[發(fā)明專利]對低強度電離放射線敏感的基因的檢測方法及用所述方法檢測的基因

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201280073087.4
• 申請日: 2012-05-18
• 公開（公告）號: CN104271764A
• 公開（公告）日: 2015-01-07
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 金熙善;崔承鎮(zhèn);崔茂鉉;奉珍鐘;申碩澈
• 申請（專利權(quán)）人: 韓國水力原子力株式會社
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;A61N5/00
• 代理公司: 北京銘碩知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11286
• 代理人: 韓明星;孫昌浩

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種對低強度電離放射線敏感的基因的檢測方法及用所述方法檢測的基因，尤其涉及一種對癌癥誘發(fā)小鼠和正常小鼠照射低強度放射線，從而由胸腺分類在正常小鼠和癌癥誘發(fā)小鼠中共同特異地觀察到的與免疫和細(xì)胞死亡相關(guān)聯(lián)的基因的對低強度電離放射線敏感的基因的檢測方法。

背景技術(shù)

隨著工業(yè)及醫(yī)療用放射線的利用的增加，關(guān)于對人體的影響的研究正在多樣地進行，主要是利用放射線照射的癌癥治療方面的關(guān)注對象。已知高劑量電離放射線會引起DNA損傷、基因變形以及包括癌癥的疾病，然而200mGy以下的劑量和6mGy/小時以下的劑量率的放射線卻激活免疫反應(yīng)而抑制癌的出現(xiàn)。

通常，對于放射線與致癌之間的相關(guān)性(尤其是基因反應(yīng))的研究進行至今，然而夾雜有妨礙其結(jié)果的可靠性的干擾變量。然而，對于目前為止的大部分研究而言，使一部分基因變形或者利用癌細(xì)胞株，因此無法說明構(gòu)成身體的細(xì)胞、組織、臟器以及在身體階段觀察到的多種多樣的反應(yīng)。即，由于利用普通老鼠而評估基因反應(yīng)，因此表達基因多種多樣，不僅如此，由于癌的出現(xiàn)并未局限于特定臟器，因此存在難以解釋基因反應(yīng)的問題。

對于現(xiàn)有技術(shù)中為了癌癥研究而利用細(xì)胞的方法而言，使基因發(fā)生改變或者將放射線照射于致癌方面重要的p53缺失的癌細(xì)胞，因此與正常細(xì)胞的反應(yīng)根本上不同，故存在無法將其結(jié)果應(yīng)用于個體的問題，且為了緩解這樣的缺點，利用基因與人類相似95％以上的小鼠而進行針對放射線的致癌研究。然而，由于通常的小鼠的自然癌變發(fā)生率很低，因此利用多種多樣的癌癥研究用模型小鼠。

現(xiàn)有的研究內(nèi)容為了發(fā)掘?qū)Φ蛷姸?0.7mGy/小時)放射線敏感的基因而利用了多種多樣的方法。然而，本發(fā)明中披露的基因卻未曾在現(xiàn)有技術(shù)中公開其為對低強度(0.7mGy/小時)放射線敏感的基因。

在本發(fā)明的對低強度(0.7mGy/小時)放射線敏感的基因譜(gene?profile)的發(fā)掘方面，有如下的現(xiàn)有技術(shù)。

①在人類乳腺上皮細(xì)胞中利用基因探測方法而發(fā)掘出了對放射線敏感的基因(Malone?J，Ullrich?R(2007)Radiat?Res?167：176-1847)。

②在照射放射線的人類淋巴球中，利用微陣列和定量核酸擴增法而發(fā)現(xiàn)了對早期放射線敏感的基因(Turtoi?A?et.al.(2008)Int?J?Radiat?Biol?84：375-387)。

③在照射1-7Gy的雄性BALB/c小鼠中，通過血液蛋白質(zhì)分析而發(fā)掘出了生物學(xué)劑量標(biāo)記因子(Ossetrova?NI，Blakely?WF(2009)Int?J?Radiat?Biol?85：837-850)。

④通過針對代表生物學(xué)網(wǎng)絡(luò)的500個基因的線性回歸分析，確認(rèn)了包含c-Jun、HDAC1、RELA(NFKB的p65?subunit)、PKC-beta、SUMO-1、c-Abl、STAT1、AR、CDK1、IRF1的10個樞紐基因(hub?gene)網(wǎng)絡(luò)(Eschrich?S?et.al.(2009)Int?J?Radiat?Oncol?Biol?Phys?75：497-505)。

⑤在277個人類淋巴球細(xì)胞株中，發(fā)掘出了可預(yù)測放射線反應(yīng)的單堿基變異標(biāo)記因子(Niu?N?et.al.(2010)Genome?Res?20：1482-1492)。

⑥在最近的研究中，利用作為模仿人類的表皮組織的三維組織模型的EPI-200組織，對放射線照射反應(yīng)提供了新的見解(Mezentsev?A，Amundson?SA(2011)Radiat?Res?175：677-688)。

⑦在測定放射線暴露和毒性方面，將基于RNA的表達分析法利用為了生物學(xué)劑量評估手段(Pogosova-Agadjanyan?EL?et.al.(2011)Radiat?Res?175：172-184)。

⑧利用多重定量核酸擴增法和特定基因表達分析法而在人類淋巴球和白血球中發(fā)掘出了對放射線敏感的基因(Kabacik?S?et.al.(2011)Int?J?Radiat?Biol?87：115-129)。

基于此，本申請的發(fā)明人致力于尋找對低強度電離放射線反應(yīng)敏感的基因的過程中，分析對免疫(Ighg、Saa2、Defb6、Reg3g、Tac2以及Igh-VJ558)和細(xì)胞死亡(Klk1b27)重要的7個基因的功能，并確認(rèn)沒有關(guān)于所述7個基因的報告，從而完成了本發(fā)明。

發(fā)明內(nèi)容

技術(shù)問題