[發(fā)明專利]一種預測前列腺癌易感性的方法和檢測試劑

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210595239.9
• 申請日: 2012-12-31
• 公開（公告）號: CN103205487A
• 公開（公告）日: 2013-07-17
• 發(fā)明（設計）人: 楊澤;劉銘;王建業(yè);史曉紅;魏東;朱小泉;楊帆;張耀光;梁思穎;唐雷;孫亮
• 申請（專利權）人: 衛(wèi)生部北京醫(yī)院
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;C12N15/11;A61K48/00;A61P35/00
• 代理公司: 北京正理專利代理有限公司 11257
• 代理人: 李欣

技術領域

本發(fā)明涉及一種預測前列腺癌易感性的方法和檢測試劑，更具體的說是通過測定與前列腺癌相關基因GPRC6A的3’端附近rs600928位點多態(tài)性預測受試者對于前列腺癌的易感性，該方法可用于疾病的輔助診斷和新藥開發(fā)，屬于生物技術領域。

背景技術

前列腺癌(prostate?cancer，PCa)是發(fā)生在男性生殖系統(tǒng)中最常見的惡性腫瘤。美國在對1975-2006癌癥發(fā)病率進行統(tǒng)計后，估算2010年PCa新發(fā)病例為217，730例，位居男性好發(fā)腫瘤中第一位，PCa的死亡人數(shù)估計為32，050，在男性腫瘤死亡率中位居第二。年齡是PCa的一個重要風險因素，年齡45歲以下的基本很少發(fā)病，隨年齡的增長而增加。美國癌癥協(xié)會統(tǒng)計，40歲以下的男性PCa發(fā)病率為1/8499，40-59歲男性中為1/38，60-69歲男性中為1/15，70歲以上男性中則為1/8。隨著我們國家人口老齡化，PCa的發(fā)病率在我國正逐年上升，上海標化發(fā)病率從1973～1975年的1.8/10萬上升至1997～1999年的5.5/10萬(劉振偉，項永兵，張薇.上海市區(qū)1973～1999年PCa發(fā)病趨勢分析.中國衛(wèi)生統(tǒng)計，2003，20(6)：335-337.)，貴州省南部地區(qū)部分縣市PCa的發(fā)病率已從1994～1998年的1.72/10萬上升到2004～2008年的4.28/10萬，成為威脅我國男性健康的公共問題(黃桂軍，蘭澤軍，權新.貴州省南部地區(qū)部分縣市1994～2008年PCa發(fā)病趨勢研究.現(xiàn)代預防醫(yī)學，2011，37(116)：3012-3017.)。

目前進行PCa遺傳病因研究，多采用大規(guī)模全基因組關聯(lián)研究(Genome-WideAssociation?Studies，GWAS)和小樣本多人群中的驗證，證明了SNPs作為基因組標志的關聯(lián)分析方法在PCa遺傳研究中的有效性。SNPs是指染色體基因組水平上單個核苷酸變異引起的DNA序列多態(tài)性，在人群中的頻率需＞1％，SNPs是雙等位基因標記，這種單堿基變化中有70.1％為同型堿基之間的轉換：如G/A或T/C，29.1％為發(fā)生在嘌呤和嘧啶之間的顛換。C(胞嘧啶)是人類基因組中最易發(fā)生變化的位點，因為大多數(shù)是甲基化胞嘧啶，能夠自發(fā)脫氨基轉換為T(胸腺嘧啶)，SNPs包含了已知多態(tài)性的80-90％，是最常見的遺傳變異。

由于生存的選擇壓力導致SNP在單一基因和整個基因組中的分布呈不均勻性。SNPs在基因非編碼區(qū)的數(shù)量是編碼區(qū)的4倍，總數(shù)可達3百萬個。SNPs以其密度高(平均每1kb就有1個)、代表性強(位于基因內(nèi)部的SNPs可能直接影響蛋白質結構或表達水平)、遺傳穩(wěn)定性好(同微衛(wèi)星多態(tài)性比較而言)、易于自動化分析(因SNPs在人群中為雙等位基因標記，可簡單以“+/-或1/0”直接分型)等特點成為很好的遺傳標志。

GPRC6A(G蛋白偶聯(lián)受體C家族6組A亞型)(G?protein-coupled?receptor，familyC，group?6，member?A，GPRC6A)基因是Wellendorph?P等在2004年發(fā)現(xiàn)提出的，編碼G蛋白偶聯(lián)受體C家族6組A成員，G蛋白偶聯(lián)受體(G?protein-coupled?receptors，GPCRs)是一類有7次跨膜區(qū)域，是人類基因組上由約近千個基因編碼的大的受體家族，在許多生理病理進程包括發(fā)育、造血、血管生成、炎癥、精神障礙、代謝疾病及病毒感染等中起重要作用。研究表明許多GPCRs和他們的配體參與腫瘤發(fā)生發(fā)展，如內(nèi)皮縮血管肽類通過與GPCRs相互作用介導組織分化、發(fā)育和細胞增殖，通過增強細胞增殖抑制凋亡和調節(jié)基質成分在PCa和其他腫瘤中起重要作用。許多趨化因子受體如CXCR4、CXCR2、CCR7等在許多腫瘤表達上調，在腫瘤生長、侵襲和轉移中起重要作用。許多被稱為內(nèi)皮分化基因家族的GPCRs是溶血磷脂酸或鞘氨醇-1-磷酸鹽的受體，調節(jié)細胞的增殖、遷移和生存。如肺腺癌或肺腺癌3期時許多化學因子受體、神經(jīng)肽受體、激素受體等：PAR2(GPR11)、Edg2(GPR2)等GPCRs表達上調；乳腺癌或乳腺癌3期時PAR2和CXCR-4表達增加；PCa時CXCR-3、GPR68等在PCa組織表達高于正常前列腺組織，其他腫瘤胃癌、轉移黑色素瘤等的發(fā)展中也有多種GPCRs參與。

據(jù)估計，市場上接近30％的藥物靶標是GPCRs或者與其相關的信號通路，其研發(fā)依據(jù)部分為許多疾病與GPCRs的變異和多態(tài)性關聯(lián)，因此研究GPCRs與腫瘤包括GPCRs的多態(tài)性與腫瘤的關聯(lián)可以為以干擾GPCRs或其介導的信號通路為基礎的藥物研發(fā)提供理論依據(jù)。