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[發明專利]一種支原體培養基無效

專利信息
申請號: 201210595177.1 申請日: 2012-12-24
公開(公告)號: CN103789392A 公開(公告)日: 2014-05-14
發明(設計)人: 郭三保 申請(專利權)人: 郭三保
主分類號: C12Q1/04 分類號: C12Q1/04;C12R1/35
代理公司: 暫無信息 代理人: 暫無信息
地址: 032300 山西省*** 國省代碼: 山西;14
權利要求書: 查看更多 說明書: 查看更多
摘要:
搜索關鍵詞: 一種 支原體 培養基
【說明書】:

技術領域

發明涉及檢驗口腔微生物培養領域,具體涉及一種支原體培養基。

背景技術

非淋球菌性尿道炎(nongonococcal?urethritis,NGU)在性傳播疾病(sexuallytransmitted?disease,STD)中所占的比例逐年升高,無論是國外還是國內都居于首位,而解尿支原體(ureaplasma?urealyticum,Uu)和人型支原體(Mycoplasmahominis,Mh)是NGU的主要病原體。因此,準確有效地檢測支原體的存在,成為診斷NGU的關鍵因素之一。Uu和Mh的檢測目前國內大多采用液體培養法,培養基由黃變紅且液體澄清為陽性,不變色或者變色但液體渾濁為陰性。其原理是根據Uu和Mh分解培養基中的尿素產堿使pH上升,而培養基中的酚紅指示劑在由酸變堿過程中顏色由黃變紅,觀察顏色的變化來判斷陽性。但是能分解尿素的微生物很多,一些細菌能使顏色變紅造成假陽性,還有一些細菌和真菌(尤其是白色念珠菌)能使培養基變紅和渾濁,檢驗科一般會判斷陰性,但如果其中同時有支原體生長,由于渾濁就會造成假陰性的判斷。前國內商品化的支原體培養基(包括液體和固體)一般添加青霉素類和多粘菌素,青霉素對大多數革蘭陽性球菌的作用較強,對腸球菌作用較差,多粘菌素為多肽類抗生素,對綠膿桿菌等革蘭氏陰性桿菌作用強大,但對G-球菌和G+細菌均無作用,這兩種對真菌都無抑制作用。所以,如果標本中有混合真菌感染,污染少量則僅變紅而不造成沉淀,可能形成假陽性的判斷;污染量多有沉淀和渾濁,可能形成假陰性的判斷。在固體培養基上,真菌菌落的生長,會掩蓋支原體生長的瓊脂表面,使不能觀察到支原體的典型菌落。

發明內容

本發明的技術任務是針對以上現有技術的不足,提供一種適合于支原體生長的培養基,降低檢驗結果的假陽性和假陰性發生率。

本發明解決其技術問題的技術方案是:一種支原體培養基,其特征在,配制1000ml培養基的配方中含有:蛋白胨15g;牛心浸粉8g;酵母浸粉5g;苯酚紅20mg;氯化鈉5.2g;L-精氨酸0.5g;氟康唑30mg;紫番荔枝素2mg;無菌綿羊血200ml;蒸餾水加至1000ml。

優化方案中,每1000ml培養基還含有京尼平酸2mg。

優化方案中,每1000ml培養基還含有濃度200g/L的功勞木水煮液200ml。

以上各方案的固體培養基配方中,每1000ml培養基還含有瓊脂15g。

其中所述的蛋白胨提供碳氮源和能量;牛心浸粉含有各種多肽、脂肪、生長因子、激素等,這些物質對促進支原體的繁殖和生長都是很重要的因素;酵母浸粉提供支原體生長所需的維生素B族;氯化鈉維持均衡的滲透壓,且由于支原體較其他的細菌更為耐受高滲環境,所以氯化鈉水平適當的提高還有利于抑制其他細菌生長;瓊脂是培養基的凝固劑;無菌綿羊血提供能量環境;L-精氨酸屬氨基酸類,為營養劑;苯酚紅為指示劑;氟康唑可以有效的抑制白色念珠菌在其中的生長;紫番荔枝素有抑制白假絲酵母的真菌作用,且還有一定的細胞毒作用,2mg/L的濃度可以有效的抑制雜菌成長,較普通支原體培養集中使用的高毒醋酸鉈安全。京尼平酸能廣泛抑制革蘭氏陰、陽性菌的生長。功勞木為小檗科植物闊葉十大功勞、細葉十大功勞的莖或莖皮,現代研究表明,功勞木水煎劑在體外對金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、綠膿桿菌和白色念珠菌均有抑制作用。

本發明與現有技術相比較,具有支原體檢出可靠的特點。

具體實施方式

以下結合實際情況,對本發明的具體實施方式作詳細說明。

實施例1液體培養基,配制1000ml培養基的配方中含有:蛋白胨15g;牛心浸粉8g;酵母浸粉5g;苯酚紅20mg;氯化鈉5.2g;L-精氨酸0.5g;氟康唑30mg;紫番荔枝素2mg;無菌綿羊血200ml;蒸餾水加至總量為1000ml。同配方中加入瓊脂15g既可以用來制備實施例2固體培養基。

實施例3液體培養基,配制1000ml培養基的配方中含有:蛋白胨15g;牛心浸粉8g;酵母浸粉5g;苯酚紅20mg;氯化鈉5.2g;L-精氨酸0.5g;氟康唑30mg;紫番荔枝素2mg;京尼平酸2mg;無菌綿羊血200ml;蒸餾水加至總量為1000ml。同配方中加入瓊脂15g既可以用來制備實施例4固體培養基。

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