[發(fā)明專利]瘧疾的治療和預(yù)防

無效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201280010331.2
• 申請(qǐng)日: 2012-02-24
• 公開（公告）號(hào): CN103442729A
• 公開（公告）日: 2013-12-11
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 亞歷山大·道格拉斯;西蒙·德雷珀;阿德里安·希爾;安德魯·威廉斯;約瑟夫·伊林沃恩
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 伊西斯創(chuàng)新有限公司
• 主分類號(hào): A61K39/015
• 分類號(hào): A61K39/015;A61P33/06;C07K16/20
• 代理公司: 中科專利商標(biāo)代理有限責(zé)任公司 11021
• 代理人: 張國(guó)梁

本發(fā)明涉及用于治療或預(yù)防瘧疾的抗原、抗體和疫苗。

血液階段形式的瘧原蟲屬(Plasmodium)寄生蟲對(duì)紅血細(xì)胞(RBCs)的感染是造成瘧疾臨床表現(xiàn)的原因。瘧原蟲屬寄生蟲的實(shí)例包括下述物種：惡性瘧原蟲(P.falciparum)，間日瘧原蟲(P.vivax)，卵形瘧原蟲(P.ovale)和三日瘧原蟲(P.malariae)。特別感興趣的寄生蟲是惡性瘧原蟲，原因在于，由于其可以感染所有齡的RBCs并不局限于未成熟的RBCs，故正是這種寄生蟲引起大部分的致死性感染。每年僅惡性瘧原蟲就引起大約一百萬例死亡，主要是在兒童中引起死亡。

因此，開發(fā)疫苗是高度合乎需要的。

基于通過阻斷惡性瘧原蟲在肝臟中的感染起作用的RTS，S蛋白的當(dāng)前疫苗候選物僅取得了部分功效。因此，存在對(duì)于可以通過防護(hù)引起疾病的血液階段的瘧原蟲屬寄生蟲而仿效天然免疫性的疫苗的需求。

之前的研究已經(jīng)使用標(biāo)準(zhǔn)生長(zhǎng)抑制活性(growth?inhibitory?activity，GIA)測(cè)定在體外研究了抗原誘導(dǎo)有效抵抗血液階段瘧疾寄生蟲的抗體的能力。一種這樣的抗原是頂膜抗原1(apical?membrane?antigen1，PfAMA1)。

關(guān)于參與血液階段瘧原蟲屬寄生蟲侵入RBCs的其他蛋白家族的GIA測(cè)定研究已經(jīng)發(fā)現(xiàn)其是無效的或不如PfAMA1有效。

因此，PfAMA1已經(jīng)成為關(guān)于對(duì)抗血液階段瘧疾寄生蟲的研究的主要焦點(diǎn)。然而，針對(duì)PfAMA1的抗體似乎僅在極高的濃度才有效。另外，PfAMA1誘導(dǎo)品系特異性的抗體，該品系特異性的抗體對(duì)瘧原蟲屬寄生蟲的遺傳多樣性品系沒有效果(A.L.Goodman，S.J.Draper，Ann.Trop.Med.Parasitol.104，189(2010))。另外，除了在人受試者中誘導(dǎo)充分的抗體應(yīng)答的抗原之外，疫苗開發(fā)還已經(jīng)受到對(duì)可能的反應(yīng)原性化學(xué)佐劑的需求的阻礙。

對(duì)于能夠誘導(dǎo)甚至在較低的免疫球蛋白濃度下有效的抗體的抗原存在需求。對(duì)于能夠誘導(dǎo)有效抗瘧原蟲屬寄生蟲的遺傳多樣性品系的抗體的抗原存在需求。對(duì)于在不需要可能的反應(yīng)原性化學(xué)佐劑的條件下有效的抗原存在需求。

本發(fā)明通過提供抗原、編碼所述抗原的載體、和特異性結(jié)合所述抗原的抗體(以及抗體樣分子，包括適配體和肽)、及其(單獨(dú)的或組合)在預(yù)防或治療瘧疾中的應(yīng)用解決了上述需求中的一種或多種。

一方面，本發(fā)明提供網(wǎng)織紅細(xì)胞-結(jié)合蛋白同源物5(PfRH5)抗原或其片段。在一個(gè)實(shí)施方案中，PfRH5抗原或其片段以疫苗制劑的形式存在。

術(shù)語抗原或其片段意指可以被免疫系統(tǒng)識(shí)別和/或刺激細(xì)胞介導(dǎo)的免疫應(yīng)答和/或刺激抗體產(chǎn)生的任意基于肽的序列。

在另一方面，本發(fā)明提供表達(dá)PfRH5抗原或其片段的載體。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述載體以疫苗制劑的形式存在。

網(wǎng)織紅細(xì)胞結(jié)合同源物(PfRH)家族包括六個(gè)成員(PfRH1、PfRH2a、PfRH2b、PfRH3、PfRH4和PfRH5)，其每種成員參與瘧原蟲屬寄生蟲與RBCs的結(jié)合，可能的例外是PfRH3，其可能是不表達(dá)的假基因。PfRH家族已被鑒定為在裂殖子形式的瘧原蟲屬寄生蟲表面上的黏附素，其結(jié)合在紅細(xì)胞表面上的受體并且因此允許處于其血液階段的寄生蟲侵入RBCs。PfRH5抗原具有大約63KDa的分子量。已經(jīng)報(bào)道了大約45KDa和28KDa的體外切割的片段。

本發(fā)明的PfRH5抗原誘導(dǎo)在GIA測(cè)定中高度有效抗血液階段的瘧原蟲屬寄生蟲的抗體。這是非常令人驚訝的，因?yàn)橹暗难芯績(jī)H表明PfRH5抗原誘導(dǎo)在GIA測(cè)定中無效或僅是有效性差(即，基本上不如用PfAMA1-誘導(dǎo)的抗體通常所觀察到的那樣有效)的抗體，除此之外，沒有證明任何作用。

本發(fā)明的抗原令人驚訝地誘導(dǎo)比PfAMA1更有效地中和寄生蟲并且在較低的免疫球蛋白濃度保持有效的抗體。另外，所述抗原誘導(dǎo)這樣的抗體，已經(jīng)令人驚訝地發(fā)現(xiàn)所述抗體有效抗瘧原蟲屬寄生蟲的遺傳多樣性品系，這在實(shí)現(xiàn)針對(duì)天然環(huán)境中傳播的多種品系的疫苗功效方面可能是至關(guān)重要的。

這代表首個(gè)使用單一抗原抗瘧原蟲屬寄生蟲的高度有效的交叉-品系GIA的實(shí)例，并且因此代表在瘧疾治療和預(yù)防方面的主要突破。

因此，在一個(gè)實(shí)施方案中，PfRH5抗原或其片段提供針對(duì)由瘧原蟲屬寄生蟲引起的疾病的防護(hù)(諸如長(zhǎng)期的防護(hù))。

在一個(gè)實(shí)施方案中，PfRH5抗原或其片段提供針對(duì)瘧原蟲寄生蟲感染的抗體應(yīng)答(例如，中和抗體應(yīng)答)。