[發(fā)明專利]新型乳酸菌以及使用其的青貯飼料或發(fā)酵飼料的制備方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201280031729.4
• 申請(qǐng)日: 2012-03-19
• 公開（公告）號(hào): CN103781898A
• 公開（公告）日: 2014-05-07
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 北村亨;大淵俊;本間滿;上西寬司;副島洋
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 雪印種苗株式會(huì)社
• 主分類號(hào): C12N1/20
• 分類號(hào): C12N1/20;A23K1/00;A23K1/16;A23K1/18
• 代理公司: 北京集佳知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11227
• 代理人: 金世煜;苗堃

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及能夠抑制丁酸發(fā)酵的乳酸菌，含有其的微生物制劑以及使用該制劑的青貯飼料或發(fā)酵飼料的制備方法。

背景技術(shù)

將作為家畜主食的牧草、飼料作物等在厭氧條件下進(jìn)行乳酸發(fā)酵而得的青貯飼料是當(dāng)今乳品業(yè)中必須的飼料，制備優(yōu)質(zhì)的青貯飼料對(duì)于奶農(nóng)而言是非常重要的技術(shù)。在此之際，被稱為不良發(fā)酵的問題屢屢發(fā)生，這是在青貯飼料中與乳酸菌相比丁酸菌的增殖更有優(yōu)勢(shì)，結(jié)果造成青貯飼料中的丁酸含量變高的問題。丁酸濃度變高的青貯飼料不僅引起牛的嗜好性降低，采食量的減少，而且會(huì)成為與酮癥等疾病相關(guān)的問題。因此作為防止因這樣的丁酸菌引起的腐敗的一個(gè)方法，在青貯飼料制備時(shí)添加乳酸菌的技術(shù)正在普及。因而作為使用的乳酸菌已有大量報(bào)告，但大多數(shù)是通過加速乳酸發(fā)酵的進(jìn)行，降低pH來抑制丁酸發(fā)酵。但是有時(shí)這些乳酸菌尤其是在因水分高、糖含量少、或者土壤的混入多等易發(fā)生丁酸發(fā)酵的條件下不能充分抑制丁酸菌，現(xiàn)在因丁酸發(fā)酵而制備腐敗的青貯飼料也成為問題。

作為添加到青貯飼料的乳酸菌出現(xiàn)效果的條件，材料牧草中的可溶性糖類最低也需要在干燥物中為5.0～6.0%（換算為原料物是1.0～3.0%）以上（非專利文獻(xiàn)1）。另一方面，由于糖含量少的牧草、飼料作物也有很多，所以目前為止報(bào)告的青貯飼料用的乳酸菌不能充分發(fā)揮效果，丁酸發(fā)酵的情形多。

然而，在乳酸菌的一部分中，已知有通過發(fā)酵或者培養(yǎng)會(huì)產(chǎn)生作為抗菌性蛋白質(zhì)的細(xì)菌素。其中乳酸鏈球菌素是作為乳酸菌的一種的乳酸乳球菌的一部分株產(chǎn)生的抗菌性蛋白質(zhì)，其由34個(gè)氨基酸構(gòu)成且在分子內(nèi)含有羊毛硫氨酸、3-甲基羊毛硫氨酸、脫氫丙氨酸、脫氫酪氨酸、2-氨基丁酸。乳酸鏈球菌素中存在幾個(gè)類似物，目前為止結(jié)構(gòu)確定的類似物包括乳酸鏈球菌素A、乳酸鏈球菌素Z、乳酸鏈球菌素Q這3種。此外，近年報(bào)告了乳房鏈球菌（Streptococcus?Uberis）產(chǎn)生的乳酸鏈球菌素U和乳酸乳球菌產(chǎn)生的乳酸鏈球菌素F。

由于乳酸鏈球菌素以包括丁酸菌的革蘭氏陽性菌為中心具有大范圍的抗菌譜，將其添加到青貯飼料，具有抑制丁酸菌的可能性。實(shí)際上，在食品領(lǐng)域，自被WHO和FAO認(rèn)可以來，作為類似物之一的乳酸鏈球菌素A在世界范圍內(nèi)廣泛作為奶酪、蔬菜罐頭等的食品保存劑加以利用。但是，將乳酸鏈球菌素直接添加到食品時(shí)，需要通過乳酸菌的培養(yǎng)產(chǎn)生高濃度的乳酸鏈球菌素并將其提取、精制、干燥的工序，通常存在費(fèi)用昂貴的問題。此外，乳酸鏈球菌素具有速效性的抗菌作用，但其效果很難持續(xù)，因與添加對(duì)象的成分發(fā)生相互作用有時(shí)其效果會(huì)降低。

因此，研究嘗試將產(chǎn)生乳酸鏈球菌素的乳酸菌添加到奶酪、酸菜、豆味噌、米味噌等食品中（非專利文獻(xiàn)2～5），但是沒有將其實(shí)際用于作為青貯飼料原料的牧草、飼料作物、食品制造副產(chǎn)物等。作為其理由，一般認(rèn)為這些青貯飼料原料與食品素材相比，缺乏包含乳酸菌的生長所必須的糖的營養(yǎng)源，沒有像添加到食品素材時(shí)那樣的殺菌工序，所以與其它微生物的競(jìng)爭(zhēng)也很激烈，因而即使添加對(duì)食品素材有效果的產(chǎn)生乳酸鏈球菌素的乳酸菌，也不會(huì)獲得充分的效果。因此，還報(bào)告了在合成培養(yǎng)基中產(chǎn)生高濃度乳酸鏈球菌素的乳酸菌、在發(fā)酵大麥提取物培養(yǎng)基中產(chǎn)生乳酸鏈球菌素（專利文獻(xiàn)1、非專利文獻(xiàn)6），但還沒有即使在合成培養(yǎng)基或發(fā)酵大麥提取物培養(yǎng)基中能夠產(chǎn)生高濃度的乳酸鏈球菌素，在營養(yǎng)源不同的青貯飼料材料中也產(chǎn)生高濃度乳酸鏈球菌素的現(xiàn)有文獻(xiàn)。

此外，在以青貯飼料作為對(duì)象的情形中，已報(bào)告了將產(chǎn)生細(xì)菌素的乳酸乳球菌RO50株添加到青貯飼料材料草的青貯飼料制備方法（專利文獻(xiàn)2），但也報(bào)告了沒有獲得充分的發(fā)酵品質(zhì)改善效果的案例，效果不穩(wěn)定，進(jìn)而在青貯飼料中是否產(chǎn)生細(xì)菌素完全不清楚（非專利文獻(xiàn)7、8）。此外，專利文獻(xiàn)3中，也有關(guān)于添加產(chǎn)生乳酸鏈球菌素的乳酸菌和乳酸鏈球菌素耐性乳酸菌的青貯飼料制備方法的報(bào)告，雖然在青貯飼料中檢測(cè)到200IU/g的乳酸鏈球菌素活性，但是由于與不產(chǎn)生乳酸鏈球菌素的其它乳酸菌株添加區(qū)相比pH、有機(jī)酸含量、相對(duì)于全氮的氨態(tài)氮濃度等發(fā)酵品質(zhì)沒有變化，所以是在常見的乳酸菌也能夠獲得良好的發(fā)酵的糖含量（干燥物中5.0%以上、原料物中1.0%以上）下的結(jié)果，對(duì)于該乳酸菌在糖含量少的嚴(yán)格條件下的效果而言還不明確。

現(xiàn)有技術(shù)文獻(xiàn)

專利文獻(xiàn)

專利文獻(xiàn)1:日本再表WO2005/080550號(hào)公報(bào)

專利文獻(xiàn)2:日本特開2004-41064號(hào)公報(bào)

專利文獻(xiàn)3:EP1273237A1

非專利文獻(xiàn)