[發明專利]一種畢赤酵母菌及其在飼料發酵中的應用

無效

• 申請號: 201210594653.8
• 申請日: 2012-12-31
• 公開（公告）號: CN103045493A
• 公開（公告）日: 2013-04-17
• 發明（設計）人: 欒錦濤;陳繼偉;黃玲玲;張盼盼
• 申請（專利權）人: 青島海中大生物科技發展有限公司
• 主分類號: C12N1/16
• 分類號: C12N1/16;A23K1/00;C12R1/84
• 代理公司: 北京眾合誠成知識產權代理有限公司 11246
• 代理人: 龔燮英

技術領域

本發明涉及一種菌株，特別涉及一種用于發酵飼料的畢赤酵母菌。

背景技術

酵母菌是人類利用最早、利用數量最大的一種單細胞微生物，是理想的營養源和食品原料，也是優質蛋白飼料源。酵母菌屬于真核微生物，不是人和動物腸道的固有菌，但可以產生多種消化酶類，可以在消化道內代謝。作為益生菌使用的酵母則是以活細胞的形式，通常為酵母培養物。在飼料工業應用中，目前使用的菌種主要是芽孢桿菌和乳酸菌及其混合物。但存在抗生素的使用受到限制的問題，酵母菌既不會干擾抗生素的作用，又可以增加飼料的穩定性，作為消化劑還有助于提高營養物質的利用，因此酵母菌在飼料工業中有很高的應用價值。

發明內容

針對現有技術中存在的缺陷，本發明的目的在于提供一株用于發酵飼料的畢赤酵母菌。該畢赤酵母（Pichia?jadinii）Hzd-pj-003，已于2012年12月3日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，地址：北京市朝陽區大屯路，中國科學院微生物研究所，保藏號為：CGMCC?No.6930，它可以用在發酵飼料以及微生態制劑，是一種極具應用價值的益生菌。本發明通過試驗表明：畢赤酵母（Pichia?jadinii）Hzd-pj-003可產生多種代謝產物，發酵液具有濃郁的蘋果香氣，從而增加發酵飼料的適口性，提高采食量，其中含多種代謝產物可以促進豬的消化，提高飼料利用率，促進豬的快速生長。

本發明的優勢是：畢赤酵母（Pichia?jadinii）Hzd-pj-003有很強的耐酸性，可以在pH值為2的條件下緩慢生長；可以產生高含量的乙酸乙酯，具有獨特的蘋果香氣，用在發酵飼料中可以增加適口性，提高采食量；用于發酵飼料中使發酵飼料的蛋白含量及水解酶類大大增加，促進動物消化吸收，提高飼料利用率，促進動物生長。

附圖說明

本發明有如下附圖：

圖1　畢赤酵母（Pichia?jadinii）Hzd-pj-003菌落形態照片；

圖2??畢赤酵母（Pichia?jadinii）Hzd-pj-003顯微鏡下形態圖；

圖3??畢赤酵母（Pichia?jadinii）Hzd-pj-003生長曲線圖；

圖4??畢赤酵母（Pichia?jadinii）Hzd-pj-003?26SrDNA?D1/D2區域序列通過BLAST對比構建的系統進化樹；

圖5??畢赤酵母（Pichia?jadinii）Hzd-pj-003?26SrDNA?D1/D2區域電泳圖。

具體實施方式

下述實施例中的方法，如無特別說明，均為常規方法。

實施例1

畢赤酵母（Pichia?jadinii）Hzd-pj-003的獲得及其培養條件檢測

畢赤酵母（Pichia?jadinii）Hzd-pj-003的篩選與鑒定

1）畢赤酵母（Pichia?jadinii）Hzd-pj-003的篩選

從山東平度南村鎮農戶家堆積的陳年花生殼中，選取表面有些發酵跡象的作為樣本，無菌水浸泡，采用梯度稀釋涂平板的分離法，將花生殼溶液梯度稀釋10^-1、10^-2、10^-3、10^-4、10^-5后，各吸取0.1mL涂于PDA培養基上對菌株進行分離，28℃恒溫培養箱中培養2-3?d，挑取PDA培養基上菌落形態為乳白色、光滑、菌落直徑為3～5mm左右的單菌落反復進行劃線分離直至純化，如圖1所示。

所述的PDA培養基配方如下：馬鈴薯200g，葡萄糖20g，瓊脂15～20g，水1000mL。將200g馬鈴薯去皮切碎，煮爛后過濾得到馬鈴薯汁，加入20g葡萄糖，加入瓊脂15～20g，加水至1000mL，121℃滅菌20min。

2）菌種的鑒定

菌株純化后PDA培養基平板上菌落形態為乳白色、光滑、單菌落直徑為3～5mm左右的初篩菌株進行鑒定。

菌株細胞為真核細胞，單個菌體呈橢球狀，從顯微鏡下清晰可見細胞核和液泡，有的處于分裂期細胞有兩個細胞核，有的能看到出芽生殖，如圖2所示。

培養特征

固體培養特征：菌株在28℃培養條件下連續培養2?d，在PDA固體培養基表面形成直徑3-5mm左右的光滑乳白色菌落。

所述的PDA固體培養基配方如下：馬鈴薯200g，葡萄糖20g，瓊脂15～20g，水1000mL。