[發明專利]包含MRSA PBP2A及其片段的蛋白、編碼它們的核酸、以及組合物及它們預防和治療MRSA感染的用途

有效

• 申請號: 201280069488.2
• 申請日: 2012-12-11
• 公開（公告）號: CN104254616B
• 公開（公告）日: 2016-11-30
• 發明（設計）人: D·B·韋納;M·P·莫羅
• 申請（專利權）人: 賓夕法尼亞大學托管會
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68
• 代理公司: 上海專利商標事務所有限公司 31100
• 代理人: 陶家蓉

技術領域

本發明涉及共有抗原性MRSA?PBP2a蛋白及其上的片段和編碼它們的核酸分子；涉及包含此類蛋白和/或核酸分子的改進的MRSA疫苗；以及涉及使用所述疫苗誘導免疫應答和預防MRSA感染和/或治療感染有MRSA的個體的方法。

發明背景

甲氧西林敏感性金黃色葡萄球菌(Staphylococcus?aureus)(MSSA)是指所有抗生素敏感性金黃色葡萄球菌株系。因此，MSSA是指導致大部分金黃色葡萄球菌感染并可用青霉素類抗生素治療的常見類型的金黃色葡萄球菌。相比之下，耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)是指耐一系列青霉素抗生素(包括甲氧西林)的金黃色葡萄球菌的亞組。MRSA最早在1961年在推出抗生素甲氧西林后不久就出現了。MSSA和MRSA均具有允許粘附到細胞表面和免疫逃避/殺滅的毒力/致病性因素。為比較MRSA和MSSA的致病性而開展的研究得到了一些相互矛盾的數據。然而，清楚的是，或許MRSA與MSSA之間最明顯的差異是MRSA的甲氧西林耐藥性。MRSA的耐藥性因在細菌表面上存在青霉素結合蛋白2a(PBP2a)而產生。PBP2a蛋白由mecA基因編碼。

包括MRSA(耐甲氧西林金黃色葡萄球菌)的金黃色葡萄球菌感染在醫院和其他醫療保健機構(諸如療養院和透析中心)中的人員中最常發生。這些醫療保健相關性葡萄球菌感染包括手術傷口感染、尿道感染、血流感染和肺炎等。MRSA可導致皮膚感染，這些感染可看起來像丘疹或癤子，并可能發紅、腫脹、疼痛或具有膿液或其他引流。更嚴重的感染可導致肺炎、血流感染或手術傷口感染。發生嚴重MRSA感染(即，侵入性)的人群的最近估計數量為約94,360名患者。大約18,650人在住院期間因嚴重MRSA感染而死亡(約20％的死亡率)。

已報道了使用具有編碼PBP2a或其片段的核酸序列的質粒開發抗MRSA的DNA疫苗的努力。Ohwada?A等人，DNA?vaccination?by?mecA?sequence?evokes?an?antibacterial?immune?response?against?methicillin-resistant?Staphylococcus?aureus，J?Antimicrob?Chemother.1999年12月；44(6)：767-74描述了DNA質粒的肌內注射，該質粒包含由N315MRSA分離株克隆的編碼PBP2a蛋白的mecA基因。Roth?DM等人，Evaluation?of?the?humoral?immune?response?in?BALB/c?mice?immunized?with?a?naked?DNA?vaccine?anti-methicillin-resistant?Staphylococcus?aureus，Genet?Mol?Res.2006年8月31日；5(3)：503-12以及Senna?JP等人，Protective?immune?response?against?methicillin?resistant?Staphylococcus?aureus?in?a?murine?model?using?a?DNA?vaccine?approach.Vaccine.2003年6月2日；21(19-20)：2661-6報道了將肌內注射用于遞送DNA質粒，該質粒僅包含由HSP-03臨床MRSA分離株克隆的mecA基因的249個堿基對片段。

仍需要可用于預防或治療MRSA感染的疫苗。仍需要編碼MRSAPBP2a或其片段的核苷酸序列，其在并入疫苗中時可以高水平表達，使得誘導針對表達PBP2a的MRSA金黃色葡萄球菌的有效免疫應答，從而在受感染個體中提供治療作用或對MRSA感染的長期防護。

發明概要

本發明提供了核酸分子，其編碼包括MRSA?PBP2a蛋白或其包含至少245個氨基酸的片段的蛋白。在一些實施方案中，該蛋白包含連接到MRSA?PBP2a蛋白或其片段的信號肽。在一些實施方案中，該信號肽為IgE信號肽。