[實用新型]一種胃蛋白酶原Ⅰ光激發化學發光檢測試劑盒

有效

• 申請號: 201220219692.5
• 申請日: 2012-05-16
• 公開（公告）號: CN202583209U
• 公開（公告）日: 2012-12-05
• 發明（設計）人: 黃飚;張藝;張玨;周彬;王柯;朱嵐
• 申請（專利權）人: 江蘇省原子醫學研究所;無錫市江原實業技貿總公司
• 主分類號: G01N33/577
• 分類號: G01N33/577;G01N21/76
• 代理公司: 無錫市大為專利商標事務所 32104
• 代理人: 時旭丹;劉品超

技術領域

本實用新型涉及一種血清（血漿）中胃蛋白酶原Ⅰ檢測試劑盒，屬于體外試劑診斷領域中血清（漿）抗原檢測方法，運用了光激發化學發光技術，用于實施疾病診斷和治療方法的儀器或裝置，屬于光激發化學發光免疫分析技術領域。

背景技術

胃蛋白酶原Ⅰ（簡稱PGⅠ）是反映胃部狀態的功能性指標——胃蛋白酶無活性前體，PGⅠ由胃底腺的主細胞、頸黏液細胞分泌，大部分進入胃腔，少量進入血液循環，而胃是PGⅠ的唯一來源，因此PGⅠ水平的變化可以反映胃粘膜狀態和細胞數量的改變。

國內外臨床研究指出，PGⅠ升高，提示胃黏膜破損可能性高，患胃潰瘍、胃炎的風險增加；PGⅠ降低，則患有萎縮性胃炎的可能性明顯增加，甚至有患胃癌的風險。測定PGⅠ含量有助檢測出胃潰瘍、萎縮性胃炎、胃炎、胃癌等其他消化道疾病，供臨床檢測和體檢篩查需求。

國內外學者對胃癌患者的血清PG變化作了大量研究指出：胃癌患者的血清PG含量急劇降低，低分化癌患者PGⅠ含量更低于分化較高的胃癌患者；有數據顯示，在被確診的胃癌患者中，檢測他們幾年前的血樣品可以發現，1/3的患者在當時還健康的情況下血清PG水平已經降低；PGⅠ與PGⅠ/PGⅡ比值并聯使用靈敏度高，可有效應用于胃癌高發區人群的初步篩查。因此，PG檢測被稱為胃部的“血清學活檢”，作為非侵入性方法，降低患者痛苦，簡便、經濟，具有普查價值。

在人群胃病篩查中，每個人做胃鏡是不現實的，可通過非侵入性血清PG檢測將淺表性胃炎、糜爛性胃炎、胃潰瘍、十二指腸潰瘍、胃癌等高危人群篩查出來，再進行胃鏡檢查是一種切實可行的方案。

光激發化學發光免疫分析技術是以納米級高分子微粒為基礎的新一代化學發光免疫技術，該項技術前景廣闊，將被廣泛地應用于研究生物分子的相互作用。又稱為AlphaLISA分析法，被譽為免洗的ELISA。其主要原理是由光激發產生的均相化學發光技術，它具有快速、均相（免洗）、高靈敏、量程寬和操作簡便的特點。該試劑由含有感光化合物的感光微粒和含有發光化合物的發光微粒組成，微粒直徑約188nm，表面覆蓋多糖水凝膠。水凝膠能減少非特異性結合，同時，增加微粒的懸浮性。微粒通過水凝膠表面的功能團與生物分子共價連接。納米級微粒大大增加了反應的表面積，每個微粒表面覆蓋著成百上千個生物分子，可捕獲目標分子。

該技術的核心原理是單線態氧的產生和傳遞。在受到紅色激光（680nm）照射后，感光微粒能使周圍環境中的氧轉化為單線態氧，單線態氧的生存時間僅為4微秒。短暫的生存時間決定了單線態氧的傳播直徑很小（約為200nm）。如果發光微粒在200nm范圍之內就能接受單線態氧，并發出高能級的光（520nm-620nm）。反之，單線態氧就會回落到基態氧而沒有信號產生。這種依賴于兩種微粒相互接近的化學能量傳遞是均相反應的基礎。通常在該反應體系中，微粒的濃度是很低的。兩種微粒相互隨機碰撞的幾率很低，因此，反應體系的本底非常微弱。如果包被在微粒表面的生物分子相互作用，拉近了兩個微粒的距離，例如形成免疫夾心或受體-配體復合物，這樣就能產生能量的有效傳遞并發出光信號。

生物素-鏈霉親和素與免疫分析試劑偶聯起來，可大大提高免疫分析的測定靈敏度：因為鏈霉親和素與生物素之間極高的親和力，使反應結合更牢固穩定，而且特異性高；每個鏈霉親和素（親和素）可結合4個生物素，可使反應明顯放大、減少反應中的空間位阻。

實用新型內容

本實用新型目的是：提供一種新型的PGⅠ光激發化學發光檢測試劑盒，運用生物素-鏈霉親和素（包括親和素）的放大效應和先進的光激發化學發光檢測技術，將雙抗夾心法的信號放大，達到高靈敏、特異性好、量程范圍寬、反應時間短的目的。

本實用新型的技術方案：一種胃蛋白酶原Ⅰ的光激發化學發光檢測試劑盒，由白色不透明微孔板（1），胃蛋白酶原Ⅰ標準品（2），連有抗胃蛋白酶原Ⅰ單克隆抗體的發光微粒（3），生物素化抗胃蛋白酶原Ⅰ單克隆抗體溶液（4）和包被有鏈霉親和素的感光微粒（5）組成；胃蛋白酶原Ⅰ標準品濃度范圍0-300ng/mL。

該血清（漿）PGⅠ光激發化學發光檢測試劑盒，試劑盒內設有不透明反應板、抗原標準品、生物素標記抗體、連有PGⅠ抗體的發光微粒，以及，包被有鏈霉親和素的感光微粒試劑，另附操作說明書。