[發(fā)明專利]由蛋白G細(xì)胞膜外結(jié)構(gòu)域突變體的串聯(lián)型多聚體組成的新型改性蛋白

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201280038040.4
• 申請(qǐng)日: 2012-08-03
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN103748221A
• 公開(kāi)（公告）日: 2014-04-23
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 本田真也;松丸裕之;渡邊秀樹(shù);吉田晝也
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 獨(dú)立行政法人產(chǎn)業(yè)技術(shù)綜合研究所;株式會(huì)社大賽璐
• 主分類號(hào): C12N15/09
• 分類號(hào): C12N15/09;C07K14/315;C07K17/00;C07K19/00;C12N1/15;C12N1/19;C12N1/21;C12N5/10
• 代理公司: 中國(guó)國(guó)際貿(mào)易促進(jìn)委員會(huì)專利商標(biāo)事務(wù)所 11038
• 代理人: 李英

1.蛋白質(zhì)，其由對(duì)具有免疫球蛋白G的Fc區(qū)域的蛋白質(zhì)有結(jié)合活性的、細(xì)胞膜外結(jié)構(gòu)域突變體的串聯(lián)型多聚體組成。

2.權(quán)利要求1所述的蛋白質(zhì)，其為串聯(lián)型三聚體、串聯(lián)型四聚體、或者串聯(lián)型五聚體。

3.權(quán)利要求1或2所述的蛋白質(zhì)，其中構(gòu)成多聚體的細(xì)胞膜外結(jié)構(gòu)域突變體彼此相同。

4.權(quán)利要求1～3中任一項(xiàng)所述的蛋白質(zhì)，其中各細(xì)胞膜外結(jié)構(gòu)域突變體由接頭序列連結(jié)。

5.權(quán)利要求1～4中任一項(xiàng)所述的蛋白質(zhì)，其中對(duì)具有免疫球蛋白G的Fc區(qū)域的蛋白質(zhì)有結(jié)合活性的細(xì)胞膜外結(jié)構(gòu)域是鏈球菌（Streptococcus）屬鏈球菌的蛋白G的B1、B2、或B3中的任一種。

6.權(quán)利要求1～5中任一項(xiàng)所述的蛋白質(zhì)，其對(duì)免疫球蛋白G的Fc區(qū)域有結(jié)合活性，并且相比由野生型蛋白G·B結(jié)構(gòu)域的串聯(lián)型多聚體組成的蛋白質(zhì)，至少，其對(duì)免疫球蛋白G的Fab區(qū)域的結(jié)合活性和/或?qū)c區(qū)域在弱酸性區(qū)域的結(jié)合活性降低。

7.權(quán)利要求1～6中任一項(xiàng)所述的蛋白質(zhì)，其中構(gòu)成多聚體的至少一個(gè)細(xì)胞膜外結(jié)構(gòu)域突變體是以下的突變體蛋白質(zhì)：

是野生型蛋白G·B1結(jié)構(gòu)域蛋白質(zhì)的突變體蛋白質(zhì)，由以下的（a）所示的氨基酸序列組成，或由在（a）所示的氨基酸序列中，缺失、取代、插入或附加1個(gè)或數(shù)個(gè)氨基酸殘基的氨基酸序列組成，其對(duì)免疫球蛋白G的Fc區(qū)域有結(jié)合活性，并且，相比野生型蛋白G·B1結(jié)構(gòu)域蛋白質(zhì)，至少，其對(duì)免疫球蛋白G的Fab區(qū)域的結(jié)合活性和/或?qū)c區(qū)域在弱酸性區(qū)域的結(jié)合活性降低：

(a)AspThrTyrLysLeuIleLeuAsnGlyLysX11LeuLysGlyGluThrX17ThrGluAlaValX22AlaAlaX25AlaGluLysValPheLysX32TyrAlaX35X36X37GlyValX40GlyX42TrpThrTyrAspX47X48ThrLysThrPheThrValThrGlu

（上述氨基酸序列中，X35表示Asn或Lys，X36表示Asp或Glu，X37表示Asn、His、或者Leu，X47表示Asp或Pro，X48表示Ala、Lys或Glu，X22表示Asp或His，X25表示Thr或His，X32表示Gln或His，X40表示Asp或His，X42表示Glu或His，X11表示Thr或Arg，X17表示Thr或Ile；不過(guò)，同時(shí)X35是Asn或Lys、X36是Asp或Glu、X37是Asn或Leu、X47是Asp或Pro、X48是Ala、Lys或Glu、X22是Asp、X25是Thr、X32是Gln、X40是Asp、X42是Glu、X11是Thr，并且排除X17是Thr的情況）。

8.權(quán)利要求1～6中任一項(xiàng)所述的蛋白質(zhì)，其中構(gòu)成多聚體的至少一個(gè)細(xì)胞膜外結(jié)構(gòu)域突變體是以下的突變體蛋白質(zhì)：

是野生型蛋白G·B2結(jié)構(gòu)域蛋白質(zhì)的突變體蛋白質(zhì)，由以下的（b）所示的氨基酸序列組成，或由在（b）所示的氨基酸序列中，缺失、取代、插入或附加1個(gè)或數(shù)個(gè)氨基酸殘基的氨基酸序列組成，其對(duì)免疫球蛋白G的Fc區(qū)域有結(jié)合活性，并且，相比野生型蛋白G·B2結(jié)構(gòu)域蛋白質(zhì)，至少，其對(duì)免疫球蛋白G的Fab區(qū)域的結(jié)合活性和/或?qū)c區(qū)域在弱酸性區(qū)域的結(jié)合活性降低：

(b)ThrThrTyrLysLeuValIleAsnGlyLysX11LeuLysGlyGluThrX17ThrGluAlaValX22AlaAlaX25AlaGluLysValPheLysX32TyrAlaX35X36X37GlyValX40GlyX42TrpThrTyrAspX47X48ThrLysThrPheThrValThrGlu

（上述氨基酸序列中，X35表示Asn或Lys，X36表示Asp或Glu，X37表示Asn、His、或者Leu，X47表示Asp或Pro，X48表示Ala、Lys或Glu，X22表示Asp或His，X25表示Thr或His，X32表示Gln或His，X40表示Asp或His，X42表示Glu或His，X11表示Thr或Arg，X17表示Thr或Ile；不過(guò)，同時(shí)X35是Asn或Lys、X36是Asp或Glu、X37是Asn或His、X47是Asp或Pro、X48是Ala、Lys或Glu、X22是Asp、X25是Thr、X32是Gln、X40是Asp、X42是Glu、X11是Thr，并且排除X17是Thr的情況）。