[發明專利]用于治療變態反應的核酸

有效

• 申請號: 201280075163.5
• 申請日: 2012-06-15
• 公開（公告）號: CN104519896B
• 公開（公告）日: 2017-11-10
• 發明（設計）人: 威廉·赫爾;特瑞·海蘭
• 申請（專利權）人: 免疫治療有限公司
• 主分類號: A61K38/00
• 分類號: A61K38/00
• 代理公司: 中原信達知識產權代理有限責任公司11219
• 代理人: 楊青,穆德駿

相關專利申請的交叉引用

本專利申請依賴于2011年6月14提交的美國臨時專利申請No.61/496,866的公開內容并且要求該臨時專利申請的權益，特此將該臨時專利申請的整個公開內容以引用的方式并入本文。

背景技術

技術領域

本發明涉及分子生物學和醫學領域。更具體地講，本發明涉及用作DNA疫苗的核酸以及將其用于治療遭受變態反應或易受變態反應影響的受試者的方法。

相關領域的論述

變態反應是表征為產生對抗變應原(或引起變態反應的分子)的IgE抗體的超敏反應性疾病。變態反應影響超過25％的人口。變態反應可通過許多途徑(包括呼吸道、皮膚接觸、攝食、昆蟲叮咬或藥物注入)進入人體。

變態反應疾病管理包括診斷和治療。變態反應學家使用多種技術，如皮膚點刺測試、基于放射變應原吸附的技術、ELISA或激發測試來證明變應原特異性IgE以及來鑒定變應原來源而診斷變態反應。變態反應的治療最通常分為兩類：回避和施與抗組胺劑。第三種替代方法即變態反應免疫療法，其要求患者每周接受由小量攻擊性變應原組成的注射劑以幫助免疫系統重新訓練(reeducate)其對變應原的應答。

變應原融合蛋白的使用和產生是本領域所熟知的。例如，美國專利No.7,566,456教導了具有IgE和IgG結合域以及編碼變應原的融合蛋白。另外，WO 97/07218教導了供在變態反應免疫療法中使用的變應原-抗CD32融合蛋白。然而，這兩篇文獻均沒有教導它們各自的融合蛋白如何通過抗原遞呈而與T細胞相互作用來誘導或改變Th1應答。此外，在引導含抗CD32的疫苗至樹突細胞到實現Th1細胞的正誘導之間沒有理論聯系。這兩篇文獻均教導了一種組合物，該組合物在治療上引入一種變應原，使得該變應原可作為變應原融合蛋白存在于血清中。

已經由Toda等人(2002)確定，可將變應原的T細胞表位(在本例中是位于氨基酸247-258處的Cry J2表位)附接至融合蛋白并且可用于進行變態反應特異性免疫療法。Toda等人(2002)描述的特異性組合物是DNA疫苗的使用，該DNA疫苗編碼與II類相關恒定鏈肽(CLIP)附接的Cry J2的主要CD4 T細胞表位(位于氨基酸247-258)。CLIP含有溶酶體/內體運輸序列并且含有結合至MHC II的肽結合槽的域。Toda等人(2002)顯示，用Cry J2肽/CLIP DNA疫苗免疫導致使小鼠啟動主要的Th1應答，該應答表征為較高的IFN-γ和IgG2a產生。然而，Toda等人沒有教導可用于進行變態反應特異性免疫療法的變應原的整個蛋白質編碼序列的細胞內靶向。

美國專利No.6,982,326和美國專利No.6,090,386描述了編碼日本柳杉(Cryptomeria japonica)主要花粉變應原Cry J1、Cry J2、Jun s I和Jun v I的核酸序列以及其片段或肽。該發明還提供了在用編碼Cry J1、Cry J2、Jun s I和Jun v I或其至少一種片段、以及Cry J1、Cry J2、Jun s I或Jun v I的片段或者其至少一種片段的核酸序列轉化的宿主細胞中產生的純化的Cry J1、Cry J2、Jun s I和Jun v I以及其至少一種片段，以及合成制備的Cry J1、Cry J2、Jun s I或Jun v I的片段。Cry J1、Cry J2、Jun s I和Jun v I以及其片段被公開可用于診斷、治療和預防日本柳杉花粉癥。該發明還提供Cry J1和Cry J2的分離的肽。在該發明范圍內的肽包含Cry J1或Cry J2的至少一個T細胞表位，或者優選至少兩個T細胞表位。該發明還涉及經修飾的肽，該肽具有與對應的天然存在的變應原或其部分相似的或增強的治療特性但具有減少的副作用。還提供了治療或診斷個體中對日本柳杉花粉敏感的方法以及包含一種或多種該發明的肽的治療組合物和多重肽制劑(multipeptide formulation)。該發明沒有教導如何將表位或變應原合并進具有免疫刺激特性的DNA疫苗中。