[實(shí)用新型]一種用于原位雜交實(shí)驗(yàn)的試劑盒

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201220106119.3
• 申請(qǐng)日: 2012-03-20
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN202465715U
• 公開(kāi)（公告）日: 2012-10-03
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 倪華;侯曉明
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 東北農(nóng)業(yè)大學(xué)
• 主分類號(hào): C12Q1/68
• 分類號(hào): C12Q1/68
• 代理公司: 哈爾濱市松花江專利商標(biāo)事務(wù)所 23109
• 代理人: 楊立超

技術(shù)領(lǐng)域

本實(shí)用新型涉及一種試劑盒，具體涉及一種用于原位雜交實(shí)驗(yàn)的試劑盒。

背景技術(shù)

原位雜交是指將特定標(biāo)記的已知順序核酸為探針與細(xì)胞或組織切片中核酸進(jìn)行雜交，從而對(duì)特定核酸順序進(jìn)行精確定量定位的過(guò)程。原位雜交可以在細(xì)胞標(biāo)本或組織標(biāo)本上進(jìn)行。目前，在進(jìn)行原位雜交實(shí)驗(yàn)時(shí)，需要進(jìn)行試劑的配制和準(zhǔn)備，對(duì)于實(shí)驗(yàn)人員來(lái)說(shuō)配制和準(zhǔn)備試劑增加了實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的復(fù)雜性，并且因?yàn)橹谱鲗?shí)驗(yàn)試劑的過(guò)程中，實(shí)驗(yàn)人員的熟練程度和認(rèn)知水平的不同，可能配制出的試劑也并不相同，從而不能保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的穩(wěn)定性和可靠性。

實(shí)用新型內(nèi)容

本實(shí)用新型為解決進(jìn)行原位雜交實(shí)驗(yàn)時(shí)，由于實(shí)驗(yàn)人員的熟練程度和認(rèn)知水平的不同，導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果的穩(wěn)定性和可靠性不能得到保證的問(wèn)題，進(jìn)而提出一種用于原位雜交實(shí)驗(yàn)的試劑盒。

本實(shí)用新型為解決上述問(wèn)題采取的技術(shù)方案是：本實(shí)用新型包括去核糖核酸酶試劑瓶、4％多聚甲醛固定液試劑瓶、1％Trion-X100溶液試劑瓶、預(yù)雜交液試劑瓶、雜交液試劑瓶、第一甲酰胺溶液試劑瓶、第二甲酰胺溶液試劑瓶、第一緩沖液試劑瓶、第二緩沖液試劑瓶、封閉液試劑瓶、堿性磷酸酶標(biāo)記的抗地高辛抗體試劑瓶、堿性磷酸酶顯色液試劑瓶和盒體，盒體內(nèi)腔的底面設(shè)有十二個(gè)凹槽，十二個(gè)凹槽呈矩形矩陣狀設(shè)置，去核糖核酸酶試劑瓶、4％多聚甲醛固定液試劑瓶、1％Trion-X100溶液試劑瓶、預(yù)雜交液試劑瓶、雜交液試劑瓶、第一甲酰胺溶液試劑瓶、第二甲酰胺溶液試劑瓶、第一緩沖液試劑瓶、第二緩沖液試劑瓶、封閉液試劑瓶、堿性磷酸酶標(biāo)記的抗地高辛抗體試劑瓶、堿性磷酸酶顯色液試劑瓶的底部可分別各對(duì)應(yīng)插裝在一個(gè)凹槽內(nèi)。

本實(shí)用新型的有益效果是：本實(shí)用新型使原位雜交實(shí)驗(yàn)中的試劑能夠快捷、穩(wěn)定地進(jìn)行原位雜交實(shí)驗(yàn)；使用本實(shí)用新型進(jìn)行原位雜交實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)效率高、實(shí)驗(yàn)結(jié)果穩(wěn)定、操作簡(jiǎn)便快速；本實(shí)用新型結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，制備成本低，適合實(shí)驗(yàn)室中使用，提高了原位雜交實(shí)驗(yàn)結(jié)構(gòu)的可靠性和穩(wěn)定性。

附圖說(shuō)明

圖1是本實(shí)用新型的整體結(jié)構(gòu)示意圖，圖2是盒體底部的俯視圖。

具體實(shí)施方式

具體實(shí)施方式一：結(jié)合圖1和圖2說(shuō)明本實(shí)施方式，本實(shí)施方式所述一種用于原位雜交實(shí)驗(yàn)的試劑盒包括去核糖核酸酶試劑瓶1、4％多聚甲醛固定液試劑瓶2、1％Trion-X100溶液試劑瓶3、預(yù)雜交液試劑瓶4、雜交液試劑瓶5、第一甲酰胺溶液試劑瓶6、第二甲酰胺溶液試劑瓶7、第一緩沖液試劑瓶8、第二緩沖液試劑瓶9、封閉液試劑瓶10、堿性磷酸酶標(biāo)記的抗地高辛抗體試劑瓶11、堿性磷酸酶顯色液試劑瓶12和盒體13，盒體13內(nèi)腔的底面設(shè)有十二個(gè)凹槽13-1，十二個(gè)凹槽13-1呈矩形矩陣狀設(shè)置，去核糖核酸酶試劑瓶1、4％多聚甲醛固定液試劑瓶2、1％Trion-X100溶液試劑瓶3、預(yù)雜交液試劑瓶4、雜交液試劑瓶5、第一甲酰胺溶液試劑瓶6、第二甲酰胺溶液試劑瓶7、第一緩沖液試劑瓶8、第二緩沖液試劑瓶9、封閉液試劑瓶10、堿性磷酸酶標(biāo)記的抗地高辛抗體試劑瓶11、堿性磷酸酶顯色液試劑瓶12的底部可分別各對(duì)應(yīng)插裝在一個(gè)凹槽13-1內(nèi)。

具體實(shí)施方式二：結(jié)合圖1說(shuō)明本實(shí)施方式，本實(shí)施方式所述一種用于原位雜交實(shí)驗(yàn)的試劑盒的盒體13的長(zhǎng)度L為25cm，盒體13的寬度W為10cm，盒體13的高度H為15cm。其它組成及連接關(guān)系與具體實(shí)施方式一相同。

工作原理

利用本實(shí)用新型進(jìn)行原位雜交實(shí)驗(yàn)的操作步驟如下：

步驟一、制作的組織切片在4％多聚甲醛固定液試劑瓶2中的溶液固定一小時(shí)；

步驟二、切片用核糖核酸酶清洗液試劑瓶1的溶液清洗兩次，每次五分鐘；

步驟三、切片用1％Trion-X100溶液試劑瓶3中的溶液處理二十分鐘；

步驟四、切片用核糖核酸酶清洗液試劑瓶1中的溶液清洗三次，每次五分鐘；

步驟五、每張切片加預(yù)雜交液試劑瓶4中預(yù)雜交液200μl，放在濕盒內(nèi)，室溫放置十五分鐘；

步驟六、雜交探針85℃變性三分鐘后置冰水混合物中驟冷，按1∶100濃度與雜交液試劑瓶5中的雜交液混合，每張片子上加100μl混合好的雜交液，55℃雜交過(guò)夜；

步驟七、雜交后，在55℃條件下，用第一甲酰胺溶液試劑瓶6中的溶液清洗十五分鐘，然后用第二甲酰胺溶液試劑瓶7中的溶液清洗兩次，每次三十分鐘；

步驟八、用第一緩沖液試劑瓶8中的溶液平衡五分鐘，25℃條件下用封閉液試劑瓶10中的封閉液封閉一小時(shí)；

步驟九、加堿性磷酸酶標(biāo)記的抗地高辛抗體試劑瓶11中的抗體，4℃孵育過(guò)夜；