[實(shí)用新型]呋喃妥因代謝物檢測(cè)試劑盒

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201220552158.6
• 申請(qǐng)日: 2012-10-25
• 公開（公告）號(hào): CN202903799U
• 公開（公告）日: 2013-04-24
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 何方洋;余厚美;劉福林;蒲小容;何麗霞;王建霞;段盈盈
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 北京勤邦生物技術(shù)有限公司
• 主分類號(hào): G01N33/577
• 分類號(hào): G01N33/577
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

（一）技術(shù)領(lǐng)域：本實(shí)用新型涉及一種呋喃妥因代謝物檢測(cè)試劑盒，特別是檢測(cè)動(dòng)物源性食品中呋喃妥因代謝物殘留量的試劑盒。

（二）背景技術(shù)：硝基呋喃類藥物因有非常好的抗菌作用和藥動(dòng)力學(xué)的特性，曾經(jīng)被廣泛應(yīng)用，作為禽類、水產(chǎn)和豬促生長(zhǎng)的添加劑。但在長(zhǎng)時(shí)間的實(shí)驗(yàn)研究過(guò)程中發(fā)現(xiàn)，硝基呋喃類藥物和代謝物均可以使實(shí)驗(yàn)動(dòng)物發(fā)生癌變和基因突變，正因?yàn)槿绱瞬艑?dǎo)致此類藥物禁止在治療和飼料中使用。呋喃妥因在1995年被禁用。

由于硝基呋喃類藥物在體內(nèi)很快就能被代謝，而在組織中結(jié)合的代謝產(chǎn)物則能存留較長(zhǎng)的一段時(shí)間，所以在分析此類藥物的殘留時(shí)經(jīng)常要分析其代謝后的產(chǎn)物，管理部門就以檢測(cè)代謝產(chǎn)物為手段達(dá)到檢測(cè)硝基呋喃類殘留的目的。呋喃妥因代謝產(chǎn)物AHD；呋喃它酮代謝產(chǎn)物AMOZ；呋喃唑酮代謝產(chǎn)物AOZ；硝基糠腙（呋喃西林）代謝產(chǎn)物SEM。

用來(lái)檢測(cè)呋喃妥因代謝物的最常用方法是LC-UV，LC-MS和LC-MS/MS。酶聯(lián)免疫方法結(jié)合了色譜技術(shù)，采用AHD衍生物的特異性抗體，具有很高的精確度和靈敏度，較低的操作技術(shù)要求和短暫的檢測(cè)時(shí)間，檢測(cè)樣本量大等特點(diǎn)在檢測(cè)中很好的表現(xiàn)出來(lái)。

（三）實(shí)用新型內(nèi)容：本實(shí)用新型提供一種小巧輕便的呋喃妥因代謝物檢測(cè)試劑盒，其操作簡(jiǎn)便，檢測(cè)靈敏度高，成本低，可進(jìn)行一次連續(xù)進(jìn)行多個(gè)樣品中呋喃妥因代謝物殘留量的測(cè)定，減少了檢測(cè)樣本所需要的時(shí)間。

呋喃妥因代謝物檢測(cè)試劑盒，包括固相載體、放試劑的下凹瓶位、位于下凹瓶位上的試劑瓶，固相載體上設(shè)有微孔條，微孔條包括微孔、包被層；試劑瓶包括裝有呋喃妥因代謝物單克隆抗體溶液的試劑瓶、裝有辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的羊抗鼠抗抗體的試劑瓶。

所述包被層由呋喃妥因代謝物偶聯(lián)抗原組成。

所述試劑盒還包括6瓶裝有呋喃妥因代謝物標(biāo)準(zhǔn)液的試劑瓶，2瓶裝有底物顯色液的試劑瓶，1瓶裝有終止液的試劑瓶，1瓶裝有洗滌液的試劑瓶，1瓶裝有緩沖液的試劑瓶，1瓶裝有衍生化試劑的試劑瓶。

所述固相載體由96孔聚苯乙烯試劑板組成。

每一個(gè)試劑盒中的試劑足夠進(jìn)行96次測(cè)定，既可進(jìn)行一次連續(xù)多個(gè)樣品的檢測(cè)，也可以將板孔拆開多次檢測(cè)。檢測(cè)時(shí)，樣本中的呋喃妥因代謝物將和微孔條包被層的呋喃妥因代謝物偶聯(lián)抗原競(jìng)爭(zhēng)呋喃妥因代謝物單克隆抗體，加入辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的羊抗鼠抗抗體后，用底物顯色液顯色，樣本吸光度值與樣本中呋喃妥因代謝物的殘留量成負(fù)相關(guān)，與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較再乘以其對(duì)應(yīng)的稀釋倍數(shù)，即可得出樣品中呋喃妥因代謝物殘留量。

經(jīng)實(shí)驗(yàn)表明本試劑盒具有很高的靈敏度：檢測(cè)靈敏度為：0.1μg/L。相對(duì)于其他呋喃妥因代謝物檢測(cè)方法，本試劑盒所需儀器較少，同類實(shí)驗(yàn)室一般均有配備，所需成本較低。

本實(shí)用新型的有益效果是：能快速、簡(jiǎn)便、靈敏、準(zhǔn)確地用于動(dòng)物源性食品中呋喃妥因代謝物殘留量的檢測(cè)。

（四）附圖說(shuō)明：

圖1本實(shí)用新型試劑盒的固相載體一列微孔條圖。

圖2?本實(shí)用新型固相載體圖。

圖3?本實(shí)用新型盒體、下凹瓶位結(jié)構(gòu)示意圖；

（五）具體實(shí)施方式：

如圖1至圖3所示，呋喃妥因代謝物檢測(cè)試劑盒，盒體1內(nèi)具有固定模具形成的下凹瓶位2，下凹瓶位用于放置裝有溶液的試劑瓶，96孔聚苯乙烯試劑板組成的固相載體3，固相載體的的微孔條4包括微孔5和包被層6，包被層由呋喃妥因代謝物偶聯(lián)抗原組成，試劑瓶包括裝有呋喃妥因代謝物單克隆抗體溶液的試劑瓶、裝有辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的羊抗鼠抗抗體的試劑瓶。

為了更有利于檢測(cè)呋喃妥因代謝物殘留的檢測(cè)，試劑盒還可以包括有6瓶裝有呋喃妥因代謝物標(biāo)準(zhǔn)液的試劑瓶，2瓶裝有底物顯色液的試劑瓶，1瓶裝有終止液的試劑瓶，1瓶裝有洗滌液的試劑瓶，1瓶裝有緩沖液的試劑瓶，1瓶裝有衍生化試劑的試劑瓶。

試劑盒的試劑瓶?jī)?nèi)的具體成分如下：

（1）呋喃妥因代謝物單克隆抗體工作液10ml?/瓶；

（2）呋喃妥因代謝物標(biāo)準(zhǔn)品溶液1ml/瓶，濃度分別為0μg/L、0.1μg/L、0.3μg/L、0.9μg/L、2.7μg/L、8.1μg/L；

（3）辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的羊抗鼠抗抗體工作液12ml/瓶；

（4）底物顯色液，分別為底物顯色A液，底物顯色B液，底物顯色液A液為過(guò)氧化脲7ml/瓶，底物顯色液B液為四甲基聯(lián)苯胺7ml/瓶；

（5）終止液7ml/瓶；

（6）緩沖液50ml/瓶，為pH值為7.2、0.2-0.5mol/L磷酸鹽緩沖液。使用時(shí)2倍稀釋。