[發明專利]適合于在植物中成像和投遞應用的量子點載體肽綴合物

在審

• 申請號: 201280024901.3
• 申請日: 2012-03-22
• 公開（公告）號: CN103562397A
• 公開（公告）日: 2014-02-05
• 發明（設計）人: J.P.薩繆爾;N.C.薩姆伯朱;K.Y.姚;林高峰;S.R.韋布;F.G.伯勞格斯
• 申請（專利權）人: 陶氏益農公司
• 主分類號: C12N15/87
• 分類號: C12N15/87;C12N5/10;C12N5/04;A01H5/00
• 代理公司: 北京市柳沈律師事務所 11105
• 代理人: 張文輝

1.一種將感興趣的分子導入具有細胞壁的植物細胞中以實現植物和種子的穩定轉化的方法，該方法包括：

提供所述具有細胞壁的植物細胞；

使量子點(QD)與一種或多種細胞穿透肽(CPP)相互作用以形成QD-肽綴合物；

將一種或多種感興趣的分子附接于所述一種或多種CPP以形成活化的QD-肽綴合物；

將所述具有細胞壁的細胞和所述活化的QD-肽綴合物置于彼此接觸中；并

容許將所述QD-肽綴合物和所述感興趣的分子攝取到所述具有細胞壁的細胞中。

2.依照權利要求1的方法，其中使QD與一種或多種CPP接觸包括將所述一種或多種CPP裝配到所述QD的表面上。

3.依照權利要求1的方法，其中將一種或多種感興趣的分子附接于所述一種或多種CPP包括所述感興趣分子的帶負電荷的基團與所述CPP的末端的帶電荷的氨基基團相互作用。

4.依照權利要求1的方法，其進一步包括容許將所述QD-肽綴合物攝取到所述包含細胞壁的植物細胞的區室中。

5.依照權利要求4的方法，其中所述區室選自下組：胞質溶膠、細胞核、液泡形成體、質體、黃化質體、色質體、白色體、油質體、蛋白質體、造粉體、葉綠體、和雙層膜的腔。

6.依照權利要求1的方法，其中所述包含細胞壁的植物細胞選自下組：煙草、胡蘿卜、玉米、蕓苔(canola)、油菜籽(rapeseed)、棉花、棕櫚、花生、大豆、稻屬物種(Oryza?sp.)、擬南芥屬物種(Arabidopsis?sp.)、蓖麻屬物種(Ricinus?sp.)、和甘蔗細胞。

7.依照權利要求1的方法，其中所述植物細胞來自選自下組的組織：胚、分生組織、愈傷組織、花粉、葉、花藥、根、根尖、花、種子、莢果和莖。

8.依照權利要求1的方法，其中所述一種或多種CPP由選自R9、MPG、TAT、γ-玉米醇溶蛋白和MPG肽的組組成。

9.依照權利要求1的方法，其中所述感興趣的分子包括選自下組的組分：核酸、DNA、RNA、RNAi分子、基因、質粒、粘粒、YAC、BAC、多肽、酶、激素、糖肽、糖、脂肪、信號傳導肽、抗體、維生素、信使、第二信使、氨基酸、cAMP、藥物、除草劑、殺真菌劑、抗生素、及其組合。

10.依照權利要求9的方法，其中所述感興趣的分子包括基因。

11.依照權利要求10的方法，其中所述基因是外來蛋白質基因、農學基因、或標志物基因。

12.依照權利要求9的方法，其進一步包括選擇已穩定整合所述感興趣分子的細胞。

13.依照權利要求12的方法，其中所述選定的細胞是可再生細胞。

14.依照權利要求13的方法，其進一步包括自所述可再生細胞再生植物。

15.一種穩定表達基因的方法，該方法包括：

提供具有細胞壁的植物細胞；

使量子點(QD)與一種或多種細胞穿透肽(CPP)相互作用以形成QD-肽綴合物；

將一種或多種基因附接于所述一種或多種CPP以形成活化的QD-肽綴合物；

將所述具有細胞壁的細胞和所述活化的QD-肽綴合物置于彼此接觸中；并

容許將所述QD-肽綴合物和所述一種或多種基因攝取到所述具有細胞壁的細胞中；并

在具有所述植物細胞的植物的后代中表達所述基因。

16.依照權利要求15的方法，其中在葉綠體中表達所述基因。

17.依照權利要求15的方法，其進一步包括選擇穩定表達所述基因的細胞。

18.一種用于將分子物質轉移入植物細胞中的方法，其包括：

使量子點(QD)與一種或多種細胞穿透肽(CPP)相互作用以形成QD-肽綴合物；

使所述QD-肽綴合物與質粒DNA相互作用以形成活化的QD-肽綴合物結構；并

使所述活化的QD-肽綴合物結構與攜帶完整壁的植物細胞在允許所述一種或多種CPP和來自所述質粒DNA的所述一種或多種基因攝取入所述植物細胞中的條件下接觸。