[實(shí)用新型]一種檢測(cè)髓過(guò)氧化物酶的試劑盒

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201220465120.5
• 申請(qǐng)日: 2012-09-07
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN202814978U
• 公開(kāi)（公告）日: 2013-03-20
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張開(kāi)山;蘇廣宇;高陽(yáng);劉碧蓮
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 杭州華得森生物技術(shù)有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): G01N33/558
• 分類(lèi)號(hào): G01N33/558;G01N33/544
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種試劑盒，特別是涉及一種檢測(cè)髓過(guò)氧化物酶同型或亞型的免疫快速檢測(cè)試劑盒。?

背景技術(shù)

髓過(guò)氧化物酶(myeloperoxidase，MPO)是中性粒細(xì)胞嗜天青顆粒產(chǎn)生的一種重要的過(guò)氧化物酶，主要存在于嗜中性粒細(xì)胞和單核細(xì)胞中。成熟的MPO由兩個(gè)亞單位聚合而成，每個(gè)亞單位由一個(gè)59-64kDa的重鏈和一個(gè)14kDa的輕鏈構(gòu)成，每個(gè)亞單位中含有一個(gè)共價(jià)結(jié)合的血紅素，具有MPO特有的綠色光譜特性。MPO能催化過(guò)氧化氫與氯的反應(yīng)產(chǎn)生次氯酸，具有很強(qiáng)的抗微生物作用，在機(jī)體產(chǎn)生和調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)方面發(fā)揮作用。然而，MPO催化反應(yīng)生成過(guò)量的氧化劑時(shí)，會(huì)導(dǎo)致氧化應(yīng)激和氧化性組織損傷。?

髓過(guò)氧化物酶的活性與人類(lèi)多種疾病的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)，神經(jīng)炎癥疾病方面包括：多發(fā)性硬化癥，阿爾茨海默氏癥，帕金森氏癥和中風(fēng)等。其他炎性疾病如：慢性阻塞性肺病，囊腫性纖維化，動(dòng)脈粥樣硬化，炎癥性腸病，疾病，腎小球損傷和類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎。肺癌也顯示和MPO水平升高有關(guān)。此外，根據(jù)之前的研究顯示，MPO水平和心血管疾病密切相關(guān)。然而，這些以往的研究都沒(méi)有涉及MPO同型和/或亞型與特定的疾病狀態(tài)存在具體相關(guān)。?

目前，用于檢測(cè)MPO的方法有酶聯(lián)免疫吸附法、光激化學(xué)發(fā)光檢測(cè)法、流式細(xì)胞儀測(cè)定法、毛細(xì)管電泳法等，這些方法操作復(fù)雜、反應(yīng)時(shí)間長(zhǎng)，且均未涉及到對(duì)MPO同型或亞型的檢測(cè)。因此，急需一種專(zhuān)門(mén)檢測(cè)MPO同型或亞型的檢測(cè)方法，用于鑒定過(guò)敏癥、炎癥、心血管疾病或自身免疫性疾病的狀態(tài)。同時(shí)，本發(fā)明試劑盒操作時(shí)間短，結(jié)果客觀可靠，操作簡(jiǎn)便、不需要配備復(fù)雜儀器設(shè)備，結(jié)果直觀肉眼可判斷。?

發(fā)明內(nèi)容

本實(shí)用新型的目的在于提供一種特異性強(qiáng)，靈敏度高，操作簡(jiǎn)便、快速、高效、準(zhǔn)確的檢測(cè)髓過(guò)氧化物酶同型或亞型的免疫快速檢測(cè)試劑盒，輔助診斷或預(yù)后過(guò)敏性疾病、炎癥性疾病、心血管疾病或自身免疫性疾病的狀態(tài)。?

本實(shí)用新型提供的檢測(cè)髓過(guò)氧化物酶同型或亞型的免疫快速檢測(cè)試劑盒，包括塑料盒體、襯墊、附著在襯墊上依次相連的樣品墊、金標(biāo)墊、硝酸纖維素膜檢測(cè)層和吸收墊。襯墊的兩端，分別設(shè)有樣品墊和吸收墊；襯墊中部設(shè)有硝酸纖維素膜檢測(cè)層。硝酸纖維素膜檢測(cè)層與樣品墊交界處，設(shè)有包被金標(biāo)記的抗髓過(guò)氧化物酶同型或亞型抗體的金標(biāo)墊。金標(biāo)墊一端部分設(shè)置在樣品墊之下，另一端部分設(shè)置在硝酸纖維素膜檢測(cè)層之上。在與樣品墊延續(xù)的檢測(cè)層上設(shè)有檢測(cè)線T和質(zhì)控線C，檢測(cè)線上包被有抗髓過(guò)氧化物酶同型或亞型抗體，質(zhì)控線上包被有羊抗鼠IgG。?

所述金標(biāo)墊設(shè)置在樣品墊之下，與樣品墊設(shè)有5mm的重疊區(qū)；所述金標(biāo)墊設(shè)置在硝酸?纖維素膜檢測(cè)層之上，與硝酸纖維素膜檢測(cè)層設(shè)有2mm的重疊區(qū)，重疊區(qū)保證樣品在樣品墊、金標(biāo)墊和檢測(cè)層上無(wú)阻礙地流動(dòng)。?

所述塑料盒體用于固定盒體內(nèi)襯墊，盒體上設(shè)置加樣區(qū)和檢測(cè)觀察區(qū)，用于滴加樣品、觀測(cè)檢測(cè)結(jié)果。?

所述襯墊為PVC板，也可以代之以不吸水的硬質(zhì)材料，用于固定盒內(nèi)各組建。?

所述金標(biāo)墊上抗髓過(guò)氧化物酶同型或亞型抗體的金標(biāo)記為膠體金顆粒，也可以代之以熒光顆粒、乳膠顆粒、磁性顆粒或其他有色顆粒。?

本實(shí)用新型試劑盒具有如下有益效果：?

(1)檢測(cè)速度快。全過(guò)程只需10分鐘，可以實(shí)現(xiàn)單個(gè)樣品或大量樣品的檢測(cè)；?

(2)靈敏度高。最低檢測(cè)單位為ng/ml；?

(3)特異性強(qiáng)。和其他心力衰竭標(biāo)志物無(wú)交叉反應(yīng)；?

(4)操作簡(jiǎn)捷。檢測(cè)過(guò)程無(wú)需其他試劑，樣品無(wú)需特殊處理，可肉眼觀測(cè)也可結(jié)合儀器使用。?

(5)結(jié)果判斷方便。快速檢測(cè)試劑盒以肉眼可見(jiàn)的紅色印記作為結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn)，即檢測(cè)層上只有質(zhì)控線(C線)顯示紅色，表示樣品不含髓過(guò)氧化物酶同型或亞型，檢測(cè)線(T線)和控制線(C線)上均顯示紅色，表示樣品含有髓過(guò)氧化物酶同型或亞型。結(jié)果判斷明確、直觀。?

(6)檢測(cè)樣品范圍廣。全血、血漿、血清、細(xì)胞提取物或組織提取物均可用作試驗(yàn)樣本，所需試劑和樣品量少，樣品量最低可至50-100μL。?

附圖說(shuō)明

圖1為本實(shí)用新型的結(jié)構(gòu)示意圖，其中1為樣品墊、和吸收墊，2為金標(biāo)墊、，3為硝酸纖維素膜檢測(cè)層，4為檢測(cè)線T，5為質(zhì)控線C，6為吸收墊，7為襯墊。?

圖2為本實(shí)用新型的檢測(cè)結(jié)果判讀示意圖，圖2.a為陽(yáng)性結(jié)果，圖2.b為陰性結(jié)果，圖2.c結(jié)果無(wú)效，圖2.d結(jié)果無(wú)效。其中8為觀察區(qū)，9為加樣區(qū)，10為塑料盒體，T為檢測(cè)線，C為質(zhì)控線。?

具體實(shí)施方式