[發(fā)明專利]用于產(chǎn)生纖維素降解酶的轉(zhuǎn)錄因子

無效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201280046328.6
• 申請(qǐng)日: 2012-07-23
• 公開（公告）號(hào): CN103917653A
• 公開（公告）日: 2014-07-09
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 田朝光;T·肖克;N·L·格拉斯;S·科拉代蒂;J·克雷格
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 加利福尼亞大學(xué)董事會(huì)
• 主分類號(hào): C12P19/14
• 分類號(hào): C12P19/14;C07K14/37
• 代理公司: 北京尚誠知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11322
• 代理人: 龍淳

1.一種使含有纖維素的材料降解的方法，所述方法包括：

a）使含有纖維素的材料與包含至少一個(gè)編碼轉(zhuǎn)錄因子蛋白的重組核酸的真菌宿主細(xì)胞接觸，其中所述轉(zhuǎn)錄因子蛋白包含鋅(2)-半胱氨酸(6)雙核集群域、PFAM04082轉(zhuǎn)錄因子結(jié)構(gòu)域和至少一個(gè)選自SEQ?ID?NO:184、185、186和187的多肽序列；以及

b）將所述真菌宿主細(xì)胞和所述含有纖維素的材料在足以使所述真菌宿主細(xì)胞降解所述含有纖維素的材料的條件下孵育。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中，

所述轉(zhuǎn)錄因子蛋白包含至少一個(gè)選自SEQ?ID?NO:184、185、186和187的額外多肽序列。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中，

所述轉(zhuǎn)錄因子蛋白包含至少兩個(gè)選自SEQ?ID?NO:184、185、186和187的額外多肽序列。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中，

所述轉(zhuǎn)錄因子蛋白包含至少三個(gè)選自SEQ?ID?NO:184、185、186和187的額外多肽序列。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中，

所述轉(zhuǎn)錄因子蛋白包含SEQ?ID?NO:184、185、186和187。

6.根據(jù)權(quán)利要求1～5中任一項(xiàng)所述的方法，其中，

所述真菌宿主細(xì)胞在足以使所述真菌宿主細(xì)胞表達(dá)所述轉(zhuǎn)錄因子蛋白的條件下孵育。

7.根據(jù)權(quán)利要求1～6中任一項(xiàng)所述的方法，其中，

所述真菌宿主細(xì)胞比對(duì)應(yīng)的缺少所述至少一個(gè)重組核酸的真菌宿主細(xì)胞產(chǎn)生更大量的一種或多種纖維素酶。

8.根據(jù)權(quán)利要求1～7中任一項(xiàng)所述的方法，其中，

所述含有纖維素的材料包括生物質(zhì)。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的方法，其中，

所述生物質(zhì)在與所述真菌宿主細(xì)胞接觸之前進(jìn)行預(yù)處理。

10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的方法，其中，

所述預(yù)處理包括選自氨纖維膨脹（AFEX）、蒸汽爆破、高溫處理、高壓處理、堿性水溶液處理、酸性溶液處理、有機(jī)溶劑處理、離子液體（IL）處理、電解水處理和磷酸處理的一種或多種處理。

11.根據(jù)權(quán)利要求8～10中任一項(xiàng)所述的方法，其中，

所述生物質(zhì)包括植物材料。

12.根據(jù)權(quán)利要求11所述的方法，其中，

所述植物材料選自芒草、柳枝稷、大米草、黑麥草、草蘆、象草、蘆葦、麥秸、大麥稈、油菜秸稈、燕麥秸、玉米秸稈、大豆秸稈、燕麥殼、高粱、稻殼、甘蔗渣、玉米纖維、含有可溶物的干酒糟（DDGS）、須芒草、玉米穗軸、松木、樺木、柳木、山楊木、白楊木和能源甘蔗。

13.根據(jù)權(quán)利要求1～12中任一項(xiàng)所述的方法，其中，

所述真菌宿主細(xì)胞還包含一個(gè)或多個(gè)對(duì)參與到至少一種生物燃料的產(chǎn)生的生化通路中的多肽進(jìn)行編碼的重組核酸。

14.根據(jù)權(quán)利要求13所述的方法，還包括：

將所述真菌宿主細(xì)胞與所降解的含有纖維素的材料在足以使所述真菌宿主細(xì)胞將含有纖維素的材料轉(zhuǎn)化成至少一種生物燃料的條件下孵育。

15.根據(jù)權(quán)利要求13或14所述的方法，其中，

所述生物燃料選自乙醇、正丙醇、正丁醇、異丁醇、3-甲基-1-丁醇、2-甲基-1-丁醇、3-甲基-1-戊醇和辛醇。

16.根據(jù)權(quán)利要求1～12中任一項(xiàng)所述的方法，其中，

將所降解的含有纖維素的材料與發(fā)酵微生物在足以從所降解的含有纖維素的材料產(chǎn)生至少一種發(fā)酵產(chǎn)物的條件下培養(yǎng)。

17.一種增加由真菌細(xì)胞產(chǎn)生一種或多種纖維素酶的方法，所述方法包括：

（a）提供包含至少一個(gè)編碼轉(zhuǎn)錄因子蛋白的重組核酸的真菌宿主細(xì)胞，其中所述轉(zhuǎn)錄因子蛋白包含鋅(2)-半胱氨酸(6)雙核集群域、PFAM04082轉(zhuǎn)錄因子結(jié)構(gòu)域和至少一個(gè)選自SEQ?ID?NO:184、185、186和187的多肽序列；以及

（b）將所述宿主細(xì)胞在足以支持所述至少一個(gè)重組核酸的表達(dá)的條件下培養(yǎng)，其中所述真菌宿主細(xì)胞比對(duì)應(yīng)的缺少所述至少一個(gè)重組核酸的宿主細(xì)胞產(chǎn)生更大量的一種或多種纖維素酶。