[發(fā)明專利]合成淀粉樣蛋白球體的制造方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201280046592.X
• 申請日: 2012-12-18
• 公開（公告）號: CN103827140A
• 公開（公告）日: 2014-05-28
• 發(fā)明（設計）人: 星美奈子
• 申請（專利權）人: 道健康生活醫(yī)藥株式會社
• 主分類號: C07K14/435
• 分類號: C07K14/435
• 代理公司: 永新專利商標代理有限公司 72002
• 代理人: 王靈菇;白麗

技術領域

本發(fā)明涉及合成淀粉樣蛋白球體（amylospheroid）的制造方法。

背景技術

阿耳茨海默病是經過突觸變性、成熟神經細胞發(fā)展至死亡的疾病。通過最近的研究逐漸清楚，阿耳茨海默病的發(fā)病是階段性的。最初的階段有主要發(fā)生突觸變性的階段。該階段為可逆性的階段。所述可逆性階段的下一階段為發(fā)生神經細胞死亡的階段。該階段為不可逆性的階段，認為由于到了該不可逆性階段而導致阿耳茨海默病發(fā)?。ǚ?a title="鉆瓜專利網">專利文獻1）。

突觸變性主要是蓄積的β淀粉樣蛋白（Aβ）二聚體和十二聚體作用于谷氨酸受體等而發(fā)生的。但是，Aβ二聚體和十二聚體在體外和體內均不引起神經細胞死亡（非專利文獻2）。因此，為了分析人的阿耳茨海默病的病理狀態(tài)，需要弄清楚在可逆性的突觸變性階段之后的不可逆性階段發(fā)生的神經細胞死亡的原因和分子機理。

淀粉樣蛋白球體（ASPD）為對非神經細胞和幼稚神經細胞不顯示毒性而選擇性地引起功能上成熟的神經細胞死亡的獨特的Aβ集合體（Aβaggregate）（非專利文獻1）。淀粉樣蛋白球體最初作為在體外引起神經細胞死亡的直徑為約10nm的球狀Aβ集合體而被分離（非專利文獻3）。其后，制作了針對該合成淀粉樣蛋白球體的特異性抗體（專利文獻1和2），使用該抗體從阿耳茨海默病的人患者的腦中分離了在生物體內形成（即天然的）的淀粉樣蛋白球體（非專利文獻3）。從使用了該天然的淀粉樣蛋白球體的研究弄清楚了：i）天然的淀粉樣蛋白球體與合成淀粉樣蛋白球體同樣地選擇性地誘發(fā)成熟神經細胞發(fā)生細胞死亡，并且ii）可見神經細胞脫落的阿耳茨海默病患者的大腦皮質中的天然的淀粉樣蛋白球體量與阿耳茨海默病的嚴重程度相關地增加，而且iii）幾乎未見神經細胞脫落的阿耳茨海默病患者的小腦中的天然的淀粉樣蛋白球體量僅微量存在（非專利文獻3）。因此認為，淀粉樣蛋白球體在阿耳茨海默病發(fā)病的不可逆性階段發(fā)揮著重要作用。此外，天然的淀粉樣蛋白球體還從路易體癡呆（Dementia?withLewy?Bodies）患者的腦中檢測到（非專利文獻1），考慮對于路易體癡呆，淀粉樣蛋白球體也在其發(fā)病中發(fā)揮著重要作用。

另外還顯示，淀粉樣蛋白球體與被認為是引起突觸變性的主要原因的Aβ二聚體和十二聚體雖然均為Aβ集合體，但是其是由Aβ單體通過不同路徑而形成的。即，與Aβ二聚體和十二聚體經由Aβ二聚體不同，淀粉樣蛋白球體由Aβ三聚體形成（非專利文獻4）。

現有技術文獻

專利文獻

專利文獻1：WO2006/016644

專利文獻2：WO2009/057664

非專利文獻

非專利文獻1：Noguchi?et?al.J.Biol.Chem.vol.284no.47,32895-32905（2009）

非專利文獻2：Shankar?et?al.Nature?Medicine14,837-842（2008）

非專利文獻3：Hoshi?et?al.Pro.Natl.Acad.Sci.U.S.A.vol.100,no.11,6370-6375（2003）

非專利文獻4：Matsumura?et?al.J.Biol.Chem.vol.286no.13,11555-11562（2011）

發(fā)明內容

發(fā)明欲解決的課題

如上所述，淀粉樣蛋白球體在阿耳茨海默病、路易體癡呆中發(fā)揮重要作用。但是，從患者腦中純化天然的淀粉樣蛋白球體并用于治療藥等的開發(fā)是非常困難的。因此認為，如果與患者腦中存在的天然淀粉樣蛋白球體等價的合成淀粉樣蛋白球體能夠在體外更容易地制造，則將對阿耳茨海默病、路易體癡呆的研究、和針對這些疾病的預防方法和預防藥、以及治療方法和預防、治療藥的開發(fā)提供很大幫助。例如，以合成淀粉樣蛋白球體本身為抗原的主動疫苗療法的開發(fā)、神經細胞死亡的分子機理研究、神經細胞死亡阻斷藥的開發(fā)將變得容易。另外，由于目前并不清楚人腦中凝聚體形成的機制，因此將合成淀粉樣蛋白球體的形成用于模型體系，還能夠開發(fā)用于阻斷淀粉樣蛋白球體的形成的預防藥。

因此，本發(fā)明提供效率提高的合成淀粉樣蛋白球體的制造方法。

用于解決課題的手段

本發(fā)明在一個方式中涉及包含在增塑劑存在下攪拌含有淀粉樣蛋白β肽的液體的合成淀粉樣蛋白球體的制造方法（以下也稱為“本發(fā)明的制造方法”）。

發(fā)明的效果

根據本發(fā)明的制造方法，能夠提高合成淀粉樣蛋白球體的制造效率。

附圖說明