[發明專利]修飾的生物素結合蛋白及其融合蛋白和應用

有效

• 申請號: 201280034719.6
• 申請日: 2012-05-11
• 公開（公告）號: CN103732222B
• 公開（公告）日: 2018-12-28
• 發明（設計）人: 理查德·馬利;陸英杰;張帆
• 申請（專利權）人: 兒童醫療中心有限公司
• 主分類號: A61K31/00
• 分類號: A61K31/00;A61K39/085;A61P37/02;A61K38/00;A61P31/00;A61P37/04
• 代理公司: 北京信慧永光知識產權代理有限責任公司 11290
• 代理人: 洪俊梅;張淑珍

1.由SEQ ID NO:1的氨基酸序列組成的可溶性重組生物素結合蛋白。

2.包含(i)可溶性生物素結合蛋白以及(ii)抗原蛋白質或抗原肽的融合蛋白，所述可溶性生物素結合蛋白由與SEQ ID NO:1相同或與SEQ ID NO:15相同的氨基酸序列組成。

3.如權利要求2所述的融合蛋白，其中，所述可溶性生物素結合蛋白由與SEQ ID NO:1相同的氨基酸序列組成，并且其中，所述可溶性生物素結合蛋白與所述抗原蛋白質或抗原肽通過肽接頭彼此相連。

4.如權利要求3所述的融合蛋白，其中，所述肽接頭包含氨基酸序列SEQ ID NO:22。

5.如權利要求2所述的融合蛋白，其中，所述抗原蛋白質或抗原肽為選自于由下列抗原所組成的組中的抗原：

肺炎球菌抗原、結核抗原、炭疽抗原、HIV抗原、季節性流感抗原或流行性流感抗原、百日咳抗原、金黃色葡萄球菌抗原、腦膜炎球菌抗原、嗜血桿菌抗原、HPV抗原、大腸桿菌抗原、沙門氏菌屬抗原、腸桿菌屬抗原、假單胞菌屬抗原、克雷伯氏菌屬抗原、檸檬酸桿菌屬抗原、梭菌屬抗原、志賀氏菌屬抗原、病原性彎曲桿菌屬抗原、霍亂弧菌抗原、類毒素、毒素、或毒素部分，或以上抗原的組合。

6.如權利要求2所述的融合蛋白，其中，所述抗原蛋白質或抗原肽為抗原，所述抗原為金黃色葡萄球菌α-溶血素的非溶血性變體。

7.如權利要求6所述的融合蛋白，其中，所述金黃色葡萄球菌α-溶血素的非溶血性變體包含位于野生型金黃色葡萄球菌α-溶血素第205位、213位或209-211位氨基酸殘基處的突變。

8.如權利要求6所述的融合蛋白，其中，所述金黃色葡萄球菌α-溶血素的非溶血性變體包含野生型金黃色葡萄球菌α-溶血素中的下列突變中的一種：

(i)第205位殘基由W變為A；(ii)第213位殘基由W變為A；或者(iii)第209-211位殘基由DRD變為AAA。

9.如權利要求6所述的融合蛋白，其中，所述金黃色葡萄球菌α-溶血素的非溶血性變體包含選自于由下列氨基酸序列所組成的組中的氨基酸序列：

SEQ ID NO:23、SEQ ID NO:24、SEQ ID NO:25，以及上述氨基酸序列的功能變體和部分。

10.如權利要求2所述的融合蛋白，其中，所述融合蛋白在N端包含細菌信號序列。

11.如權利要求2所述的融合蛋白，其中，所述融合蛋白包含選自于由下列氨基酸序列所組成的組中的氨基酸序列：

SEQ ID NO:26、SEQ ID NO:27和SEQ ID NO:28。

12.如權利要求6所述的融合蛋白，其中，所述融合蛋白的溶血活性比等同效價的野生型α-溶血素(Hla)低至少25％。

13.如權利要求6所述的融合蛋白，其中，所述α-溶血素由金黃色葡萄球菌野生型α-溶血素第27-319位氨基酸的氨基酸序列組成。

14.如權利要求2-13中任一項所述的融合蛋白在制造用于在受試者中誘發免疫應答的免疫原性組合物中的用途。

15.如權利要求14所述的用途，其中，所述免疫應答為抗體應答或B細胞應答。

16.如權利要求14所述的用途，其中，所述免疫應答為CD4+ T細胞應答，所述CD4+ T細胞應答包括Th1應答、Th2應答或Th17應答；或CD8+ T細胞應答；或CD4+/CD8+ T細胞應答。

17.如權利要求14所述的用途，其中，所述免疫應答為抗體應答或B細胞應答；以及T細胞應答。