[發(fā)明專利]一種重組蛛絲蛋白/銀納米生物創(chuàng)面膜的制備方法

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201310000793.2
• 申請(qǐng)日: 2013-01-04
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN103041440A
• 公開(kāi)（公告）日: 2013-04-17
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 趙亮;李敏;陳登龍;章文賢
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 福建師范大學(xué)
• 主分類號(hào): A61L15/32
• 分類號(hào): A61L15/32;A61L15/24;A61L15/44
• 代理公司: 福州君誠(chéng)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 35211
• 代理人: 張耕祥

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及到一種應(yīng)用于損傷皮膚修復(fù)再生的生物創(chuàng)面膜，尤其涉及一種重組蛛絲蛋白/含銀納米創(chuàng)面膜的制備方法。

背景技術(shù)

皮膚損傷的治療，不僅需要促進(jìn)皮膚愈合，而且需要注意殺菌，防止感染。對(duì)于在機(jī)體修復(fù)功能良好的情況下的小范圍急性損傷，傳統(tǒng)的以被動(dòng)的簡(jiǎn)單覆蓋來(lái)保護(hù)傷口是奏效的。但是，對(duì)慢性、大范圍或長(zhǎng)期反復(fù)感染、機(jī)體修復(fù)功能異常的患者，就必須采取積極主動(dòng)的有效措施，才能盡快康復(fù)。

傳統(tǒng)的創(chuàng)傷涂膜劑或創(chuàng)傷覆蓋材料，大多有醫(yī)院自制，如創(chuàng)傷涂抹劑，一般由主藥、成膜材料、增塑劑、透皮吸收促進(jìn)劑、防腐劑和溶媒材料構(gòu)成，對(duì)迅速止痛、抗感染和創(chuàng)面保護(hù)具有一定的作用，但自制過(guò)程藥物的用量不好控制，且透氣性能差，而創(chuàng)傷覆蓋材料存在粘連等諸多問(wèn)題。生物創(chuàng)面膜是用預(yù)制的生物活性材料覆蓋創(chuàng)傷表面，起到皮膚屏障作用，為創(chuàng)面愈合提供有利的微環(huán)境，從而促進(jìn)皮膚細(xì)胞增生，加快皮膚損傷愈合的一類醫(yī)療器械材料。

在創(chuàng)面的治療中，抗感染很重要。自第二次世界大戰(zhàn)以來(lái)，抗生素廣泛應(yīng)用于創(chuàng)傷治療，但是長(zhǎng)期使用抗生素使得細(xì)菌產(chǎn)生了耐藥性。細(xì)菌對(duì)抗生素的抗性是傷口治療面臨的主要問(wèn)題之一。而且，傳統(tǒng)的創(chuàng)面膜僅能起到覆蓋傷口表面的作用，在一定程度上能降低感染，但是皮膚愈合速度較慢，抗菌性能不強(qiáng)。

銀離子具有良好的抗菌性，目前還沒(méi)有文獻(xiàn)報(bào)道有對(duì)銀離子產(chǎn)生抗性的細(xì)菌。因此，將銀離子引進(jìn)創(chuàng)面膜能夠克服使用抗生素抗感染的缺點(diǎn)。

作為創(chuàng)面膜，我們希望它具有較好的生物降解性和良好的組織相容性，福建師范大學(xué)的李敏教授等根據(jù)蜘蛛絲的結(jié)構(gòu)和功能特性，應(yīng)用基因工程技術(shù)，大規(guī)模獲得RGD-蛛絲蛋白，由于蛛絲蛋白形成的纖維是一種具有高抗張強(qiáng)度和高彈性的蛋白纖維，具有較好的生物降解性、優(yōu)越的力學(xué)性能和良好的組織相容性，當(dāng)之無(wú)愧的成為了創(chuàng)面膜首選材料，用RGD-蛛絲蛋白制備的創(chuàng)面膜還具有細(xì)胞粘附功能，目前尚未見(jiàn)到將RGD-蛛絲蛋白用于制備創(chuàng)面膜的工藝技術(shù)報(bào)道。具體詳見(jiàn)2004年發(fā)表于《生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)雜志》（李敏，黃建坤，涂桂云等,?RGD-蜘蛛拖絲蛋白基因的構(gòu)建、表達(dá)與純化,）2004,?21(6):1006。

靜電紡絲技術(shù)是指通過(guò)應(yīng)用高電壓將聚合物微小射流在運(yùn)行過(guò)程中固化成纖維，它是一種簡(jiǎn)單成本低廉的制造超細(xì)直徑的纖維技術(shù)，應(yīng)用靜電紡絲技術(shù)而制造的纖維被廣泛研究。電紡技術(shù)快速高效，容易操作，制備的纖維具有較高的表面積體積比，孔徑較小，孔隙較多，適合于多孔材料的制備。

聚乙烯醇（PVA）作為一種合成高分子材料，合成方便、安全低毒、力學(xué)強(qiáng)度較佳、價(jià)格便宜、使用方便，在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域也得到廣泛的應(yīng)用。

因此，應(yīng)用靜電紡絲技術(shù)，構(gòu)建一種RGD-蛛絲蛋白（pNSR16）、PVA、硝酸銀三者為原料成分的含銀納米生物創(chuàng)面膜，能促進(jìn)皮膚細(xì)胞的愈生長(zhǎng)，加快損傷皮膚的愈合，同時(shí)也能起到抗感染的作用。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的主要是為了克服傳統(tǒng)的創(chuàng)面膜抗菌性能不強(qiáng)、不具有生物活性、致孔方法復(fù)雜而提供的一種制備以RGD-蛛絲蛋白（pNSR16）、聚乙烯醇（PVA）、硝酸銀三者為原料成分的重組蛛絲蛋白/含銀納米創(chuàng)面膜。

為實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的目的所采用的技術(shù)方案是：

（1）將PVA溶解在H₂O中配成質(zhì)量濃度為9～13%的PVA水溶液，在電壓10～30kv、固化距離10～30cm、擠出速度1～5mL/h、溫度30～45℃下通過(guò)靜電紡絲制備PVA納米纖維膜；

（2）將質(zhì)量濃度為0.3～1.0%的硝酸銀稀溶液均勻噴灑在PVA納米纖維膜，在70～95℃下烘干處理20-60分鐘；

（3）將pNSR16溶解在甲酸中配成質(zhì)量濃度為5-30%的RGD-蛛絲蛋白（pNSR16）的甲酸溶液，通過(guò)靜電紡絲技術(shù)在電壓50～150kv、固化距離10～30cm、擠出速度1～5mL/h、溫度30～45℃下將RGD-蛛絲蛋白（pNSR16）的甲酸溶液電紡于含銀的PVA納米纖維膜，形成pNSR16復(fù)合的含銀PVA納米纖維膜，在70～95℃下烘干處理20-60分鐘得重組蛛絲蛋白/銀納米生物創(chuàng)面膜。

本發(fā)明所用的RGD-蛛絲蛋白（pNSR16）是根據(jù)福建師范大學(xué)李敏等于2004年在《生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)雜志》（2004,?21(6):1006）上公開(kāi)的“?RGD-蜘蛛拖絲蛋白基因的構(gòu)建、表達(dá)與純化”方法制備得到的，其分子量分別約為65KD。

本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)是：

（1）采用pNSR16這種來(lái)自生物體的天然蛋白質(zhì)材料，使創(chuàng)面膜具有生物活性；