[發(fā)明專利]超載和洗脫層析

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201280065729.6
• 申請(qǐng)日: 2012-11-02
• 公開（公告）號(hào): CN104023804A
• 公開（公告）日: 2014-09-03
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: D·納達(dá)拉賈;A·梅塔
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 弗·哈夫曼-拉羅切有限公司
• 主分類號(hào): B01D15/08
• 分類號(hào): B01D15/08
• 代理公司: 北京市中咨律師事務(wù)所 11247
• 代理人: 黃革生;林柏楠

1.用于從包含多肽和一種或多種污染物的組合物中純化多肽的方法，所述方法包括

a)以超過(guò)層析材料對(duì)于多肽的動(dòng)態(tài)結(jié)合容量的量將組合物裝載到層析材料上，

b)在一種或多種污染物仍然與層析材料結(jié)合的條件下，從層析材料上洗脫多肽，和

c)混合包含步驟a)和b)的層析流出液中的多肽的級(jí)分。

2.權(quán)利要求1的方法，其中多肽是抗體或免疫粘附素。

3.權(quán)利要求2的方法，其中多肽是免疫粘附素。

4.權(quán)利要求2的方法，其中多肽是抗體。

5.權(quán)利要求4的方法，其中抗體是單克隆抗體。

6.權(quán)利要求5的方法，其中單克隆抗體是嵌合抗體、人源化抗體，或人抗體。

7.權(quán)利要求5的方法，其中單克隆抗體是IgG單克隆抗體。

8.權(quán)利要求4的方法，其中抗體是抗原結(jié)合片段。

9.權(quán)利要求8的方法，其中抗原結(jié)合片段是Fab片段、Fab’片段、F(ab’)₂片段、scFv、di-scFv、bi-scFv、串聯(lián)(di,tri)-scFv、Fv、sdAb、三功能抗體、BiTE、雙抗體或三價(jià)抗體。

10.權(quán)利要求1的方法，其中多肽是酶、激素、融合蛋白、含有Fc的蛋白質(zhì)、免疫綴合物、細(xì)胞因子或白介素。

11.權(quán)利要求1-10中任一項(xiàng)的方法，其中至少一種污染物是中華倉(cāng)鼠卵巢蛋白(CHOP)、宿主細(xì)胞蛋白(HCP)、泄露的蛋白A、羧肽酶B、核酸、DNA、產(chǎn)物變體、聚集的蛋白質(zhì)、細(xì)胞培養(yǎng)基組分、慶大霉素、多肽片段、內(nèi)毒素和病毒性污染物中的任何一種或多種。

12.權(quán)利要求1-11中任一項(xiàng)的方法，其中層析材料是混合模式材料、陰離子交換材料、疏水性相互作用材料，或親和材料。

13.權(quán)利要求1-12中任一項(xiàng)的方法，其中裝載密度在約50g/L至約2000g/L之間。

14.權(quán)利要求13的方法，其中裝載密度在約200g/L至約1000g/L之間。

15.權(quán)利要求1-14中任一項(xiàng)的方法，其中以約層析材料對(duì)于一種或多種污染物的動(dòng)態(tài)結(jié)合容量將組合物裝載到層析材料上。

16.權(quán)利要求1-15中任一項(xiàng)的方法，其中以層析材料對(duì)于多肽的動(dòng)態(tài)結(jié)合容量的20倍將組合物裝載到層析材料上。

17.權(quán)利要求1-16中任一項(xiàng)的方法，其中層析材料對(duì)多肽的分配系數(shù)大于30。

18.權(quán)利要求17的方法，其中層析材料對(duì)多肽的分配系數(shù)大于100。

19.權(quán)利要求1-18中任一項(xiàng)的方法，其中方法還包括使用裝載緩沖液和洗脫緩沖液。

20.權(quán)利要求19的方法，其中洗脫緩沖液具有小于裝載緩沖液的電導(dǎo)率的電導(dǎo)率。

21.權(quán)利要求20的方法，其中裝載緩沖液具有約4.0mS至約7.0mS的電導(dǎo)率。

22.權(quán)利要求20的方法，其中洗脫緩沖液具有約0.0mS至約7.0mS的電導(dǎo)率。

23.權(quán)利要求19的方法，其中洗脫緩沖液具有大于裝載緩沖液的電導(dǎo)率的電導(dǎo)率。

24.權(quán)利要求23的方法，其中裝載緩沖液具有約4.0mS至約10.0mS的電導(dǎo)率。

25.權(quán)利要求23的方法，其中裝載緩沖液具有約4.0mS至約7.0mS的電導(dǎo)率。

26.權(quán)利要求23的方法，其中洗脫緩沖液具有約5.5mS至約17.0mS的電導(dǎo)率。

27.權(quán)利要求19的方法，其中洗脫緩沖液的電導(dǎo)率在約10倍柱體積(CV)中以從約5.5mS至約1.0mS的梯度減少。

28.權(quán)利要求19的方法，其中洗脫緩沖液的電導(dǎo)率在約15CV中以從約5.5mS至約1.0mS的梯度減少。

29.權(quán)利要求19的方法，其中洗脫緩沖液的電導(dǎo)率在約5CV中以從約10.0mS至約1.0mS的梯度減少。