[實用新型]檢測細胞遷移與侵襲運動的裝置

有效

• 申請號: 201220360879.7
• 申請日: 2012-07-24
• 公開（公告）號: CN202705350U
• 公開（公告）日: 2013-01-30
• 發明（設計）人: 沈國棟;胡世蓮;程民;徐維平;徐婷娟;王衛東
• 申請（專利權）人: 安徽省立醫院
• 主分類號: C12M1/00
• 分類號: C12M1/00;C12M1/34
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 關暢

技術領域

本實用新型涉及一種檢測細胞遷移與侵襲運動的裝置。

背景技術

目前在生物學或醫學實驗中檢測細胞遷移的方法有細胞劃痕（wound?healing）法和Transwell法。細胞劃痕法比較簡單，只需要在長滿的細胞中間用移液槍頭作一劃痕，洗去被劃傷的細胞后，培養24小時內觀察細胞遷移即可。該方法比較粗糙，只能定性，不能定量，對于緊密粘附在一起生長的細胞容易引起細胞成片漂起而造成實驗失敗的缺點，同時該方法也不能用于觀察細胞侵襲運動。Transwell法所用裝置由上下兩個小室組成，中間有一孔徑為3-8μm的濾膜，上室加入受檢細胞的懸液，下室加入常含生長因子或趨化因子的培養液，置37℃孵育數小時，最后取濾膜，經固定、干燥、染色、脫色等步驟，將處理后的濾膜置顯微鏡下對細胞進行計數。通過對濾膜下層的細胞計數，來反映細胞的遷移能力。該方法的缺點主要有：裝置的價格昂貴，細胞接種和檢測步驟繁瑣，難以進行實時監測活細胞遷移與侵襲運動。

實用新型內容

本實用新型的目的是提供一種檢測細胞遷移與侵襲運動的裝置，包括一方形底板和垂直于所述底板的四個側壁組成的方形平皿；所述方形平皿中至少有兩個相對的所述側壁為可拆卸式的；所述底板上設有十字形坐標網線。該裝置可放于常規的細胞培養皿或培養板中，形成一個無細胞空間，當將所述可拆卸的側壁卸下時，所述細胞培養皿或培養板中的細胞會向所述底板區域移動，通過所述十字形坐標網線，可實時監測活細胞的遷移與侵襲移動。

在上述裝置中，所述側壁的垂直高度應小于常規細胞培養皿或培養板的高度，具體可小于15mm，如13mm；所述底板的邊長可在5mm～30mm之間，以便于將所述方形平皿放置于細胞培養皿或培養板內使用。

在上述裝置中，所述底板為正方形或長方形。

在上述裝置中，所述底板具體可為長度為20mm、寬度為13mm的長方形。

在上述裝置中，所述十字形坐標網線由數條與所述底板四邊平行的直線組成。

在上述裝置中，為了便于觀測和區分，所述十字形坐標網線將所述平板分隔成四個小方格刻度網區域；所述小方格的邊長具體可為0.02mm。

上述裝置可由常規的透明材料如塑料制成。

使用本實用新型所提供的檢測細胞遷移與侵襲運動的裝置，優點在于：可以通過底板上的坐標體系，直接觀察受檢細胞的遷移及侵襲運動，并可定量其運動距離；操作簡便、精確性高，而且制造簡單，成本低廉；在細胞密度不高時，可以對遷移的細胞直接計數，具有十分廣闊的市場前景。

附圖說明

圖1為本實用新型的檢測細胞遷移與侵襲運動的裝置的立體圖。

圖2為本實用新型的檢測細胞遷移與侵襲運動的裝置中底板的俯視圖。

圖3為將本實用新型檢測細胞遷移與侵襲運動的裝置放置于細胞培養皿中的剖視圖。

圖4為將本實用新型檢測細胞遷移與侵襲運動的裝置的兩個側壁拆除后的剖視圖。

圖5為細胞在本實用新型檢測細胞遷移與侵襲運動的裝置底板上遷移的示意圖。

圖1-5中，1為底板，2為側壁，3為細胞培養皿蓋，4為細胞培養皿，5為細胞。

具體實施方式

下面結合附圖對本實用新型做進一步說明，但本實用新型并不局限于以下實施例。

本實用新型提供的檢測細胞遷移與侵襲運動的裝置（圖1）是一個由長方形底板1和垂直于底板1的四個側壁2組成的方形平皿，其中兩個相對較長的側壁可拆卸，另外兩個相對較短的側壁與底板1是一體的；底板1上表面設有數條與底板四邊平行的直線組成十字形坐標網線（圖2），將底板1分隔成四個小方格刻度網區域，小方格刻度網之間以十字形空白區域隔開，可用于實時觀察與測定受檢細胞向中間遷移運動以及形態學參數，每個小方格的邊長為0.02mm。四個側壁2的垂直高度均為13mm；底板1的長度為20mm，寬度為13mm。

上述檢測細胞遷移與侵襲運動的裝置中，四個側壁2還可都設成可拆卸式的，再根據實驗的具體情況拆除相應的側壁后進行觀測；底板1還可為正方形；底板1的長度、寬度和側壁2的垂直高度可以根據實際需要進行確定；十字形坐標網線的直線之間的距離或小方格大小也可以根據需要進行確定。

使用上述檢測細胞遷移與侵襲運動的裝置時，在底板1上可鋪入纖維粘連蛋白(fibronectin)，層粘連蛋白(laminin)，膠原蛋白(collagen)，玻璃粘連蛋白(vitronectin)或基質膠(matrigel)等細胞外基質膠，用來觀察與測定受檢細胞的侵襲運動。用于觀測貼壁生長細胞的遷移與侵襲運動時（圖3），在細胞接種前，將方形平皿底板1的底面輕輕涂一些真空硅膠（如美國DOW?CORNING公司產品等），即可將其固定于細胞培養皿或培養板的底面上；然后在細胞培養皿或培養板中加入單細胞懸液，靜置培養4-6小時；拆除兩個相對較長的側壁2（圖4），繼續培養6-24小時；部分受檢細胞遷移到底板1的坐標系統區域（圖5），在光學倒置顯微鏡下觀察與確定細胞移動距離與方向，并根據觀測時間間隔，計算細胞遷移運動速率，以此來反映細胞的遷移與侵襲能力。