[發(fā)明專利]一種支原體培養(yǎng)基

無效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201210595179.0
• 申請(qǐng)日: 2012-12-24
• 公開（公告）號(hào): CN103789393A
• 公開（公告）日: 2014-05-14
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 郭三保
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 郭三保
• 主分類號(hào): C12Q1/04
• 分類號(hào): C12Q1/04;C12R1/35
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及檢驗(yàn)口腔微生物培養(yǎng)領(lǐng)域，具體涉及一種支原體培養(yǎng)基。

背景技術(shù)

非淋球菌性尿道炎(nongonococcal?urethritis，NGU)在性傳播疾病(sexuallytransmitted?disease，STD)中所占的比例逐年升高，無論是國外還是國內(nèi)都居于首位，而解尿支原體(ureaplasma?urealyticum，Uu)和人型支原體(Mycoplasmahominis，Mh)是NGU的主要病原體。因此，準(zhǔn)確有效地檢測(cè)支原體的存在，成為診斷NGU的關(guān)鍵因素之一。Uu和Mh的檢測(cè)目前國內(nèi)大多采用液體培養(yǎng)法，培養(yǎng)基由黃變紅且液體澄清為陽性，不變色或者變色但液體渾濁為陰性。其原理是根據(jù)Uu和Mh分解培養(yǎng)基中的尿素產(chǎn)堿使pH上升，而培養(yǎng)基中的酚紅指示劑在由酸變堿過程中顏色由黃變紅，觀察顏色的變化來判斷陽性。但是能分解尿素的微生物很多，一些細(xì)菌能使顏色變紅造成假陽性，還有一些細(xì)菌和真菌(尤其是白色念珠菌)能使培養(yǎng)基變紅和渾濁，檢驗(yàn)科一般會(huì)判斷陰性，但如果其中同時(shí)有支原體生長(zhǎng)，由于渾濁就會(huì)造成假陰性的判斷。前國內(nèi)商品化的支原體培養(yǎng)基(包括液體和固體)一般添加青霉素類和多粘菌素，青霉素對(duì)大多數(shù)革蘭陽性球菌的作用較強(qiáng)，對(duì)腸球菌作用較差，多粘菌素為多肽類抗生素，對(duì)綠膿桿菌等革蘭氏陰性桿菌作用強(qiáng)大，但對(duì)G-球菌和G+細(xì)菌均無作用，這兩種對(duì)真菌都無抑制作用。所以，如果標(biāo)本中有混合真菌感染，污染少量則僅變紅而不造成沉淀，可能形成假陽性的判斷；污染量多有沉淀和渾濁，可能形成假陰性的判斷。在固體培養(yǎng)基上，真菌菌落的生長(zhǎng)，會(huì)掩蓋支原體生長(zhǎng)的瓊脂表面，使不能觀察到支原體的典型菌落。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的技術(shù)任務(wù)是針對(duì)以上現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種適合于支原體生長(zhǎng)的培養(yǎng)基，降低檢驗(yàn)結(jié)果的假陽性和假陰性發(fā)生率。

本發(fā)明解決其技術(shù)問題的技術(shù)方案是：一種支原體培養(yǎng)基，其特征在，配制1000ml培養(yǎng)基的配方中含有：蛋白胨15g；牛心浸粉8g；酵母浸粉5g；苯酚紅20mg；氯化鈉5.2g；L-精氨酸0.5g；氟康唑30mg；紫番荔枝素2mg；無菌綿羊血200ml；蒸餾水加至1000ml。

優(yōu)化方案中，每1000ml培養(yǎng)基還含有京尼平酸2mg。

優(yōu)化方案中，每1000ml培養(yǎng)基還含有濃度200g/L的功勞木水煮液200ml。

以上各方案的固體培養(yǎng)基配方中，每1000ml培養(yǎng)基還含有瓊脂15g。

其中所述的蛋白胨提供碳氮源和能量；牛心浸粉含有各種多肽、脂肪、生長(zhǎng)因子、激素等，這些物質(zhì)對(duì)促進(jìn)支原體的繁殖和生長(zhǎng)都是很重要的因素；酵母浸粉提供支原體生長(zhǎng)所需的維生素B族；氯化鈉維持均衡的滲透壓，且由于支原體較其他的細(xì)菌更為耐受高滲環(huán)境，所以氯化鈉水平適當(dāng)?shù)奶岣哌€有利于抑制其他細(xì)菌生長(zhǎng)；瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑；無菌綿羊血提供能量環(huán)境；L-精氨酸屬氨基酸類，為營養(yǎng)劑；苯酚紅為指示劑；氟康唑可以有效的抑制白色念珠菌在其中的生長(zhǎng)；紫番荔枝素有抑制白假絲酵母的真菌作用，且還有一定的細(xì)胞毒作用，2mg/L的濃度可以有效的抑制雜菌成長(zhǎng)，較普通支原體培養(yǎng)集中使用的高毒醋酸鉈安全。京尼平酸能廣泛抑制革蘭氏陰、陽性菌的生長(zhǎng)。功勞木為小檗科植物闊葉十大功勞、細(xì)葉十大功勞的莖或莖皮，現(xiàn)代研究表明，功勞木水煎劑在體外對(duì)金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、綠膿桿菌和白色念珠菌均有抑制作用。

本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比較，具有支原體檢出可靠的特點(diǎn)。

具體實(shí)施方式

以下結(jié)合實(shí)際情況，對(duì)本發(fā)明的具體實(shí)施方式作詳細(xì)說明。

實(shí)施例1液體培養(yǎng)基，配制1000ml培養(yǎng)基的配方中含有：蛋白胨15g；牛心浸粉8g；酵母浸粉5g；苯酚紅20mg；氯化鈉5.2g；L-精氨酸0.5g；氟康唑30mg；紫番荔枝素2rng；無菌綿羊血200ml；蒸餾水加至總量為1000ml。同配方中加入瓊脂15g既可以用來制備實(shí)施例2固體培養(yǎng)基。

實(shí)施例3液體培養(yǎng)基，配制1000ml培養(yǎng)基的配方中含有：蛋白胨15g；牛心浸粉8g；酵母浸粉5g；苯酚紅20mg；氯化鈉5.2g；L-精氨酸0.5g；氟康唑30mg；紫番荔枝素2mg；京尼平酸2mg；無菌綿羊血200ml；蒸餾水加至總量為1000ml。同配方中加入瓊脂15g既可以用來制備實(shí)施例4固體培養(yǎng)基。