[實用新型]C反應蛋白快速全程定量免疫層析檢測試劑盒

有效

• 申請號: 201220399463.6
• 申請日: 2012-08-07
• 公開（公告）號: CN202794189U
• 公開（公告）日: 2013-03-13
• 發明（設計）人: 李洲;楊發青;王程飛
• 申請（專利權）人: 天津中新科炬生物制藥有限公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N33/558
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本實用新型是涉及生物應用技術領域，特別是涉及一種以膠體金免疫層析法制備的C反應蛋白快速全程定量免疫層析檢測試劑盒。

背景技術

人類在組織損傷的急性期，肝臟合成的一些血漿蛋白顯著增加，這些蛋白質通稱為急性時相蛋白，C反應蛋白(CRP)是急性時相蛋白中變化最顯著的一種。

CRP在正常人血清中其含量極微；在組織受到損傷、炎癥、感染或腫瘤破壞時CRP可以在數小時內急劇上升，CRP被廣泛應用于臨床疾病的早期診斷及鑒別診斷，其升高可見于：1、組織損傷、感染、腫瘤、心肌梗塞及一系列急慢性炎癥性疾病，如風濕性關節炎、全身性血管炎、多肌痛風濕病；2、術后感染及并發癥的指標：手術后病人CRP升高，術后7-10天CRP水平應下降，如CRP不降低或再次升高，提示可能并發感染或血栓栓塞；3、可作為細菌性感染和病毒性感染的鑒別診斷：大多數細菌性感染會引起患者血清CRP升高，而病毒性感染則多數不升高。

近年來研究發CRP水平還同未來發生心血管疾病密切相關，大量研究資料表明，動脈粥樣化也是一個慢性炎癥過程，CRP輕度升高與冠狀動脈事件、中風及周圍血管病相關，是一項獨立的危險因素；高敏CRP(Hs-CRP)水平升高者發生急性腦卒中的幾率是正常健康人的2倍，發生心肌梗死的幾率是正常者的3倍。2003年歐洲高血壓防治指南(ESH/ESC)正式推薦，高血壓患者需檢測hs-CRP水平。

目前國內用于全自動生化儀的免疫透射比濁法試劑CRP出現了兩種：普通CRP有較高的線性但靈敏度不好，高敏CRP有較高的靈敏度但線性較低，用途也有所區別；近幾年來，隨著檢驗技術的發展，開始出現了一種全程CRP，這種CRP即能滿足較高的靈敏度，又能滿足較高的線性，用途更廣。但全程CRP檢測試劑主要采用化學發光法或乳膠法制備，只適合血清或血漿樣本，不適合全血樣本。尚未有采用免疫層析膠體金技術制備的全程CRP檢測試劑盒。

免疫層析膠體金技術是新型的診斷技術，基本原理如下：利用膠體金標記一種抗原或抗體，在試劑的NC膜上包被相應的配對抗原或抗體，檢測時當樣品中含相應的特異性抗體或抗原時，膠體金標記顆粒和樣品中配體相結合形成復合物，然后在NC膜上層析，再被包被抗原或抗體捕獲，形成肉眼可見的檢測T線，在一定的條件下，T線的強弱和樣品中的濃度呈正相關或負相關，從而實現檢測。具有操作簡便、反應快速、敏感性高、特異性強、適合現場檢測和經濟實用等優點。

發明內容

本實用新型的目的是提供C反應蛋白快速全程定量免疫層析檢測試劑盒，具有全程定量或半定量檢測能力，操作簡便、反應快速、敏感性高、特異性強、適合現場檢測和經濟實用等優點。

C反應蛋白快速全程定量免疫層析檢測試劑盒，其特征在于試劑盒由試紙卡、比色卡和免疫層析結果判讀記錄儀構成。

所述試紙卡結構為：在塑料底板(1)一端粘貼上樣墊(2)，上樣墊的一端緊密壓接含有標記抗人C反應蛋白特異性抗體的膠體金墊(3)，膠體金墊一端緊密壓接硝酸纖維素NC膜(4)，NC膜上包被有相互分離的檢測線T(5)和質控線C(6)，檢測線為和標記抗體配對的CRP抗體，質控線為抗鼠IgG抗體，硝酸纖維素膜的另一端連接吸樣墊(7)形成試紙，試紙裝入塑料卡內形成試紙卡。

所述試紙卡的抗體為高敏CRP配對抗體，分別識別CRP識別不同表位，抗體可以為純化的單克隆抗體或多克隆抗體。

所述試紙卡的NC膜為孔徑8-12微米的多孔樣結構膜，上樣墊為玻璃纖維膜或無紡布，吸樣墊由吸水濾紙構成。

所述比色卡是白色背景上印有系列不同深淺紅色線條的紙板，用于對檢測結果的對比判定。不同深淺的紅色線條共6條，分別對應1、3、10、20、50、200mg/L的CRP濃度。

所述免疫層析結果判讀記錄儀是一種光學檢測系統，用于對檢測結果的定量判定，對CRP的檢測范圍為0-200mg/L。

所述試紙卡，NC膜抗體的包被過程為：以0.01M?pH7.2磷酸鹽緩沖液(PBS)將CRP抗體配制成0.6-2mg/ml的溶液，將抗鼠IgG配制成1-2mg/ml的溶液，用噴膜儀在NC膜上部和下部以1-1.5ul/cm的參數進行分別劃線，包被C、T線，劃線后將NC膜在干燥間，溫度20-25℃，濕度小于30％，干燥2-5小時。