[發(fā)明專利]促進(jìn)大鼠神經(jīng)干細(xì)胞分化的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201310001051.1
• 申請(qǐng)日: 2013-01-05
• 公開（公告）號(hào): CN103343108A
• 公開（公告）日: 2013-10-09
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 黃慧玲;范維佳;武俏麗;蔡英;王辰;莫麗冬
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 天津市環(huán)湖醫(yī)院
• 主分類號(hào): C12N5/0793
• 分類號(hào): C12N5/0793
• 代理公司: 天津市宗欣專利商標(biāo)代理有限公司 12103
• 代理人: 董光仁

1.一種促進(jìn)大鼠神經(jīng)干細(xì)胞分化的方法，其是按以下步驟進(jìn)行的：

a.?胎鼠大腦神經(jīng)干細(xì)胞培養(yǎng)，孕13天SD大鼠胎鼠取大腦組織，剪碎，用0.25%胰蛋白酶和0.02%乙二胺四乙酸二鈉，消化成單細(xì)胞，離心；用神經(jīng)干細(xì)胞完全培養(yǎng)液懸浮細(xì)胞，過(guò)篩，收集細(xì)胞濾液，于37℃、體積分?jǐn)?shù)為5%?CO₂和95%?空氣、絕對(duì)濕度條件下進(jìn)行培養(yǎng)，每隔1天換瓶培養(yǎng)液；得高純度的大腦神經(jīng)干細(xì)胞；

b.?神經(jīng)元分化，將培養(yǎng)至第2代的神經(jīng)干細(xì)胞收集并離心，用神經(jīng)元完全培養(yǎng)液加5%胎牛血清接種到已涂布鼠尾膠原的24孔板內(nèi)，每孔1ml，令細(xì)胞貼壁，24小時(shí)后棄上清，細(xì)胞分化第1天開始用神經(jīng)元完全培養(yǎng)液，每孔同時(shí)加入100×25-100μmol/L牛磺酸10μl，每3天換液1次，共培養(yǎng)12天即得分化神經(jīng)元的神經(jīng)干細(xì)胞。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述促進(jìn)大鼠神經(jīng)干細(xì)胞分化的方法，?其特征在于：所述用神經(jīng)元完全培養(yǎng)液作為細(xì)胞分化第1天，每孔同時(shí)加入100×100μmol/L牛磺酸10μl，每3天換液1次，共培養(yǎng)12天即得分化的神經(jīng)元。