[發(fā)明專利]液體酶制劑及其制備方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201280053784.3
• 申請(qǐng)日: 2012-10-31
• 公開（公告）號(hào): CN104024406A
• 公開（公告）日: 2014-09-03
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: K·拉亞卡里;K·霍塔凱寧;P·米拉里寧
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 維利奧有限公司
• 主分類號(hào): C12N9/10
• 分類號(hào): C12N9/10
• 代理公司: 北京市中咨律師事務(wù)所 11247
• 代理人: 柴云峰;黃革生

發(fā)明領(lǐng)域

本發(fā)明涉及液體酶制劑，特別涉及液體的且穩(wěn)定的制劑，其包含交聯(lián)酶和/或酶修飾乳蛋白質(zhì)。本發(fā)明特別涉及液體的且穩(wěn)定的轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶制劑。此外，本發(fā)明涉及用于制備液體酶制劑的方法。

發(fā)明背景

包含交聯(lián)酶和/或酶修飾乳蛋白，如漆酶、酪氨酸酶、過氧化物酶、巰基氧化酶或葡萄糖氧化酶的酶制劑是均可以通過商業(yè)途徑在粉末制劑和液體制劑中獲得。然而，轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶和蛋白谷氨酰胺酶產(chǎn)品目前在市場(chǎng)上僅為粉末形式。粉末酶產(chǎn)品的使用并不被完全接受，這是由于所有生產(chǎn)工廠中存在粉塵形成。因粉塵引起的健康危害尤其已經(jīng)在工人中引起了擔(dān)憂。

來自茂原鏈輪絲菌(Streptoverticillium?mobaraense)菌株的轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶及其制備方法已經(jīng)公開于歐洲專利號(hào)0379606B1中。此外，使用從利迪鏈霉菌(Streptomyces?lydicus)菌株分離的基因產(chǎn)生轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶的方法公開于歐洲專利號(hào)0777726B1中。

與配制酶(如液體形式的轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶)相關(guān)的問題之一是制劑穩(wěn)定性的缺乏。此外，與本液體酶制劑相關(guān)的缺點(diǎn)之一是它們含有至少一種防腐劑。

發(fā)明簡(jiǎn)述

本發(fā)明的目標(biāo)因此是提供包含轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶和/或另一乳蛋白交聯(lián)和/或修飾酶，如漆酶、酪氨酸酶、過氧化物酶、巰基氧化酶、葡萄糖氧化酶或蛋白谷氨酰胺酶的液體酶制劑，其是穩(wěn)定的且可以在室溫或冰箱和/或冷庫溫度下儲(chǔ)存商業(yè)制劑所需的時(shí)間期限。

本發(fā)明的另一目標(biāo)是提供包含轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶的液體制劑，其是穩(wěn)定的且可以在室溫或冰箱和/或冷庫溫度下儲(chǔ)存商業(yè)制劑所需的時(shí)間期限。

本發(fā)明的其他目標(biāo)是提供用于制備穩(wěn)定的液體酶制劑的方法，所述酶制劑包含轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶和/或另一乳蛋白交聯(lián)和/或修飾酶。

本發(fā)明的甚至其他目標(biāo)是提供用于制備穩(wěn)定的液體制劑的方法，所述液體制劑包含轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶。

通過獨(dú)立權(quán)利要求中給出的制劑和方法完成本發(fā)明的目標(biāo)。本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方案描述于從屬權(quán)利要求中。

本發(fā)明的其他目標(biāo)、細(xì)節(jié)和優(yōu)點(diǎn)將從以下詳細(xì)說明和實(shí)施例中變得顯而易見。

發(fā)明詳述

乳蛋白交聯(lián)和/或修飾酶，如轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶、漆酶、酪氨酸酶、過氧化物酶、巰基氧化酶和蛋白谷氨酰胺酶催化乳蛋白的修飾。這些酶的作用之間，進(jìn)一步與葡萄糖氧化酶的作用之間看起來存在協(xié)同作用。不受任何理論的束縛，葡萄糖氧化酶和/或過氧化物酶看起來催化這樣的反應(yīng)，其中通過過氧化氫的形成釋放氧氣。氧氣然后可以催化(氧化)酪氨酸酶的交聯(lián)。

乳蛋白交聯(lián)和/或修飾酶，如轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶、漆酶、酪氨酸酶、過氧化物酶、巰基氧化酶和蛋白谷氨酰胺酶任選地與葡萄糖氧化酶一起用于加工魚、肉和蛋產(chǎn)品、漿料和pates、水果、漿果和蔬菜、豆制品、谷物制品、面包和烘焙產(chǎn)品的制造。

以下乳蛋白交聯(lián)和/或修飾酶在乳制品或其他食品范疇內(nèi)的食品加工中是全部相關(guān)的。

轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶是催化蛋白質(zhì)分子中存在的谷氨酰胺與賴氨酸氨基酸殘基之間產(chǎn)生共價(jià)鍵的酶家族(EC2.3.2.13)。當(dāng)形成鍵時(shí)，會(huì)釋放氨。

來源于真菌和細(xì)菌，如真菌白腐菌(Trametes?hirsute)的漆酶(EC1.10.3.2)催化碳水化合物與蛋白質(zhì)之間的交聯(lián)(氧化芳族化合物和半胱氨酸)，其在食品加工中具有應(yīng)用，例如用于減少變應(yīng)原性。

酪氨酸酶(EC1.14.18.1)是催化酚類，如酪氨酸氧化的酶，其在食品加工中具有應(yīng)用，例如用于減少變應(yīng)原性。

過氧化物酶(EC1.11.1.7)是催化芳族化合物氧化的酶家族，其在食品加工中具有應(yīng)用，例如用于減少變應(yīng)原性。

巰基氧化酶(EC1.8.3.3)催化二硫鍵的形成、谷胱甘肽的氧化。

蛋白谷氨酰胺酶催化蛋白質(zhì)結(jié)合的谷氨酰胺的脫酰胺作用，并將谷氨酰胺轉(zhuǎn)化成谷氨酸。

葡萄糖氧化酶催化蛋白質(zhì)交聯(lián)的形成和戊聚糖的氧化膠凝。

乳蛋白交聯(lián)和/或修飾酶，如轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶、漆酶、酪氨酸酶、過氧化物酶、巰基氧化酶和蛋白谷氨酰胺酶用于乳制品工業(yè)，以穩(wěn)定基于乳的產(chǎn)品結(jié)構(gòu)。除了乳制品工業(yè)，這些酶用于加工魚、肉和蛋產(chǎn)品、漿料和pates、水果、漿果和蔬菜、豆制品、谷物制品、面包和烘焙產(chǎn)品的制造。因此，液體酶制劑適合于例如乳制品、加工魚、肉、蛋、漿料和pates、水果、漿果和蔬菜、大豆、谷物、面包和烘焙產(chǎn)品的制造。尤其在工業(yè)規(guī)模的制造中，液體酶制劑的使用比粉末制劑的使用會(huì)更實(shí)際且更有利。