[實用新型]一種特異性γ-谷氨酰基轉移酶檢測試劑盒

有效

• 申請號: 201220365550.X
• 申請日: 2012-07-26
• 公開（公告）號: CN202710562U
• 公開（公告）日: 2013-01-30
• 發明（設計）人: 于嘉屏
• 申請（專利權）人: 上海迪安醫學檢驗所有限公司
• 主分類號: G01N33/573
• 分類號: G01N33/573
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本實用新型涉及一種特異性γ-谷氨酰基轉移酶特異性檢測試劑盒。

背景技術

血清中的γ-谷氨酰基轉移酶(GGT，EC2.3.2.2)是以同工酶或多種分子形式存在的，有些GGT能與脂蛋白結合在一起，如與低密度脂蛋白(LDL)和極低密度脂蛋白(VLDL)結合，但其形成原因及生理功能尚不清楚。現有技術中，關于血清GGT總活性測定是臨床常規開展的酶學檢測項目，其在急性病毒性肝炎、慢性肝炎、肝炎后肝硬化、肝內膽汁淤積、肝外膽道阻塞、原發性或轉移性肝癌時，均有不同程度增高；但血清中GGT總活性測定特異性低，無法作為與之相關疾病的特異性檢查，尤其是對于肝癌與其他肝病的鑒別診斷尚缺乏特異性的檢測方法及其配套產品。

實用新型內容

針對現有技術存在的上述問題，本實用新型的目的是提供一種特異性γ-谷氨酰基轉移酶檢測試劑盒，是特異性針對與血清中低密度脂蛋白和極低密度脂蛋白結合的γ-谷氨酰基轉移酶活性，以實現用簡便、快捷的方法來檢測樣品中肝癌及其其他嚴重肝病的鑒別診斷。

為實現上述實用新型目的，本實用新型采用的技術方案如下：

一種特異性γ-谷氨酰基轉移酶檢測試劑盒，具體包括：試劑盒本體和三試劑瓶，所述試劑盒本體包括盒體和盒蓋；所述三試劑瓶位于所述盒體內，包括抗體液、緩沖液和沉淀劑。

作為一種優選方案，所述的抗體液為抗載脂蛋白B(Apo?B)抗體液。

作為進一步優選方案，所述的緩沖劑為pH7.0，30mmol/L?MOPS緩沖液。

作為進一步優選方案，所述的沉淀劑為30％聚乙二醇6000。

與現有技術相比，本實用新型提供了一種簡單有效的診斷或輔助診斷肝癌的診斷試劑盒，實驗結果表明，本實用新型提供的特異性檢測血清LDL/VLDL-GGT試劑盒可用于檢測或輔助檢測肝癌的診斷試劑或診斷試劑盒，平均診斷特異性可達70％以上，平均陽性預測值為90％。因此，其應用前景十分廣闊。

附圖說明

圖1為本實用新型提供的特異性γ-谷氨酰基轉移酶檢測試劑盒的結構示意圖。

具體實施方式

下面結合實施例及對比例對本實用新型作進一步詳細、完整地說明。

實施例

1、制備特異性γ-谷氨酰基轉移酶檢測試劑盒(10人份)，具體結構如圖1所示，其中包括試劑盒本體和三試劑瓶，其中所述試劑盒本體包括盒體(4)和盒蓋(5)，三試劑管分別為：

抗體液(1)：抗人Apo?B抗體+緩沖液；

緩沖液(2)：pH7.0，30mmol/L?MOPS；

沉淀劑(3)：30％聚乙二醇6000。

A.試劑組成：

1)對照組(總活性組)：pH7.0，30mmol/L?MOPS緩沖液850μL。

2)抗體組(待測定組)：含抗載脂蛋白B抗體850μL、30％聚乙二醇6000沉淀劑420μL。

B.操作步驟：

(1)抗體組：在離心試管內加入患者血清標本100μL，抗體液80μL，沉淀劑20μL，37℃放置20min，離心(5500g×5min)，取上清液在生化分析儀上測定GGT活性。

(2)對照組：在離心試管內加入患者血清標本100μL，緩沖液80μL，沉淀劑20μL，37℃放置20min，離心(5500g×5min)，取上清液在生化分析儀上測定GGT活性。

(3)結果計算：LDL/VLDL-GGT活性(U/L)＝(對照組管一抗體組管)×2。

注：GGT活性測定可采用各實驗室在生化分析儀上應用的方法，試劑自備。具體檢測方法如下：

a)檢測原理：本法以溶解度較大的L-γ-谷氨酰-3-羧基-對硝基苯胺為底物，雙甘肽為γ-谷氨酰基的受體。在GGT的催化下，谷氨酰基轉移到雙甘肽分子上，同時釋放出黃色的2-硝基-5-氨基苯甲酸，引起405nm～410nm波長處吸光度的增高。吸光度增高速率與GGT活性呈正比關系。

b)檢測試劑：試劑成份和在反應液中的終末濃度如下：pH7.7，37℃，150mmol/L甘氨酰甘氨酸緩沖液，6mmol/L的L-γ-谷氨酰-3-羧基-對硝基苯胺，樣品體積分數1∶11。

c)檢測儀器參數：溫度37℃，波長410nm，帶寬≤2nm，比色杯光徑1.0cm，孵育時間180s，延遲時間60s，監測時間180s，讀數點≥6，因數1159。