[實用新型]氨苯砜ELISA檢測試劑盒

有效

• 申請號: 201220228164.6
• 申請日: 2012-05-19
• 公開（公告）號: CN202583194U
• 公開（公告）日: 2012-12-05
• 發明（設計）人: 何方洋;萬宇平;陶光燦;羅貴昆;何勇;崔廷婷;石潔
• 申請（專利權）人: 北京勤邦生物技術有限公司
• 主分類號: G01N33/543
• 分類號: G01N33/543
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本實用新型涉及一種檢測氨苯砜殘留量的試劑盒，特別是檢測動物源性食品中氨苯砜殘留量的酶聯免疫檢測（ELISA）試劑盒，ELISA（Enzyme?Linked?Immunosorbnent?Assay）是酶聯免疫吸附劑測定的簡稱，它是繼免疫熒光和放射免疫技術之后發展起來的一種酶免技術。

背景技術

氨苯砜（dapsone，DDS）屬砜類化合物，N-乙酰氨苯砜（mono-N-acetyl?dapsone，MADDS）是氨苯砜的主要代謝產物。氨苯砜對麻風桿菌有較強的抑菌作用，是治療各類麻風病的首選藥，大劑量使用時顯示殺菌作用。由于其與磺胺類藥物具有協同增效作用，在動物和水產養殖中曾作為磺胺增效劑使用。然而氨苯砜毒性較大，易發生溶血性貧血與發紺，并可出現高鐵血紅蛋白血癥、肝腎功能損害和精神障礙，我國農業部235號公告明確規定禁止以任何用途將氨苯砜用于食品動物，在動物性食品中不得檢出；歐盟2377/90也明確規定氨苯砜為禁用藥物。

目前國內外關于氨苯砜藥物殘留的檢測報道較少，多與磺胺類藥物同時檢測，方法包括高效液相色譜法和液質聯用法，這些方法靈敏、準確，特異性強、分離度好，可以同時測定多種藥物，但需要昂貴的儀器、樣品的前處理復雜、繁瑣費時、檢測的成本較高，不能現場操作，而且需專業人員操作，所以限制了其應用；與之相比，酶聯免疫方法具有特異性好、靈敏度高、操作簡便、檢測成本低、適合于批量樣品的篩選檢測等優點，而且所需設備少，操作簡單易學，成本低廉，能夠更好地滿足我國畜禽養殖戶、屠宰場、食品企業、政府職能監管部門等開展檢測工作。

實用新型內容

本實用新型所要解決的問題是提供一種小巧輕便的氨苯砜殘留量檢測試劑盒，其操作簡便，檢測快速、準確、靈敏度高，成本低，穩定性好，需要的技術含量不高，可進行一次連續多個樣品中氨苯砜殘留量的測定，減少了檢測樣本所需要的時間。

本實用新型的技術方案是：一種氨苯砜ELISA檢測試劑盒，包括盒體和盒內的一塊96孔的酶標板、一張蓋板膜、14瓶試劑和放試劑的下凹瓶位、一個自封袋、一份說明書和一份質檢報告，其特征在于：酶標板是采用96孔試劑板作為固相載體，在試劑盒微孔條上預包被氨苯砜偶聯抗原制成的檢測板，14瓶試劑分別為7瓶標準品溶液、酶標二抗、抗體工作液、顯色液A液、顯色液B液、終止液、濃縮洗滌液、濃縮復溶液，下凹瓶位共15個。

酶標板由外框支撐架及放置其上的可拆的12條酶標反應微孔條組成，每個可拆裝的酶標反應微孔條有8個反應孔，放入真空鋁箔袋中，盒體為硬紙盒，下凹瓶位由塑料泡沫制成，以塑料硬膜為蓋板膜，蓋板膜大小與酶標板橫切面大小一致，將14瓶試劑用不同大小、不同顏色的塑料瓶盛裝并固定在下凹瓶位中，與酶標板、蓋板膜、自封袋、說明書、質控報告一同封裝在硬紙盒內，以便于攜帶和運輸。14瓶試劑分別為7瓶1ml梯度濃度的標準品溶液、7ml酶標二抗、7ml抗體工作液、7ml顯色液A液、7ml顯色液B液、7ml終止液、40ml濃縮洗滌液、50ml濃縮復溶液。每一個試劑盒中的試劑足夠進行96次測定（包括標準分析孔），既可進行一次連續多個樣品的檢測，也可以將板孔拆開多次檢測。將剩下的放回鋁箔袋中用自封袋密封，這樣可以保證試劑盒檢測結果的準確性。檢測時，樣本中的殘留物（氨苯砜）將和酶標板微孔條上預包被的氨苯砜偶聯抗原競爭抗氨苯砜的抗體，加入酶標二抗后，用顯色液顯色，樣本吸光度值與所含殘留物（氨苯砜）的含量成負相關，與標準曲線比較再乘以其對應的稀釋倍數，即可得出樣品中氨苯砜的殘留量，其操作簡便易行。

經實驗表明本試劑盒具有很高的靈敏度：雞肉、豬肉樣本的最低檢測限為0.2μg/kg；雞蛋、蜂蜜樣本的最低檢測限為2μg/kg；牛奶樣本的最低檢測限為0.6μg/L。雞肉、豬肉樣本的回收率為85%±15%；雞蛋、蜂蜜樣本的回收率為95%±15%；牛奶樣本的回收率為90%±15%。相對于其他氨苯砜檢測方法，本試劑盒所需儀器較少，只需要酶標儀、均質器、渦旋儀、離心機和微量加樣器等，同類實驗室一般均有配備，所需成本較低。

本實用新型的有益效果是：能快速、簡便、靈敏、準確地用于動物源性食品中氨苯砜殘留量的檢測。

附圖說明

圖1為本實用新型酶標板的側面縱剖面圖（長為8.55cm）；

圖2為本實用新型酶標板的側面橫剖面圖（長為12.8cm）；

圖3為本實用新型酶標板的俯視圖；

圖4為本實用新型蓋板膜平面圖；

圖5為本實用新型試劑瓶縱剖面平面圖；

圖6為本實用新型固定泡沫模具的俯視圖；