[實用新型]呋喃唑酮代謝物熒光定量檢測系統有效
| 申請號: | 201220710391.2 | 申請日: | 2012-12-19 |
| 公開(公告)號: | CN203191384U | 公開(公告)日: | 2013-09-11 |
| 發明(設計)人: | 唐時幸;劉曉云;王繼華;李凱 | 申請(專利權)人: | 廣州萬孚生物技術股份有限公司 |
| 主分類號: | G01N33/64 | 分類號: | G01N33/64 |
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| 地址: | 510663 廣東*** | 國省代碼: | 廣東;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 呋喃 代謝物 熒光 定量 檢測 系統 | ||
技術領域
本實用新型屬于醫學檢驗領域,具體地說,本實用新型涉及一種呋喃唑酮代謝物(AOZ)熒光定量檢測系統,包括熒光定量檢測呋喃唑酮代謝物(AOZ)的免疫層析檢測試劑盒和熒光定量檢測儀。?
背景技術
呋喃唑酮是人工合成的具有5-硝基呋喃基本結構的廣譜抗菌藥物,口服吸收較少,腸內濃度高,代謝迅速,主要用于腸炎和菌痢,也可用于尿路感染、傷寒、副傷寒和霍亂。此藥物抗菌譜廣,細菌對本類藥物亦較少產生耐藥性,故在養殖業中廣泛應用。但是呋喃唑酮原藥及其主要代謝物3-氨基-2-惡唑烷酮是直接的誘變劑,可致畸致突變。含有呋喃唑酮代謝物殘留的產品為人所食用后,這些代謝物就可以在胃酸作用下從蛋白質中釋放而被人體吸收,造成嚴重危害。故目前歐盟、美國、韓國、日本、韓國、中國等將呋喃唑酮列為食品動物禁用藥物,在監控時檢測的是呋喃唑酮主要代謝物3-氨基-2-惡唑烷酮。?
水產品及畜禽產品中呋喃唑酮及其代謝物的檢測方法主要有高效液相色譜法(HPLC)、液相-質譜法(HPLC-MS)、液相-串聯質譜法(HPLC-MS-MS)、酶聯免疫分析法(ELISA)和膠體金免疫層析法。在以上的各種檢測方法中,液相色譜-質譜法(HPLC-MS)及液相色譜-串聯質譜法(LC-MS/MS)的優點是能在多種殘留物同時存在的情況下可對某種特定的殘留物進行定性、定量分析,有準確可靠、重復性強等有點,但是這些方法的缺點同樣突出,如儀器昂貴、操作復雜、便攜性差等,因而不利于大范圍的推廣應用及高通量檢測。因此,本專利建立一種簡便、可靠、快速、靈敏檢測AOZ殘留的檢測方法,以便對動物組織中的呋喃唑酮代謝物殘留進行監控。?
發明內容
本實用新型的目的在于克服上述現有技術的缺陷,提供一種操作簡便、靈敏性強,定量準確,檢測速度快的呋喃唑酮代謝物熒光定量檢測檢測系統,包括一種熒光定量檢測呋喃唑酮的免疫層析試劑盒,配合系統中的熒光定量檢測儀使用,可實現對呋喃唑酮的精確定量。?
為實現上述目的,首先,本實用新型采取了以下技術方案:?
呋喃唑酮代謝物熒光定量檢測系統,包括熒光定量檢測呋喃唑酮代謝物的免疫層析試劑盒和熒光定量檢測儀。所述試劑盒包括熒光定量檢測呋喃唑酮代謝物的免疫層析試紙條和熒光標記液;所述熒光定量檢測儀包括熒光光源系統及熒光檢測系統。?
其中,所述熒光定量檢測呋喃唑酮代謝物的免疫層析試紙條由樣品墊、硝酸纖維素包被膜、吸水紙順次搭接粘貼在底板上構成;所述硝酸纖維素包被膜包括檢測區和質控區;所述檢測區包被有AOZ-BSA偶聯?物,所述質控區包被抗兔IgG抗體;所述熒光標記液中含有熒光標記AOZ抗體和熒光標記兔IgG抗體。?
所述熒光標記液的激發波長(Ex)為310~550nm,發射波長(Em)為340~620nm。?
所述的熒光定量檢測呋喃唑酮代謝物的試劑盒,還包括有卡外殼,所述試紙條被包裝在卡外殼內,所述卡外殼一側的表面設有加樣孔和顯示窗,所述加樣孔對應于試紙條樣品墊的位置,所述顯示窗對應于試紙條的檢測區和質控區的位置。?
所述卡外殼還涂有供熒光儀掃描識別的產品信息的噴碼標記層。?
本實用新型所述的呋喃唑酮代謝物熒光定量檢測系統中的熒光定量檢測呋喃唑酮代謝物檢測試紙條,其檢測原理是競爭法,熒光素分子或熒光膠乳微粒與AOZ抗體共價結合。將檢測樣本(尿樣或提取液)加入熒光標記物中,其熒光標記AOZ抗體可與尿液中的AOZ結合,形成復合物;而包被在硝酸纖維素膜上檢測區(T)的AOZ-BSA偶聯物也競爭結合熒光標記AOZ抗體。當含AOZ樣本與熒光標記物混合后滴加至試紙條的上,在層析作用下混合液沿著硝酸纖維素膜向前移動,樣本中所含AOZ量越多,可與T區AOZ-BSA偶聯物結合的熒光標記的抗體越少,從而使T區測得熒光檢出值降低。通過熒光檢測儀掃描T區熒光信號強度,可檢測出樣本中AOZ含量。?
本實用新型的呋喃唑酮代謝物的熒光定量檢測系統,其中的呋喃唑酮代謝物免疫層析試紙條與GC/MS、HPLC等色譜儀器以及酶免法檢測呋喃唑酮代謝物相比,具有簡便(簡單操作一步完成)、適合不同數量樣本檢測和快速(15分鐘左右即可有結果)等優點;與免疫膠體金標記試紙條相比,本實用新型具有靈敏度更高、準確定量等優點。?
本實用新型所述的呋喃唑酮代謝物熒光定量檢測系統中的的呋喃唑酮代謝物層析試劑盒,采用熒光標記液與樣本預先混合的方法,使反應與信號釋放更加均一,與其他層析法相比,其批量生產的精密度和準確度達到最好效果。?
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