[實(shí)用新型]呋喃它酮代謝物熒光定量檢測(cè)系統(tǒng)

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201220710349.0
• 申請(qǐng)日: 2012-12-19
• 公開（公告）號(hào): CN203249923U
• 公開（公告）日: 2013-10-23
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 唐時(shí)幸;劉曉云;王繼華;康可人
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 廣州萬孚生物技術(shù)股份有限公司
• 主分類號(hào): G01N33/64
• 分類號(hào): G01N33/64
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術(shù)領(lǐng)域

本實(shí)用新型屬于醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)領(lǐng)域，具體地說，本實(shí)用新型涉及一種呋喃它酮代謝物熒光定量檢測(cè)系統(tǒng)，包括呋喃它酮代謝物熒光定量檢測(cè)免疫層析檢測(cè)試劑盒和熒光定量檢測(cè)儀。?

背景技術(shù)

呋喃它酮屬于硝基呋喃類藥物中的一種，硝基呋喃類藥物是一類化學(xué)合成的廣譜抗菌藥，主要包括呋喃它酮、呋喃唑酮、呋喃西林和呋喃妥因。該類藥物5～10mg/kg即能抑制多種革蘭氏陽性和陰性菌，20～50mg/kg有殺菌作用，對(duì)某些原蟲、真菌亦有一定作用。主要作用于微生物酶系統(tǒng)，抑制乙酰輔酶A，干擾微生物糖類代謝，從而起到抑菌、殺菌的作用。其抗菌力不受血液、糞便、膿汁和組織分解產(chǎn)物影響，外用對(duì)組織刺激性小，細(xì)菌對(duì)本類藥物亦較少產(chǎn)生耐藥性。因而曾被廣泛應(yīng)用于治療動(dòng)物疾病，并且由于其具有促生長的功能，還曾被當(dāng)做飼料添加劑使用。硝基呋喃類藥物在動(dòng)物體內(nèi)代謝迅速，藥物半衰期約5小時(shí)，呋喃它酮代謝物AMOZ，化學(xué)名稱為5-甲基嗎啉-3-氨基-2-惡唑烷酮，可與細(xì)胞膜蛋白緊密結(jié)合并長期穩(wěn)定存在，以致藥物在體內(nèi)消除速度變慢，日常生活普通的食品加工方法，如微波加工、烹調(diào)等均難以使蛋白結(jié)合態(tài)的代謝物大量降解。而當(dāng)含代謝物的食品被人類食用后，在胃液的酸性條件下這些代謝物就會(huì)從蛋白質(zhì)中水解出來被人體吸收。然而，研究表明，大劑量或長時(shí)間應(yīng)用硝基呋喃類藥物均能對(duì)畜禽產(chǎn)生毒性作用，并且該類藥物還具有致癌致畸致突變，呋喃它酮更是強(qiáng)致癌性藥物。歐盟1990年頒布條例將硝基呋喃類藥物及其代謝物列為A類禁用獸藥，規(guī)定其在動(dòng)物源性食品中的殘留檢測(cè)限為1.0ug/kg，1995年起禁止在食用性動(dòng)物中使用該類藥物，規(guī)定在動(dòng)物源性食品中的檢出限為不得檢出。隨后，美國和中國等國家也已明令禁止該類藥物的使用。日本于2006年將硝基呋喃及其代謝物殘留限量降為0.5ug/kg。近年來，我國出口產(chǎn)品頻繁被查出硝基呋喃類藥物殘留，這不僅造成了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失，也影響了我國的國際形象。以上事例都造成了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。要改變動(dòng)物性食品安全的現(xiàn)狀，首要提高人們對(duì)動(dòng)物性食品安全性問題的認(rèn)識(shí)，從理論和技術(shù)角度，建立適宜的獸藥殘留分析方法和制定殘留標(biāo)準(zhǔn)是最基本的方面。?

目前用于檢測(cè)動(dòng)物源性食品中硝基呋喃類藥物及其代謝物殘留的主要方法有液相色譜-紫外檢測(cè)器法(LC-UV)、高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法(HPLC-MS)、高效液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜聯(lián)用法(HPLC-MS/MS)，這些方法雖然具有準(zhǔn)確可靠、重復(fù)性強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)，但儀器昂貴、操作復(fù)雜、便攜性差等不利于大范圍的推廣應(yīng)用及高通量檢測(cè)。因此，本專利建立一種簡便、可靠、快速、靈敏檢測(cè)AMOZ殘留的檢測(cè)方法，以便對(duì)動(dòng)物組織中的AMOZ殘留進(jìn)行監(jiān)控。?

申請(qǐng)?zhí)枮镃N?201020586590的發(fā)明專利，公開了一種檢測(cè)水產(chǎn)品中呋喃它酮代謝物的ELISA檢測(cè)試劑盒。該試劑盒組成包括：96孔酶標(biāo)板、酶標(biāo)二抗、抗體工作液、標(biāo)準(zhǔn)品溶液、底物顯色液、終止液、濃縮洗滌液、濃縮復(fù)溶液、2-硝基苯甲醛、蓋板膜、自封袋、說明書和質(zhì)檢報(bào)告。采用間接競爭ELISA方法，在酶標(biāo)板微孔條上預(yù)包被偶聯(lián)抗原，樣本中殘留的呋喃它酮代謝物將和微孔條上預(yù)包被的偶聯(lián)抗原競爭抗呋喃它酮代謝物抗體，加入酶標(biāo)二抗后，用TMB底物顯色，樣本吸光度值與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較再乘以其對(duì)應(yīng)的稀釋倍數(shù)，即可得出樣品中呋喃它酮代謝物的殘留量。與儀器分析技術(shù)相比具有操作簡便、費(fèi)用低廉、靈敏度高等特點(diǎn)。但是這種方法不利于現(xiàn)場測(cè)試。?

實(shí)用新型內(nèi)容

本實(shí)用新型的目的在于克服上述現(xiàn)有技術(shù)的缺陷，提供一種操作簡便、靈敏性強(qiáng)，定量準(zhǔn)確，檢測(cè)速度快的呋喃它酮代謝物熒光定量檢測(cè)檢測(cè)系統(tǒng)，包括一種呋喃它酮代謝物熒光定量檢測(cè)免疫層析試劑盒，配合系統(tǒng)中的熒光定量檢測(cè)儀使用，可實(shí)現(xiàn)對(duì)呋喃它酮的精確定量。?

為實(shí)現(xiàn)上述目的，本實(shí)用新型采取了以下技術(shù)方案：?

呋喃它酮代謝物熒光定量檢測(cè)系統(tǒng)，包括呋喃它酮代謝物熒光定量檢測(cè)免疫層析試劑盒和熒光定量檢測(cè)儀。所述試劑盒包括呋喃它酮代謝物熒光定量檢測(cè)免疫層析試紙條和熒光標(biāo)記液；所述熒光定量檢測(cè)儀包括熒光光源系統(tǒng)及熒光檢測(cè)系統(tǒng)。?

其中，所述呋喃它酮代謝物熒光定量檢測(cè)免疫層析試劑盒，包括試紙條和熒光標(biāo)記液，所述試紙條由樣品墊、硝酸纖維素包被膜、吸水紙順次搭接粘貼在底板上構(gòu)成；所述硝酸纖維素包被膜包括檢測(cè)區(qū)和質(zhì)控區(qū)，所述檢測(cè)區(qū)包被有呋喃它酮代謝物AMOZ抗原；所述質(zhì)控區(qū)包被有抗鼠IgG抗體；所述熒光標(biāo)記液中含有熒光標(biāo)記AMOZ抗體和熒光標(biāo)記鼠IgG抗體。?

所述熒光標(biāo)記液的激發(fā)波長(Ex)為310-550nm，發(fā)射波長(Em)為340-620nm。?