[發(fā)明專利]雙靶向

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201280037640.9
• 申請日: 2012-05-29
• 公開（公告）號: CN103930445B
• 公開（公告）日: 2021-03-09
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 羅蘭·貝克曼;克里斯蒂安·霍伯特·詹森
• 申請（專利權(quán)）人: 豪夫邁·羅氏有限公司
• 主分類號: C07K16/46
• 分類號: C07K16/46;C07K16/12;C07K16/22;C07K16/24;C07K16/40
• 代理公司: 北京路浩知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11002
• 代理人: 謝順星;張晶

本發(fā)明公開了一種基于抗體的雙靶向分子，且涉及用于生成這類雙靶向分子的方法，包括基于文庫的方法。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及基于抗體的雙靶向分子，且涉及生成這種雙靶向分子的方法，包括基于文庫的方法。

發(fā)明背景

本發(fā)明涉及雙特異性抗體或其功能片段的新型設(shè)計(jì)。

在文獻(xiàn)中已報(bào)道了多種生成雙特異性抗體分子的方法。這些方法可以分為兩類：1）生成雙特異性抗體形式，其中識別兩個(gè)靶標(biāo)或兩個(gè)表位的兩個(gè)互補(bǔ)位都位于由一個(gè)互補(bǔ)VH-VL配對形成的一個(gè)異源二聚抗體可變區(qū)內(nèi)，并且都包含屬于該互補(bǔ)VH-VL配對的CDR殘基，和2）生成其它雙特異性抗體形式，其中識別兩個(gè)靶標(biāo)或表位的兩個(gè)互補(bǔ)位并不都位于由一個(gè)互補(bǔ)VH-VL配對形成的異源二聚抗體可變區(qū)內(nèi)，并且并不都包含屬于該同一互補(bǔ)VH-VL配對的CDR殘基。

在第一類方法內(nèi)，在文獻(xiàn)中只描述了兩種可預(yù)見地設(shè)計(jì)雙特異性抗體分子的方法，并且在下面的[0014]至[0015]段中進(jìn)行了詳細(xì)的論述。然而要介紹本方法，首先要概述第二類方法。

第二類方法（其中識別兩個(gè)靶標(biāo)或表位的兩個(gè)互補(bǔ)位并不都位于由一個(gè)互補(bǔ)VH-VL配對形成的一個(gè)異源質(zhì)二聚抗體可變區(qū)內(nèi)，并且并不都包含屬于該同一互補(bǔ)VH-VL配對的CDR殘基）構(gòu)成多個(gè)前人工作的大部分內(nèi)容，并且已描述了這種雙特異性抗體的多種不同的實(shí)例。

在屬于第二類方法的第一組實(shí)例中，通過化學(xué)連接或通過基因融合由一個(gè)或多個(gè)肽連接體結(jié)合有不同特異性的兩個(gè)或多個(gè)抗體片段（包括Fab片段、單鏈Fv或單一抗體結(jié)構(gòu)域）。在這組實(shí)例中公開的雙特異性抗體形式包括以下：

a.雙抗體（Perisic et al.,Structure.1994Dec15;2(12):1217-26;Kontermann,Acta Pharmacol Sin.2005Jan;26(1):1-9;Kontermann,Curr Opin Mol Ther.2010Apr;12(2):176-83.)

b.串聯(lián)雙抗體(TandAb)等(Cochlovius et al.,Cancer Res.2000Aug15;60(16):4336-41.)

c.對由肽連接體基因融合的不同靶標(biāo)有特異性的單一結(jié)構(gòu)域（e.g.Domantis:WO2008/096158;Ablynx:WO2007/112940)

d.其它（供參閱，參見：Enever et al.,Curr Opin Biotechnol.2009Aug;20(4):405-11.Epub2009Aug24.;Carter,Nat.Rev.Immunol.6,343(2006);P.Kufer et al.,Trends Biotechnol.22,238(2004)).

為了改善其在醫(yī)學(xué)應(yīng)用中的潛在的可用性，可以用多種技術(shù)延長上述雙特異性抗體形式的體內(nèi)血清半衰期，包括以下：

a.加入血清白蛋白或血清白蛋白結(jié)合體

b.聚乙二醇化(PEGylation)

c.通過基因融合如HAPylation(Schlapschy et al.,Protein Eng DesSel.2007Jun;20(6):273-84.Epub2007Jun26)或XTEN(Schellenberger,Nat.Biotechnology12(2009)1186)加入蛋白聚合物。

在這組實(shí)例中，包含抗體片段的雙特異性抗體缺少Fc區(qū)，并因此通常不顯示與初生Fc受體FcRn的天然結(jié)合，不表現(xiàn)全I(xiàn)gG抗體的天然效應(yīng)子功能（ADCC和CDC，參考），并且通常不會被超抗原衍生的親和樹脂、如以對IgG抗體同樣的方式對Fc區(qū)有特異性的蛋白A樹脂純化。缺少Fc區(qū)的結(jié)果是會限制可達(dá)到的血清半衰期、作為活性藥物成分的可行性應(yīng)用以及這種雙特異性抗體的經(jīng)濟(jì)生產(chǎn)。