[發明專利]用于檢測含組蛋白變體的核小體的方法

在審

• 申請號: 201280053594.1
• 申請日: 2012-08-31
• 公開（公告）號: CN104053993A
• 公開（公告）日: 2014-09-17
• 發明（設計）人: J.V.米克萊夫
• 申請（專利權）人: 新加坡意志私人有限公司
• 主分類號: G01N33/574
• 分類號: G01N33/574;G01N33/68
• 代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司 72001
• 代理人: 林毅斌;權陸軍

1.?一種包含組蛋白變體或組蛋白同種型的無細胞核小體，其用作診斷癌癥、心肌病、系統性紅斑狼瘡、結腸炎、慢性阻塞性肺病、克羅恩病和類風濕性關節炎的生物標志物。

2.?如權利要求1中定義使用的核小體，其中所述核小體為單核小體或寡核小體。

3.?如權利要求1或權利要求2中定義使用的核小體，其中在血樣中測定包含組蛋白變體或組蛋白同種型的所述無細胞核小體。

4.?如權利要求1-3中任一項所定義使用的核小體，其中所述癌癥為膀胱、乳腺、結腸、宮頸、食道、腎、大腸、肺、口腔、卵巢、胰腺、前列腺、直腸、皮膚或胃的癌癥。

5.?如權利要求4中定義使用的核小體，其中所述癌癥為結腸、肺、口腔或胰腺的癌癥。

6.?一種用于檢測樣品中含組蛋白變體或組蛋白同種型的核小體的存在的方法，所述方法包括步驟：

(i)使所述樣品與結合劑接觸，所述結合劑與所述組蛋白變體或組蛋白同種型結合；

(ii)檢測或定量所述結合劑與樣品中所述組蛋白變體或組蛋白同種型的結合；和

(iii)使用所述結合的存在或程度作為樣品中所述組蛋白變體或組蛋白同種型或者含所述組蛋白變體或組蛋白同種型的核小體的存在的量度。

7.?一種用于檢測樣品中含組蛋白變體或組蛋白同種型的核小體的存在的方法，所述方法包括步驟：

(i)使所述樣品與第一結合劑接觸，所述第一結合劑與核小體結合；

(ii)使所述核小體或樣品與第二結合劑接觸，所述第二結合劑與所述組蛋白變體或組蛋白同種型結合；

(iii)檢測或定量所述第二結合劑與樣品中組蛋白變體或組蛋白同種型的結合；和

(iv)使用所述結合的存在或程度作為樣品中含所述組蛋白變體或組蛋白同種型的核小體的存在的量度。

8.?一種用于檢測樣品中含組蛋白變體或組蛋白同種型的核小體的存在的方法，所述方法包括步驟：

(i)使所述樣品與第一結合劑接觸，所述第一結合劑與所述組蛋白變體或組蛋白同種型結合；

(ii)使所述核小體或樣品與第二結合劑接觸，所述第二結合劑與所述核小體結合；

(iii)檢測或定量所述第二結合劑與樣品中核小體的結合；和

(iv)使用所述結合的存在或程度作為樣品中含所述組蛋白變體或組蛋白同種型的核小體的存在的量度。

9.?如權利要求6-8中任一項所定義的方法，其中所述組蛋白同種型為存在于全部或大部分核小體中以測試核小體本身的常見組蛋白同種型。

10.?如權利要求6-9中任一項所定義的方法，其中用于結合組蛋白的結合劑靶向結合所述組蛋白中這樣的區，其為所述組蛋白部分的全部或大部分組蛋白變體或同種型所共有并存在于全部或大部分核小體中，以測試核小體本身。

11.?如權利要求6-10中任一項所定義的方法，其中所述結合劑為抗體。

12.?依照權利要求6-11中任一項的方法，其中所述樣品為生物流體。

13.?依照權利要求6-12中任一項的方法，其中所述樣品為血液、血清或血漿。

14.?如權利要求6-13中任一項所定義的用于在細胞中檢測含組蛋白變體或組蛋白同種型的核小體的存在的方法，所述方法包括步驟：

(i)自細胞中分離染色質；

(ii)消化、超聲處理或以其它方式分解所述染色質以形成單核小體和/或寡核小體；和

(iii)依照權利要求6-13中任一項的方法檢測或測定所述核小體中所述組蛋白變體或組蛋白同種型的存在。

15.?一種用于在血液、血清或血漿樣品中檢測含組蛋白變體或組蛋白同種型的核小體的存在的方法，所述方法包括步驟：

(i)自核小體復合物中移出、釋放或提取組蛋白變體或同種型以產生游離的組蛋白變體或同種型部分；

(ii)檢測或定量樣品中的游離組蛋白變體或同種型；和

(iii)使用游離組蛋白變體或同種型的存在或量作為樣品中含所述組蛋白變體或組蛋白同種型的核小體的存在的量度。