[實(shí)用新型]一種用于體外測(cè)定牙齒充填修復(fù)材料細(xì)胞毒性的裝置

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201220299305.3
• 申請(qǐng)日: 2012-06-26
• 公開（公告）號(hào): CN202626190U
• 公開（公告）日: 2012-12-26
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 趙信義
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國人民解放軍第四軍醫(yī)大學(xué)口腔醫(yī)院
• 主分類號(hào): C12M1/34
• 分類號(hào): C12M1/34
• 代理公司: 西安弘理專利事務(wù)所 61214
• 代理人: 羅笛

技術(shù)領(lǐng)域

本實(shí)用新型涉及一種用于體外測(cè)定牙齒充填修復(fù)材料細(xì)胞毒性的裝置。

背景技術(shù)

牙齒修復(fù)材料是口腔醫(yī)學(xué)應(yīng)用最廣的生物材料，隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，每年都有許多新型牙齒修復(fù)材料出現(xiàn)。這些材料能被臨床接受的先決條件是必須經(jīng)過安全性和有效性的檢測(cè)與評(píng)價(jià),其中，生物相容性的測(cè)定是確保材料能安全地應(yīng)用于人體的重要保證。生物相容性是指在特定應(yīng)用中，材料產(chǎn)生適當(dāng)?shù)乃拗鞣磻?yīng)的能力。這一定義的內(nèi)在含義是指某一單個(gè)材料并不是在所有應(yīng)用中均是生物可接受的。例如氫氧化鈣水門汀材料作為牙齒蓋髓材料是可接受的，但作為植入材料就不可接受。

在牙齒修復(fù)材料的生物相容性評(píng)價(jià)中應(yīng)用了許多體外試驗(yàn)，其目的是盡量減少昂貴且影響因素眾多的動(dòng)物試驗(yàn)和在體試驗(yàn)。其中應(yīng)用細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)進(jìn)行的細(xì)胞毒性試驗(yàn)是一項(xiàng)應(yīng)用最廣泛的體外試驗(yàn)方法，也是口腔材料生物相容性評(píng)價(jià)體系中重要的檢測(cè)指標(biāo)。該試驗(yàn)讓培養(yǎng)細(xì)胞與被測(cè)材料通過一定方式接觸后，測(cè)定細(xì)胞的生長數(shù)量、生長情況及活性狀態(tài)來評(píng)價(jià)被測(cè)材料的細(xì)胞毒性。該試驗(yàn)容易實(shí)施，速度快，費(fèi)用比動(dòng)物試驗(yàn)和在體試驗(yàn)低很多，可以高度標(biāo)準(zhǔn)化和實(shí)驗(yàn)控制,結(jié)果的重復(fù)性好，并且可以嚴(yán)格控制以針對(duì)特定科學(xué)問題。

現(xiàn)有用于體外測(cè)定牙齒充填修復(fù)材料細(xì)胞毒性的試驗(yàn)方法有3種：直接接觸法或浸提液法、瓊脂擴(kuò)散(agar?diffusion)法和濾膜擴(kuò)散(millipore?filter)法。在直接接觸法或浸提液法中，被測(cè)材料或其浸提液直接與培養(yǎng)細(xì)胞接觸。瓊脂擴(kuò)散法和濾膜擴(kuò)散法分別是以瓊脂層和纖維素濾膜為屏障的間接接觸方法，被測(cè)材料通過瓊脂層或?yàn)V膜與培養(yǎng)細(xì)胞間接接觸,材料釋放的物質(zhì)通過滲透、擴(kuò)散的方式穿過瓊脂層或?yàn)V膜，作用于其下的細(xì)胞。

上述標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞毒性試驗(yàn)方法測(cè)定牙齒修復(fù)材料的細(xì)胞毒性時(shí)存在缺陷,最典型的是被測(cè)材料與細(xì)胞的接觸方式與實(shí)際情況差異很大，而接觸方式又是影響測(cè)定結(jié)果的重要因素。在體時(shí)，絕大多數(shù)的牙齒修復(fù)材料并不與組織細(xì)胞(主要是牙髓組織細(xì)胞)直接接觸，而是被一層牙本質(zhì)隔開。因此，一般認(rèn)為直接接觸法所得結(jié)果并不能反映或預(yù)測(cè)材料在在體時(shí)的生物相容性。

在瓊脂擴(kuò)散法和濾膜擴(kuò)散法中，雖然被測(cè)材料與培養(yǎng)細(xì)胞間有屏障隔開,但這兩種方法的屏障是模擬口腔黏膜，而非牙本質(zhì)。在瓊脂擴(kuò)散法中，材料釋放的物質(zhì)中，只有水溶性成分可以擴(kuò)散通過瓊脂層，作用于其下的細(xì)胞。如果材料中的成分不能擴(kuò)散過瓊脂，則不能測(cè)出,盡管在體證明了其刺激性。瓊脂的滲透特性與牙本質(zhì)的相差太大，遠(yuǎn)不能模擬牙本質(zhì)。另外，瓊脂擴(kuò)散法的結(jié)果是等級(jí)的半量化指標(biāo)，受觀察者主觀性影響較大，客觀性不高。濾膜擴(kuò)散法所用的濾膜實(shí)際上是由醋酸纖維制成的纖維網(wǎng)膜，其厚度、孔隙度及滲透性均與牙本質(zhì)相去甚遠(yuǎn),而且濾膜能被一些牙齒修復(fù)材料中的成分溶解，其適用測(cè)定的材料有限。因此，以此兩種方法測(cè)定牙齒修復(fù)材料的細(xì)胞毒性結(jié)果與動(dòng)物試驗(yàn)及在體觀察差別較大，相關(guān)性較小,表現(xiàn)在許多牙齒修復(fù)材料體外細(xì)胞毒性試驗(yàn)顯示較強(qiáng)的細(xì)胞毒性，但動(dòng)物試驗(yàn)及在體觀察卻顯示無刺激性。以臨床上常用的氧化鋅丁香油水門汀為例，現(xiàn)有的體外細(xì)胞毒性試驗(yàn)結(jié)果顯示該材料有嚴(yán)重的細(xì)胞毒性，而動(dòng)物試驗(yàn)和長期臨床應(yīng)用表明，該材料對(duì)牙髓組織刺激性小，而且還具有安撫收斂作用。導(dǎo)致體外細(xì)胞毒性試驗(yàn)結(jié)果與動(dòng)物試驗(yàn)或在體觀察相關(guān)性差的重要原因之一是體外細(xì)胞毒性試驗(yàn)中材料和靶細(xì)胞的接觸方式及牙本質(zhì)屏障的缺失。因?yàn)檠辣举|(zhì)能形成材料成分必須通過才能到達(dá)牙髓組織的屏障,研究表明，厚度為0.5~2mm的牙本質(zhì)屏障，能有效調(diào)節(jié)材料對(duì)牙髓的影響。

為了模擬在體情況，許多學(xué)者用離體牙制備牙本質(zhì)片作為屏障用于體外細(xì)胞毒性試驗(yàn)中，所得結(jié)果與動(dòng)物試驗(yàn)及在體研究的相關(guān)性有明顯的提高。但是，由于人離體牙本質(zhì)的通透性因牙齒不同而變化很大，甚至同一顆牙齒不同部位的牙本質(zhì)的滲透性也不同，因此，在用牙本質(zhì)片作為屏障時(shí)，需要廣泛收集并測(cè)定牙本質(zhì)片的滲透性,以篩選滲透率相近的牙本質(zhì)片來進(jìn)行試驗(yàn)。然而，由于符合要求的新鮮人離體牙越來越難以獲得，獲得足夠數(shù)量且滲透率相近的牙本質(zhì)片更不易得到。若采用易于獲得的動(dòng)物牙齒（如牛牙），也存在動(dòng)物牙本質(zhì)與人牙本質(zhì)在結(jié)構(gòu)和滲透性方面差異大的問題。這些原因使得以離體牙本質(zhì)片作為屏障的體外細(xì)胞毒性試驗(yàn)難以推廣。

發(fā)明內(nèi)容

本實(shí)用新型的目的在于提供一種用于體外測(cè)定牙齒充填修復(fù)材料細(xì)胞毒性的裝置，能夠模擬牙齒充填材料與牙髓細(xì)胞的接觸狀態(tài)，解決現(xiàn)有技術(shù)難以有效預(yù)測(cè)牙齒修復(fù)材料生物相容性的問題。