[發明專利]纖維糊精和β-D-葡萄糖的增強型發酵

無效

• 申請號: 201280014458.1
• 申請日: 2012-01-20
• 公開（公告）號: CN103562216A
• 公開（公告）日: 2014-02-05
• 發明（設計）人: 詹姆斯·H.·多德納-凱特;威廉·T.·畢森;喬納森·M.·加拉茲卡;趙慧敏;李思進;陳勇秀;河析辰
• 申請（專利權）人: 伊利諾伊大學董事會;加利福尼亞大學董事會
• 主分類號: C07K14/195
• 分類號: C07K14/195;C07K14/37;C12N9/00;C12N9/90;C12P5/00
• 代理公司: 廣州華進聯合專利商標代理有限公司 44224
• 代理人: 王程;黎艷

1.一種宿主細胞，包括：

a）編碼一種或多種纖維糊精轉運子的重組DNA；

b）編碼具有葡萄糖變旋酶活性的一種或多種多肽的重組DNA；

其中，當在含纖維二糖的培養基中生長時，所述宿主細胞比缺乏所述編碼具有葡萄糖變旋酶活性的一種或多種多肽的重組DNA的相應宿主細胞消耗更多的纖維二糖分子。

2.根據權利要求1所述的宿主細胞，其特征在于，所述宿主細胞還包括編碼一種或多種β-葡萄糖苷酶的重組DNA。

3.根據權利要求1或2所述的宿主細胞，其特征在于，所述具有葡萄糖變旋酶活性的多肽為含有選自SEQ?ID?NOs:17,19,21和23的氨基酸序列的多肽。

4.根據權利要求1或2所述的宿主細胞，其特征在于，所述具有葡萄糖變旋酶活性的多肽為含有選自SEQ?ID?NOs:28-32的氨基酸序列的多肽。

5.含纖維二糖的混合物的發酵方法，該方法包括：

a）將所述含纖維二糖的混合物與權利要求1至4中任意一項所述的宿主細胞接觸，和

b）在支持發酵的條件下，孵化該宿主細胞。

6.含纖維二糖的混合物的發酵方法，該方法包括：

a）提供宿主細胞，其中該宿主細胞包括：

i）編碼一種或多種纖維糊精轉運子的重組DNA；

ii）編碼具有葡萄糖變旋酶活性的一種或多種多肽的重組DNA；和

b）在培養基中培養宿主細胞，以使編碼該一種或多種纖維糊精轉運子的和編碼具有葡萄糖變旋酶活性的一種或多種多肽的重組DNA表達出來，其中編碼具有葡萄糖變旋酶活性的一種或多種多肽的重組DNA的表達導致：與缺乏該編碼具有葡萄糖變旋酶活性的一種或多種多肽的重組DNA的相應宿主細胞相比，細胞對纖維二糖的消耗增加。

7.一種用于增加化學品產量的方法，該方法包括：

a）提供宿主細胞，其中該宿主細胞包括：

i）編碼一種或多種纖維糊精轉運子的重組DNA；

ii）編碼具有葡萄糖變旋酶活性的一種或多種多肽的重組DNA；和

b）在培養基中培養宿主細胞，以使編碼該一種或多種纖維糊精轉運子的和編碼具有葡萄糖變旋酶活性的一種或多種多肽的重組DNA表達出來，其中編碼具有葡萄糖變旋酶活性的一種或多種多肽的重組DNA的表達導致：與缺乏該編碼具有葡萄糖變旋酶活性的一種或多種多肽的重組DNA的相應宿主細胞相比，由該細胞生產的化學品的產量增加。

8.根據權利要求7所述的方法，其特征在于，所述化學品為醇。

9.根據權利要求8所述的方法，其特征在于，所述醇選自乙醇、正丙醇、正丁醇、異丁醇、3-甲基-1-丁醇、2-甲基-1-丁醇、3-甲基-1-戊醇、辛醇。

10.根據權利要求7所述的方法，其特征在于，所述化學品為萜類化合物、聚酮化合物、脂肪酸、脂肪酸衍生物、或有機酸。

11.用于增加細胞的生長率的方法，該方法包括：

a）提供宿主細胞，其中該宿主細胞包括：

i）編碼一種或多種纖維糊精轉運子的重組DNA；

ii）編碼具有葡萄糖變旋酶活性的一種或多種多肽的重組DNA；和

b）在培養基中培養宿主細胞，以使編碼該一種或多種纖維糊精轉運子的和編碼具有葡萄糖變旋酶活性的一種或多種多肽的重組DNA表達出來，其中編碼具有葡萄糖變旋酶活性的一種或多種多肽的重組DNA的表達導致：與缺乏編碼該具有葡萄糖變旋酶活性的一種或多種多肽的重組DNA的相應宿主細胞相比，細胞的生長率增加。

12.根據權利要求6至11中任一項所述的方法，其特征在于，所述宿主細胞還包括編碼一種或多種β-葡萄糖苷酶的重組DNA。

13.根據權利要求6至12中任一項所述的方法，其特征在于，所述具有葡萄糖變旋酶活性的多肽為含有選自SEQ?ID?NOs:17,19,21和23的氨基酸序列的多肽。

14.根據權利要求6至12中任一項所述的方法，其特征在于，所述具有葡萄糖變旋酶活性的多肽為含有選自SEQ?ID?NOs:28-32的氨基酸序列的多肽。