[實(shí)用新型]負(fù)載干細(xì)胞的大面積羊膜貼片的制備裝置

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201220688933.0
• 申請(qǐng)日: 2012-12-13
• 公開（公告）號(hào): CN203329089U
• 公開（公告）日: 2013-12-11
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 畢薇薇;姜麗君
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 吉林省拓華生物科技有限公司
• 主分類號(hào): A61L27/36
• 分類號(hào): A61L27/36
• 代理公司: 北京戈程知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11314
• 代理人: 程偉

技術(shù)領(lǐng)域

本實(shí)用新型涉及一種負(fù)載干細(xì)胞的大面積羊膜貼片的制備裝置。

背景技術(shù)

皮膚是人體與外界環(huán)境接觸的屏障，不僅起保護(hù)、分泌、代謝和感覺等作用，而且參與免疫反應(yīng)和維持機(jī)體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定。截至目前，嚴(yán)重創(chuàng)傷和大面積燒傷患者的皮源缺乏一直是臨床亟待解決的難題。組織工程皮膚產(chǎn)品開發(fā)的成功，使人工皮膚的研究實(shí)現(xiàn)了質(zhì)的飛躍。目前，已經(jīng)上市并應(yīng)用于臨床的組織工程皮膚產(chǎn)品有Dermagraft和ActivSkin等，有一定的臨床效果，但仍有一些不足之處而且價(jià)格非常昂貴。

早期的燒傷創(chuàng)面覆蓋可以限制細(xì)菌生長(zhǎng)、預(yù)防感染、防止水分及電解質(zhì)的丟失。自體皮膚移植是治療燒傷的首選，但是對(duì)于大面積燒傷，自體皮膚不能滿足需求，而異體皮膚能引起明顯的免疫排斥。因而，組織工程化皮膚的研究已成為生命科學(xué)研究領(lǐng)域的熱點(diǎn)之一。

人羊膜為半透明的薄膜，無(wú)血管、神經(jīng)和淋巴管，有多種促進(jìn)細(xì)胞增殖的營(yíng)養(yǎng)成分，不表達(dá)人類白細(xì)胞抗原，具有抗微生物作用和較好的粘附性。目前已有用羊膜移植物治療眼表?yè)p傷疾病的報(bào)道。但現(xiàn)有技術(shù)多采用直接剝離的羊膜，無(wú)任何處理。有的研究者在所述羊膜上負(fù)載了自體骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞。由于眼部面積較小，所以負(fù)載細(xì)胞的羊膜貼片很容易進(jìn)行制備。但大面積負(fù)載細(xì)胞的羊膜貼片的制備由于受容器限制和其浸泡在培養(yǎng)基中的表面不平整，細(xì)胞不易生長(zhǎng)，進(jìn)而使其應(yīng)用受到限制。

雖然現(xiàn)有技術(shù)中也有在3cm直徑的羊膜上用硝酸纖維素膜作支架貼于基底面，制成貼片用于眼角膜損傷的報(bào)道，但該膜片較小，不能覆蓋面積大的皮膚缺損。截至目前，還沒有在直徑為10cm以上的大羊膜貼片上種細(xì)胞的報(bào)道。因?yàn)榧?xì)胞貼壁生長(zhǎng)的一個(gè)條件是需要將要貼壁的表面光滑平整，而羊膜在無(wú)支持物的情況下浸到培養(yǎng)液中時(shí)，會(huì)由于浮力而被泡起，造成表面較多褶皺，使細(xì)胞不易貼壁并進(jìn)而影響其生長(zhǎng)和增殖。同時(shí)，羊膜應(yīng)該能容易且平整地固定在支持物上，并置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中。為了使獲得的負(fù)載干細(xì)胞的大面積羊膜貼片在應(yīng)用時(shí)能盡量完整且緊密地與創(chuàng)面貼合，在將羊膜原片固定在支持物上時(shí)應(yīng)盡量保持羊膜原片的平整和完整。

因此，為了制備符合上述要求的負(fù)載干細(xì)胞的大面積羊膜貼片，需要研制一種新的配套的制備裝置。

實(shí)用新型內(nèi)容

本實(shí)用新型所要解決的技術(shù)問題是：在制備負(fù)載干細(xì)胞的直徑為10cm以上的大羊膜貼片時(shí)，由于細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)的一個(gè)條件是需要將要貼壁的表面光滑平整，而羊膜在無(wú)支持物的情況下浸到培養(yǎng)液中時(shí)，會(huì)由于浮力而被泡起，造成表面較多褶皺，使細(xì)胞不易貼壁并進(jìn)而影響其生長(zhǎng)和增殖，同時(shí)，羊膜應(yīng)該能容易且平整地固定在支持物上，并置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中。為了使獲得的負(fù)載干細(xì)胞的大面積羊膜貼片在應(yīng)用時(shí)能盡量完整且緊密地與創(chuàng)面貼合，在將羊膜原片固定在支持物上時(shí)應(yīng)盡量保持羊膜原片的平整和完整。

為達(dá)到上述目的，本實(shí)用新型提供一種負(fù)載干細(xì)胞的大面積羊膜貼片的制備裝置，其特征在于其由細(xì)胞培養(yǎng)皿和水平置于其中的水平支持物組成，其中所述水平支持物的大小的上限為與細(xì)胞培養(yǎng)皿的大小盡量接近，以鋪上羊膜后能置入細(xì)胞培養(yǎng)皿為限，所述細(xì)胞培養(yǎng)皿的深度以置入緊密貼附了羊膜原片的水平支持物后，所述水平支持物的水平臺(tái)面的上表面在垂直高度上低于細(xì)胞培養(yǎng)皿的邊壁上沿至少1cm為限，所述細(xì)胞培養(yǎng)皿的直徑為9-26cm。

于較佳的實(shí)施例中，所述細(xì)胞培養(yǎng)皿的形狀與所述支持物的形狀相同，進(jìn)一步地，所述形狀為圓形、方形、長(zhǎng)方形，更進(jìn)一步地，所述形狀為圓形。所述細(xì)胞培養(yǎng)皿為普通商用的細(xì)胞培養(yǎng)皿；所述水平支持物的材質(zhì)玻璃。當(dāng)然，所述細(xì)胞培養(yǎng)皿的材質(zhì)并無(wú)特定限制，只要其能支持細(xì)胞生長(zhǎng)即可，所述水平支持物的材質(zhì)也可以為塑料。所述水平支持物的水平面的厚度為1-4mm，進(jìn)一步地，厚度為1.5mm。

于較佳的實(shí)施例中，所述水平支持物的水平面的朝下的一面固定有用于輔助固定羊膜原片的突起物，所述突起物穩(wěn)定地支撐所述水平支持物且所述突起物的水平面大小小于水平支持物的水平面的大小，所述突起物是其水平面與水平支持物的水平面呈同心圓的圓形突起物。

或者，于另一較佳的實(shí)施例中，所述水平支持物的水平臺(tái)面的朝下的一面固定有用于輔助固定羊膜原片的突起物，所述突起物穩(wěn)定地支撐所述水平支持物且所述突起物的水平面大小小于水平支持物的水平面的大小，所述突起物是形成平面且使水平支持物平穩(wěn)地水平置于培養(yǎng)皿中的至少3個(gè)栓狀突起物。

于較佳的實(shí)施例中，所述水平支持物的面積為200cm²。當(dāng)然，根據(jù)所用細(xì)胞培養(yǎng)皿的大小不同，所述水平支持物的面積可以為80cm²-500cm²。