCAGGS的CMV增強子和雞β-actin啟動子下游。
5.權利要求4所述的免疫避孕核酸疫苗，其中在所述編碼小鼠精子特異膜蛋白Izumo的DNA序列起始端加入了Kozak序列。
6.一種免疫避孕核酸疫苗的制備方法，其包括如下步驟：（1）利用RT-PCR技術從小鼠睪丸組織總RNA擴增得到編碼小鼠精子特異膜蛋白Izumo的DNA序列；（2）將擴增得到的Izumo編碼序列插入到真核表達載體中，構建重組真核表達載體；（3）大量制備步驟（2）構建得到的真核表達載體，純化，獲得免疫避孕核酸疫苗。
7.權利要求6的制備方法，其中在步驟（1）中使用的擴增編碼小鼠精子特異膜蛋白Izumo的DNA序列的引物對序列如序列表SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示。
8.權利要求6或7的制備方法，其中步驟（2）中使用的真核表達載體為pCAGGS，并且所述編碼小鼠精子特異膜蛋白Izumo的DNA序列插入到真核表達載體pCAGGS的CMV增強子和雞β-actin啟動子下游。
9.權利要求6-8任一項的方法，其中在所述編碼小鼠精子特異膜蛋白Izumo的DNA序列起始端加入了Kozak序列。
10.編碼精子特異膜蛋白Izumo的DNA序列在制備免疫避孕核酸疫苗中的用途，其中包括將所述編碼精子特異膜蛋白Izumo的DNA序列插入到真核表達載體，構建重組真核表達載體的步驟。
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