[發(fā)明專(zhuān)利]一種微藻利用碳酸鈣碳源的檢測(cè)與定量方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201310001831.6
• 申請(qǐng)日: 2013-01-05
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN103074411A
• 公開(kāi)（公告）日: 2013-05-01
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 吳沿友;謝騰祥;李海濤;杭紅濤;劉叢強(qiáng);王寶利;劉瑩
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 中國(guó)科學(xué)院地球化學(xué)研究所
• 主分類(lèi)號(hào): C12Q1/02
• 分類(lèi)號(hào): C12Q1/02
• 代理公司: 貴陽(yáng)中新專(zhuān)利商標(biāo)事務(wù)所 52100
• 代理人: 吳無(wú)懼

1.一種微藻利用碳酸鈣碳源的檢測(cè)與定量方法，其特征在于：它包括以下步驟：

第一，選擇兩種δ¹³C值差值大于8?‰且晶型相同的碳酸鈣粉末作為同位素標(biāo)記1和同位素標(biāo)記2分別添加到培養(yǎng)液中來(lái)培養(yǎng)待測(cè)微藻，并測(cè)定起始的待測(cè)微藻的穩(wěn)定碳同位素組成δ¹³C值和蛋白質(zhì)含量N₀；碳同位素標(biāo)記1的碳酸鈣的δ¹³C值為δ_C1，碳同位素標(biāo)記2的碳酸鈣的δ¹³C值為δ_C2；起始的待測(cè)微藻的穩(wěn)定碳同位素組成δ¹³C值為δ₀；

第二，在培養(yǎng)過(guò)程中，測(cè)定各培養(yǎng)條件下不同培養(yǎng)時(shí)間微藻的蛋白質(zhì)含量，待培養(yǎng)7至9天后，收獲藻體，分別測(cè)定兩種同位素標(biāo)記的培養(yǎng)液培養(yǎng)的相對(duì)應(yīng)的各培養(yǎng)條件下的、被考察微藻的穩(wěn)定碳同位素組成δ¹³C的值δ^h_T1、δ^h_T2和蛋白質(zhì)含量N₁、N₂；

第三，利用起始藻體的蛋白質(zhì)含量N₀和穩(wěn)定碳同位素組成δ¹³C值δ₀與收獲時(shí)微藻的蛋白質(zhì)含量N_i，通過(guò)校正公式：δ^h_Ti=(N₀/N_i)δ₀+(1-N₀/N_i)δ_Ti對(duì)收獲時(shí)測(cè)定的藻體δ¹³C值δ^h_Ti進(jìn)行校正，計(jì)算出校正后的藻體δ¹³C值δ_Ti；

第四，通過(guò)方程???????????????????????????????????????????????，計(jì)算出微藻各培養(yǎng)條件下利用添加的碳酸鈣碳源的份額f_B；

第五，計(jì)算不同培養(yǎng)時(shí)間不同培養(yǎng)條件下兩種同位素標(biāo)記的培養(yǎng)液培養(yǎng)的微藻蛋白質(zhì)含量的平均值，利用指數(shù)生長(zhǎng)方程擬合微藻的蛋白質(zhì)計(jì)量的生物量隨時(shí)間變化,得出各培養(yǎng)條件下的、被考察微藻生物量Q_T隨時(shí)間T變化的方程，Q_T=q+ae^bT,其中Q_T：代表在時(shí)間T時(shí)以蛋白質(zhì)計(jì)量的微藻生物量，q、a和b：代表擬合參數(shù)，e：?2.7183；b的生物學(xué)意義為單位生物量的被考察微藻在單位時(shí)間內(nèi)增加的生物量；

第六，依據(jù)收獲時(shí)各培養(yǎng)條件下微藻利用添加的碳酸鈣碳源的份額f_B、單位生物量的被考察微藻在單位時(shí)間內(nèi)增加的生物量b和換算因子F，利用公式d=?F·b·f_B，計(jì)算出單位質(zhì)量生物量的被考察微藻在單位時(shí)間內(nèi)獲取的碳酸鈣碳源的量d。