[實用新型]連續梯度混合裝置

有效

• 申請號: 201220346795.8
• 申請日: 2012-07-17
• 公開（公告）號: CN202762332U
• 公開（公告）日: 2013-03-06
• 發明（設計）人: 鄭杉水;劉繼來;楊艷
• 申請（專利權）人: 上海禾高生物科技有限公司
• 主分類號: B01F5/04
• 分類號: B01F5/04;B01F3/08
• 代理公司: 上海碩力知識產權代理事務所 31251
• 代理人: 王建國

技術領域：

本實用新型涉及一種生物領域的聚丙烯酰胺梯度凝膠的灌制生產混合裝置，尤其涉及一種生產聚丙烯酰胺梯度凝膠及實驗室灌制梯度凝膠的連續梯度混合裝置。

背景技術：

梯度凝膠電泳通常采用聚丙烯酰胺凝膠，但不是在單一濃度（孔徑）的凝膠上進行，而是形成梯度凝膠。從凝膠頂部到底部丙烯酰胺的濃度呈梯度變化，如通常頂部凝膠濃度為5%，底部凝膠濃度為25%。

凝膠梯度是通過專用的梯度混合裝置形成的，高濃度的丙烯酰胺溶液首先加入到玻璃平板中，而后溶液濃度呈梯度下降，因此在凝膠的頂部孔徑較大，而在凝膠的底部孔徑較小。梯度凝膠電泳也通常加入SDS（十二烷基硫酸鈉），并有濃縮膠。電泳過程與SDS－聚丙烯酰胺凝膠電泳基本類似。與單一濃度的凝膠相比，梯度凝膠有幾個優點：

①首先，梯度凝膠比單一濃度凝膠的分離范圍更寬，可以同時分離較大范圍分子量的蛋白質。單一凝膠電泳對于分子量超過其分離范圍的蛋白質，過大或過小，都不能分離。而梯度凝膠孔徑范圍比單一凝膠大，分子量較大的蛋白質可以在凝膠頂部大孔徑部分得到分離，而分子量較小的蛋白質可以在凝膠底部小孔徑部分得到分離，所以分子量較大和較小的蛋白質可以同時得到分離。例如用4%～30%的梯度膠可以分離分子量5萬～200萬的蛋白質。

②另一個優點是梯度凝膠可以分辨分子量相差較小、在單一濃度凝膠中不能分辨的蛋白質。電泳過程中，蛋白質在梯度凝膠中遷移，經過的孔徑越來越小，直到凝膠的孔徑不能通透，這樣電泳過程中蛋白質就被濃縮，集中在一個很窄的區帶中。而分子量略小的蛋白質可以遷移得更靠前一些，被集中在略前面的區帶中。由于梯度凝膠孔徑逐步變小，在蛋白質不能通透的孔徑附近對蛋白有濃縮作用，所以電泳后形成很窄的區帶，可以分辨出分子量相差較小的蛋白質。對于太稀的樣品，在電泳過程中可以將樣品分幾次加樣，大小不同的蛋白質分子最終都會滯留在其相應的凝膠孔徑中而得到分離。

③可以直接測定天然狀態蛋白質的分子量而不需要解離為亞基，因此這一方法可以與SDS-PAGE測定分子量的方法互為補充。

梯度凝膠電泳主要適用于測定球蛋白的分子量，而對纖維蛋白將產生較大的誤差。由于分子量的測定必須是在未知和標準蛋白質分子到達完全被阻止遷移的孔徑時才能成立，因此電泳時要使用較高的電壓，例如平板凝膠為0.5mm厚，使用600V電壓，50mA電流，電泳時間約需2小時。

基于梯度凝膠相對于單一凝膠的優點，因此業內通常會采用專用的梯度混合裝置來混合凝膠，通常采用的梯度混合裝置可以參考申請名稱為“梯度混合裝置”的中國實用新型專利（申請號為200720062797.3），結合附圖1，可以看出該專利公開了一種梯度混合裝置,主體部分為有機玻璃混合器杯體,由帶支撐足2的杯座1、A杯3和B杯4兩個杯腔組成，支撐足2既起支撐作用又可以實現對梯度混合儀杯體局部高度的調節；杯間通道8上帶有血管夾5,杯間通道8采用一次性輸液管,易于清洗且更換方便;杯座上1帶有長條形水平儀6,操作前用于檢查杯座是否水平；B杯4內放有磁力攪拌棒7；蠕動泵9用于控制混合速度并將混合后的梯度凝膠泵至制膠板10。

具體操作時，先通過調節四個支撐足2的高度實現梯度混合儀杯體的水平，用血管夾5夾住杯間通道后同時向A杯3和B杯4中分別倒入配制好的稀膠溶液和濃膠溶液，松開血管夾5的同時開啟蠕動泵9,混合后的膠液將通過蠕動泵9泵至制膠板10，這個混合過程依靠磁力攪拌棒7的作用混勻，混勻好的液體通過蠕動泵9流出，這樣流出的液體從開始至結束濃度會呈梯度變化。它主要是利用重力作用使兩種不同的液體進入同一個容器，再在機械攪拌的作用下混勻，這種方法的弊端在于液體在B杯中的混合不是完全線性的，混勻效果不夠理想，得到的曲線如附圖2上中偏離理論的曲線。因此本領域迫切希望能夠提供一種能夠混合曲線線性，混合效果均勻連續的連續梯度混合裝置。

實用新型內容

本實用新型的目的在于提供一種連續梯度混合裝置，利用流體力學的基本原理使得液體在容器中即時混勻，混合效果均勻連續，為規模化的生產提供可靠的保障。

本實用新型是這樣實現的：

一種連續梯度混合裝置，包括盛放低濃度溶液的第一容器、盛放高濃度溶液的第二容器，盛放梯度混合液的第三容器，還包括設置有第一活塞的第一活塞缸體、設置有第二活塞的第二活塞缸體，所述第一活塞缸體的底端設置有一伸入到所述第一容器中的連通管道，所述第二活塞缸體的底端也設置有一伸入到所述第二容器中的連通管道以及一連通到所述第三容器的連通管道；所述連通管道上分別設有第一閥門、第二閥門、第三閥門；