[實用新型]組合式抗蟲BT蛋白金標快速檢測試劑盒

有效

• 申請號: 201220069968.6
• 申請日: 2012-02-28
• 公開（公告）號: CN202676705U
• 公開（公告）日: 2013-01-16
• 發明（設計）人: 張維;陳明;滕超;劉奇;林敏
• 申請（專利權）人: 中國農業科學院生物技術研究所
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68
• 代理公司: 北京海虹嘉誠知識產權代理有限公司 11129
• 代理人: 張濤

技術領域：

本實用新型涉及組合式抗蟲BT蛋白金標快速檢測試劑盒。

背景技術：

在轉基因植物的研制開發或在對轉基因產品進行篩選或安全性評價時，往往需要對轉入的外源性基因進行定性或半定量測定。有時還需要對多種外源性基因進行同時檢測。

蘇云金芽孢桿菌(BT)具有廣泛的殺蟲活性，目前已發現了800多種殺蟲晶體蛋白。隨著DNA重組技術的發展，將Bt殺蟲晶體蛋白基因導入其他微生物或植物中，構建可產生殺蟲蛋白的工程菌株或抗蟲轉基因植物成為研究的主要方向(Barton，et?al.1987；Fischhoff?et?al.1987；Vaeck，et?al.1987；Perlak，et?al.1990)。大約近20種Bt殺蟲晶體蛋白基因已轉入不同植物。1987年首批轉Bt?cry基因的抗蟲煙草和番茄問世(Barton，et?al.1987；Fischhoff，et?al.1987；Vaeck，et?al.1987)。1996年轉Bt基因棉花、玉米及馬鈴薯在美國被批準商品化種植(Peferoen?1997)，這標志著蘇云金桿菌殺蟲晶體蛋白的應用進入新的產業化階段。但這些BT殺蟲晶體蛋白的氨基酸序列差異很大，例如Cry1AC與Cry2AB的同源性為45％；Cry1Aa與Cry3A的同源性只有25-30％等等(Li?et?al.，1991；Grochulski?et?al.，1995)。

現有的檢測裝置，如酶免、放免等方法的裝置，受儀器(酶標儀、放免閃爍儀、離心機等)、場地等因素的限制，而且檢測時間長(酶免檢測時間需20hr、放免需30min～1hr)，檢測成本較高，很難推廣應用。以往試紙條檢測的方法雖可部分克服以上不足(如美國EnviroLogix?Incorporated，Strategic?Diagnostics，Inc.和北京奧創金標生物技術有限公司生產的試紙條)，但每種試紙條只能檢測轉基因作物中單一的外源基因，實際操作中容易產生錯誤結果。例如：如果檢測者僅有Bt?Cry1Ac檢測試紙條，而檢測對象中并未轉入BT?cry1Ac基因，而是轉入Bt?cry?2ab等基因，那么很可能會得出檢測對象不存在外源基因的錯誤結果，造成不必要的損失。

因此，實踐中迫切需要有一種可同時檢測轉基因植物中的不同Bt晶體蛋白，且操作簡便、結果準確可靠、快速的裝置。

實用新型內容：

本實用新型的目的是建立一種操作簡便、結果準確可靠、快速，可同時檢測多種轉Bt基因成分的組合式試劑盒。

本實用新型的技術方案是這樣的：

一種組合式抗蟲BT蛋白金標快速檢測試劑盒，包括底板、上蓋，底板蓋入上蓋后組成試劑盒；其特征是底板上放置有測試帶；上蓋設置有觀測窗和加樣孔；

所述底板的上表面設置有4～8個可嵌入一條測試帶的凹槽；

所述測試帶數量是4～8條；所述觀測窗和加樣孔的數量分別是4～8個。

所述底板或上蓋可具有卡槽，以保證底板與上蓋扣緊。

所述觀測窗優選是長方形。

試劑盒的形狀是扁平的扇面形盒。

在本實用新型的一個實例中，可以同時檢測6種轉Bt基因成分，在底板內可置6條不同的測試帶，且上蓋設置相應數量的觀測窗和加樣孔。

所述底板內的6條測試帶，第一條用于檢測BT-Cry?1Ac蛋白，第二條用于檢測BT-Cry1Ah蛋白，第三條用于檢測BT-Cry?2AB蛋白，第四條用于檢測BT-Cry?9C蛋白，第五條用于檢測BT-Cry?3A蛋白，第六條用于檢測BT-Cry?1Aa蛋白。所述測試帶是一種具有檢測系統主體膜反應體系功能的檢測材料，由高分子纖維膜、塑料等多層材料制成。六種蛋白的測試帶均可分為質控區和檢測區，質控區可包被羊抗鼠IgG或兔抗鼠IgG多克隆抗體；BT-Cry?1Ac蛋白測試帶的樣品檢測區包被BT-Cry?1Ac的單克隆抗體或多克隆抗體；BT-Cry1Ah蛋白測試帶的樣品檢測區包被BT-Cry?1Ah的單克隆抗體或多克隆抗體；BT-Cry?2AB蛋白測試帶的樣品檢測區包被BT-Cry?2AB的單克隆抗體或多克隆抗體；BT-Cry?9C蛋白測試帶的樣品檢測區包被BT-Cry?9C的單克隆抗體或多克隆抗體；BT-Cry?3A蛋白測試帶的樣品檢測區包被BT-Cry?3A的單克隆抗體或多克隆抗體；BT-Cry?1Aa蛋白測試帶的樣品檢測區包被BT-Cry?1Aa的單克隆抗體或多克隆抗體。