[實用新型]免疫用抗原乳化裝置

有效

• 申請號: 201220715989.0
• 申請日: 2012-12-22
• 公開（公告）號: CN203002232U
• 公開（公告）日: 2013-06-19
• 發明（設計）人: 萬曉春;林婷婷;向軍儉
• 申請（專利權）人: 深圳先進技術研究院
• 主分類號: B01F3/08
• 分類號: B01F3/08;B01F13/08;A61J3/00
• 代理公司: 廣州華進聯合專利商標代理有限公司 44224
• 代理人: 吳平

技術領域

本實用新型涉及醫療器械領域，特別涉及一種免疫用抗原乳化裝置。

背景技術

動物免疫是制備單抗或多抗血清的關鍵環節之一。為了獲得高效價的抗體，在免疫動物時通常需要使用佐劑。佐劑又稱免疫調節劑或免疫增強劑，是指先于抗原或與抗原混合或同時注入動物體內，能非特異性地改變或增強機體對該抗原的特異性免疫應答，發揮輔助作用的一類物質。佐劑本身可以有免疫原性，也可以沒有免疫原性。通過應用佐劑可以提高抗原對機體的免疫原性，從而提高抗體的效價。由于顆粒性抗原（如細菌、細胞）具有較強的免疫原性，一般情況下不使用佐劑即可取得較好的免疫效果。對于可溶性大分子量的蛋白質免疫原、人工抗原，初次免疫時必須使用佐劑才能取得較好的免疫效果。免疫佐劑的作用主要有：1、延緩抗原的釋放，保護抗原不被水解，佐劑可延長抗原在體內滯留時間，避免頻繁注射，有利于高親和力抗體的產生；2、活化巨噬細胞并促進巨噬細胞與T和B細胞的相互作用，從而對淋巴細胞有特異性加強刺激的作用；3、佐劑吸附了抗原后，增加了抗原的表面積，使抗原易于被巨噬細胞吞噬；4、佐劑能刺激吞噬細胞對抗原的處理；5、可刺激致敏淋巴細胞的分裂和漿細胞產生抗體。故免疫佐劑的作用可使無免疫原性物質變成有效的免疫原；6、可提高機體初次和再次免疫應答的抗體滴變；7、改變抗體的產生類型以及產生遲發型變態反應，并使其增強。佐劑種類很多，目前尚無統一的分類方法，常用的佐劑可分為四類：無機佐劑，如氫氧化鋁，明礬等；有機佐劑，微生物及其產物，如分枝桿菌（結核桿菌、卡介苗）、短小桿菌、百日咳桿菌、內毒素、細菌提取物（胞壁酰二肽）等；合成佐劑，如人工合成的雙鏈多聚核苷酸（雙鏈多聚腺苷酸、尿苷酸）、左旋咪唑、異丙肌苷等；油劑，如費氏佐劑、花生油乳化佐劑、礦物油、植物油等。

目前在實驗動物中最常用的是弗氏佐劑，弗氏佐劑又可分為弗氏不完全佐劑和完全佐劑兩種。免疫動物前，需要將弗氏佐劑與水溶性抗原乳化，以形成穩定的油包水乳劑。常用方法主要包括：1、研磨法：先將佐劑加熱并取適量放入無菌的玻璃研缽內，待冷卻后再緩緩滴入等體積的抗原溶液，邊滴邊按同一方向研磨，滴加抗原的速度要慢。待抗原全部加入后，繼續研磨一段時間，使之成為乳白色粘稠的油包水乳劑。這種方法適于制備大量的佐劑抗原，缺點是研缽壁上粘附大量乳劑，抗原損失較大。2、注射器混合法：將等量的弗氏佐劑和抗原溶液分別吸入兩個注射器內，兩注射器之間以一細膠管相連，注意排凈空氣，然后交替推動針管，直至形成粘稠的乳劑為止。鑒定方法是將乳化劑滴入冷水中，若保持完整不分散，成滴狀浮于水面，即乳化完全，為合格的油包水劑。這種方法的優點是容易做到無菌操作，抗原損失少，適用于制備少量的抗原乳劑，但同時難以乳化完全，個別抗原，用塑料注射器根本推不動，而用玻璃注射器又有滲漏，制備好的乳化劑經鑒定才能適用。3、超聲混合法：將抗原和佐劑按所需量加入一離心管中，置于超聲波粉碎器上，粉碎頭浸入液面下0.5厘米，離瓶底0.5厘米左右，以免打碎離心管；控制超聲頻率和時間，每次乳化10秒~15秒，然后置冰箱l分鐘左右；反復乳化3c次~4次即可完全乳化。這種方法的優點是簡單、快速、節省材料，但是超聲容易激發一些自由基，對抗原有未知損害。因此，以上方法都不同程度地存在缺憾，難以滿足實驗工作的需要。目前，常用的佐劑是弗氏佐劑（Freund?adjuvant,FA），包括完全弗氏佐劑（Complete?freund?adjuvant,CFA）和不完全弗氏佐劑（Incomplete?freund?adjuvant,IFA）。免疫動物前，需要將弗氏佐劑與水溶性抗原乳化，以形成穩定的油包水乳劑。乳化效果的好壞是獲得高效價抗體的關鍵。然而，傳統的乳劑制備法費時費力，不能適應實驗的需要。