[發(fā)明專利]平面膜片鉗裝置、該裝置用電極部及細(xì)胞離子通道電流測(cè)量方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201280063562.X
• 申請(qǐng)日: 2012-12-05
• 公開（公告）號(hào): CN104024839B
• 公開（公告）日: 2016-11-16
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 宇理須恒雄;王志宏;宇野秀隆;森蒂爾·庫(kù)馬爾·奧布里拉吉;長(zhǎng)岡靖崇
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 國(guó)立研究開發(fā)法人科學(xué)技術(shù)振興機(jī)構(gòu)
• 主分類號(hào): G01N27/28
• 分類號(hào): G01N27/28;C12M1/34;C12Q1/02;G01N27/00;G01N27/416
• 代理公司: 中科專利商標(biāo)代理有限責(zé)任公司 11021
• 代理人: 吳秋明

1.一種平面膜片鉗裝置，其特征在于，

(1)在電絕緣性基板設(shè)置1個(gè)以上微細(xì)的貫通孔，該貫通孔使電絕緣性基板兩側(cè)的表面連通且盡管不會(huì)使細(xì)胞通過(guò)但能使液體通過(guò)，(2)在所述貫通孔的第一表面?zhèn)扰c第二表面?zhèn)确謩e設(shè)置：用于保持導(dǎo)電性液體的貯液槽部；和被配置成能對(duì)該貯液槽部的導(dǎo)電性液體通電的電極部，(3)第一表面?zhèn)鹊馁A液槽部被作為細(xì)胞配置用的貯液槽部，進(jìn)一步(4)所述第一表面?zhèn)燃暗诙砻鎮(zhèn)鹊碾姌O部具備以下的(a)～(c)要素：

(a)電極容器，在向所述貯液槽部導(dǎo)入了導(dǎo)電性液體時(shí)與該導(dǎo)電性液體相接的容器壁的至少一部分由無(wú)機(jī)多孔材料構(gòu)成；

(b)電極，其被收納在所電極容器內(nèi)且在貴金屬Nm的表層部形成了該貴金屬的氯化物NmCl層；以及

(c)電極溶液，其被填充在所述電極容器內(nèi)且以飽和濃度溶解了所述貴金屬的氯化物NmCl及堿金屬氯化物。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的平面膜片鉗裝置，其特征在于，

所述第一表面?zhèn)荣A液槽部由第1貯液槽、第2貯液槽和使這些主貯液槽及副貯液槽連通的狹窄的通液路徑構(gòu)成，該第1貯液槽由不透光性的材料構(gòu)成且用于配置細(xì)胞，第2貯液槽配置了第一表面?zhèn)鹊碾姌O部。

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的平面膜片鉗裝置，其特征在于，

所述第二表面?zhèn)鹊馁A液槽部和用于將導(dǎo)電性液體導(dǎo)入及排出的通液路徑連通，且在該通液路徑中配置了第二表面?zhèn)鹊碾姌O部。

4.根據(jù)權(quán)利要求1～3中任一項(xiàng)所述的平面膜片鉗裝置，其特征在于，

在所述第一表面?zhèn)仍O(shè)置多個(gè)貯液槽部，在這些貯液槽部形成有具有比神經(jīng)細(xì)胞的細(xì)胞體大的寬度和能夠阻止培養(yǎng)狀態(tài)的細(xì)胞體的移動(dòng)的深度的凹部。

5.根據(jù)權(quán)利要求1～4中任一項(xiàng)所述的平面膜片鉗裝置，其特征在于，

所述平面膜片鉗裝置具備以下的(A)及/或(B)的構(gòu)成：

(A)第二表面?zhèn)鹊馁A液槽部與液體吸引設(shè)備相連接，通過(guò)該液體吸引設(shè)備能夠?qū)Φ诙砻鎮(zhèn)鹊馁A液槽部施加負(fù)壓；

(B)使具有細(xì)胞固定力的細(xì)胞外基質(zhì)形成物質(zhì)附著在基板的貫通孔中的第一表面?zhèn)鹊拈_口部周緣。

6.一種平面膜片鉗裝置用電極部，其特征在于，

具備以下的(a’)～(c’)的要素：

(a’)容器壁的至少一部分由無(wú)機(jī)多孔材料構(gòu)成的電極容器；

(b’)被收納于上述電極容器內(nèi)且在貴金屬Nm的表層部形成了該貴金屬的氯化物NmCl層的電極；和

(c’)被填充于上述電極容器內(nèi)且以飽和濃度溶解了所述貴金屬的氯化物NmCl及堿金屬氯化物的電極溶液。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的平面膜片鉗裝置用電極部，其特征在于，

構(gòu)成所述容器壁的至少一部分的無(wú)機(jī)多孔材料是多孔玻璃或多孔陶瓷。

8.根據(jù)權(quán)利要求6或7所述的平面膜片鉗裝置用電極部，其特征在于，

所述貴金屬Nm為銀Ag或鉑Pt，

所述堿金屬氯化物為氯化鉀KCl。

9.根據(jù)權(quán)利要求6～8中任一項(xiàng)所述的平面膜片鉗裝置用電極部，其特征在于，

所述電極為以下的(C)或(D)：

(C)是向電極容器內(nèi)部突出的棒狀電極，在由貴金屬Nm構(gòu)成的芯材的表層部形成有貴金屬氯化物NmCl層，

(D)是在電極容器的壁部的內(nèi)周面形成的筒狀電極，容器壁部側(cè)的底層為貴金屬Nm的蒸鍍層，與電極溶液相接的表面層為貴金屬氯化物NmCl的蒸鍍層。

10.一種細(xì)胞離子通道電流測(cè)量方法，其特征在于，

向權(quán)利要求1～5中任一項(xiàng)所述的平面膜片鉗裝置的第二表面?zhèn)鹊馁A液槽部導(dǎo)入導(dǎo)電性液體，并且向第一表面?zhèn)鹊馁A液槽部導(dǎo)入使作為測(cè)量對(duì)象的細(xì)胞分散的導(dǎo)電性液體，使第一表面?zhèn)鹊馁A液槽部與第二表面?zhèn)鹊馁A液槽部以導(dǎo)電的方式連通，將所述細(xì)胞配置在第一表面?zhèn)鹊馁A液槽部的規(guī)定位置，在此基礎(chǔ)上向第一表面?zhèn)燃暗诙砻鎮(zhèn)鹊碾姌O部的電極間施加電壓，由此對(duì)作為測(cè)量對(duì)象的細(xì)胞的離子通道電流進(jìn)行測(cè)量。

11.根據(jù)權(quán)利要求10所述的細(xì)胞離子通道電流測(cè)量方法，其特征在于，

在所述平面膜片鉗裝置的基板的第一表面?zhèn)仍O(shè)置多個(gè)具有權(quán)利要求4所述的構(gòu)成的貯液槽部，

作為測(cè)量對(duì)象的細(xì)胞為神經(jīng)細(xì)胞，

導(dǎo)電性液體為所述神經(jīng)細(xì)胞的細(xì)胞培養(yǎng)液。