[發明專利]一種蒲公英總黃酮的分離純化方法

有效

• 申請號: 201210595305.2
• 申請日: 2012-12-13
• 公開（公告）號: CN103070899A
• 公開（公告）日: 2013-05-01
• 發明（設計）人: 姚德坤;姚德利;張亞紅;姚航;黃運生;吳海龍
• 申請（專利權）人: 大興安嶺林格貝有機食品有限責任公司
• 主分類號: A61K36/288
• 分類號: A61K36/288;B01D15/10;A61P31/00;A61P29/00;A61P7/10;A61P15/14;A61P31/06;A61P17/00;A61P11/04;A61P11/00;A61P1/00;A61P27/02;A61P13/00
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• 代理人: 暫無信息

1.一種蒲公英總黃酮的分離純化方法，其特征在于該方法包括如下步驟：

將蒲公英全草粉碎成粗粉，加入機粉質量15～20倍量的85％～100％甲醇回流提取120～180分鐘，濾過；濾液回收甲醇后濃縮至3～5波美得濃縮液，然后用體積比1∶1的鹽酸∶水溶液將濃縮液pH值調至2.5～3，放置20～40分鐘后濾過；濾液上HPD400、HPD100、DM-130或AB-8廣譜型大孔樹脂吸附柱，吸附完畢用水洗雜質，再用5％～20％的甲醇洗雜質，然后用50％～80％的甲醇洗脫，得總黃酮半成品洗脫液，總黃酮半成品洗脫液回收甲醇后濃縮干燥得總黃酮半成品；將所得總黃酮半成品上硅膠層析柱，并用丙酮甲醇的體積比為1～3∶1的丙酮與甲醇混合物洗雜質，然后用丙酮∶甲醇的體積比為5～7∶1的丙酮與甲醇混合物洗脫，得總黃酮洗脫液；將總黃酮洗脫液進行精制得蒲公英總黃酮。

2.如權利要求1所述的蒲公英總黃酮的分離純化方法，其特征在于該方法包括如下步驟：

稱取粉碎成粗粉的蒲公英全草，加入粗粉質量20倍量的85％甲醇回流提取180分鐘，濾過；濾液回收甲醇后濃縮至5波美得濃縮液，然后用體積比1∶1的鹽酸∶水溶液將濃縮液pH值調至3，放置40分鐘后濾過；濾液上HPD400型大孔樹脂吸附柱，吸附完畢用水洗雜質，再用5％的甲醇洗雜質，然后用50％的甲醇洗脫，得總黃酮半成品洗脫液，總黃酮半成品洗脫液回收甲醇后濃縮干燥得總黃酮半成品；將所得總黃酮半成品上硅膠層析柱，并用丙酮∶甲醇的體積比為1∶1的丙酮與甲醇混合物洗雜質，然后用丙酮∶甲醇的體積比為5∶1的丙酮與甲醇混合物洗脫，得總黃酮洗脫液；將總黃酮洗脫液進行精制得蒲公英總黃酮。

3.如權利要求1或2所述的蒲公英總黃酮的分離純化方法，其特征在于該方法中所述大孔樹脂吸附步驟采用濕法裝柱，保留液面，將調pH值后的濾液通過吸附柱，流速每分鐘0.05ml/g樹脂。

4.如權利要求1或2所述的蒲公英總黃酮的分離純化方法，其特征在于該方法中所述硅膠層析步驟采用濕法裝柱，保留液面，將半成品按重量1∶1拌活化后硅膠，并將拌好的混合物至于硅膠柱上方，洗脫流速每分鐘0.1ml/g硅膠。硅膠活化條件為，110攝氏度30分鐘。

5.如權利要求1或2所述的蒲公英總黃酮的分離純化方法，其特征在于該方法中采用活性炭脫色、重結晶方法進行精制，按4g/100ml總黃酮洗脫液加入針劑活性炭，25～40攝氏度攪拌20～40分鐘，濾過；濾液回收混合試劑后濃縮干燥得中間體；中間體用7～9倍甲醇40攝氏度熱溶，濾過：濾液放涼析出晶體，抽濾得蒲公英總黃酮成品。

6.如權利要求5所述的蒲公英總黃酮的分離純化方法，其特征在于該方法中精制過程包括如下步驟：

按4g/100ml洗脫液加入針劑活性炭，25攝氏度攪拌40分鐘，濾過；濾液，回收混合試劑，濃縮干燥得中間體；中間體用9倍甲醇40攝氏度熱溶，濾過：濾液放涼析出晶體，抽濾得蒲公英總黃酮成品。

7.如權利要求6所述的蒲公英總黃酮的分離純化方法，其特征在于該方法中成品用7倍甲醇重結晶，過濾母液，回收甲醇，濃縮干燥得總黃酮半成品。