[發明專利]培養基組合物和培養基及對菌株進行活菌計數的方法

有效

• 申請號: 201210592962.1
• 申請日: 2012-12-31
• 公開（公告）號: CN103911298A
• 公開（公告）日: 2014-07-09
• 發明（設計）人: 梁恒宇;林海龍
• 申請（專利權）人: 中糧營養健康研究院有限公司;中糧集團有限公司
• 主分類號: C12N1/18
• 分類號: C12N1/18;C12Q1/06;C12R1/865
• 代理公司: 北京潤平知識產權代理有限公司 11283
• 代理人: 王鳳桐;周建秋

技術領域

本發明涉及一種培養基組合物和含有該培養基組合物的培養基，以及利用該培養基對菌株進行活菌計數的方法。

背景技術

葡萄酒釀造是一個復雜的微生物學過程，其中酵母菌是占主導地位的微生物。葡萄酒的酒精發酵主要是在釀酒酵母（Saccharomyces?cerevisiae）的作用下，采用自然發酵、純種發酵或混合發酵，將葡萄汁中的營養成分轉化成酒精和其他風味物質的過程。

在葡萄酒釀造過程中，經常采用單一釀酒酵母菌株進行酒精發酵，但是近年來的研究充分表明，不同的釀酒酵母菌株所釀的葡萄酒在風格、品質及色、香和味上均有很大差異，也有越來越多的研究采用不同的釀酒酵母菌株對葡萄酒進行雙菌株混合發酵，以期提高葡萄酒的品質或改良產品風味。在這種混合發酵過程中，為研究釀酒酵母不同菌株之間在數量上的演替關系，就需要在同一葡萄酒發酵體系中對釀酒酵母不同菌株進行活菌計數。但是，長期以來酵母菌的檢測通常使用YEPD培養基、馬鈴薯培養基、麥芽汁培養基、察氏培養基等，這些培養基上生長的酵母菌往往形態極為相似，尤其是在對釀酒酵母進行檢測時，很難對釀酒酵母不同菌株進行準確計數。WL培養基是一種用于酵母菌和細菌計數的培養基，該培養基可以用來檢測并判別一些不同屬種的酵母菌株，但是對于同一屬種的釀酒酵母，即使是不同來源，也不能在一塊培養平板上以菌落形態的不同加以區分。

發明內容

本發明的目的是為了克服現有技術提供的培養基難以實現對釀酒酵母不同菌株同時進行活菌計數的缺陷，提供一種可以對菌株進行活菌計數的培養基組合物、培養基及活菌計數方法。

本發明的發明人發現，在所有的氮源中銨離子是最容易被釀酒酵母利用的氮源，而尿素以及氨基酸，特別是脯氨酸、尿素、亮氨酸、異亮氨酸、精氨酸、甘氨酸等，是釀酒酵母較難利用的氮源。當培養基中存在銨離子時，釀酒酵母優先利用銨離子；當培養基中銨離子的量受限或被消耗殆盡時，不同釀酒酵母菌株利用尿素以及脯氨酸等氨基酸較難利用的氮源的能力有著顯著的差異，在培養基上生長時會顯示出不同的生長速度，致使菌落直徑大小出現差異，因此在培養基上容易辨別。

基于以上發現，本發明提供了一種培養基組合物，該培養基組合物含有氮源，其中，所述氮源含有尿素和/或氨基酸，以氮元素計,尿素和/或氨基酸占氮源總含量的80重量%以上，以培養基組合物的總重量為基準，以氮元素計，所述氮源的總含量為0.02-15重量%。

優選地，以氮元素計,尿素和/或氨基酸占氮源總含量的90重量%以上。

優選地，以培養基組合物的總重量為基準，以氮元素計，所述氮源的總含量為0.5-8重量%。

另一方面，本發明提供了一種培養基，該培養基含有一種培養基組合和水，其中，所述培養基組合物為本發明提供的培養基組合物，所述培養基組合物與水的重量比為1:20-30。

再一方面，本發明提供了一種對菌株進行活菌計數的方法，該方法包括：將菌株在培養基上進行平板培養，對培養后的菌株進行平板計數，其中，所述培養基為本發明提供的培養基。

由實施例和對比例可以看出，通過在培養基中添加釀酒酵母難以利用的氮源，并控制氮源的含量，優選的情況下，在培養基中還添加鉍鹽和亞硫酸鹽，使得在該培養基中生長的釀酒酵母的不同菌株可以形成形態和顏色不同的菌落，從而可以區分釀酒酵母不同的菌株，因此，實現了對不同釀酒酵母菌株共同進行活菌計數的目的。

本發明的其他特征和優點將在隨后的具體實施方式部分予以詳細說明。

附圖說明

附圖是用來提供對本發明的進一步理解，并且構成說明書的一部分，與下面的具體實施方式一起用于解釋本發明，但并不構成對本發明的限制。在附圖中：

圖1顯示了培養72小時后不同釀酒酵母菌株（CGMCC3284菌株和F15菌株）在培養基上的菌落直徑和顏色；其中，CGMCC3284指釀酒酵母CGMCC3284菌株，F15指釀酒酵母F15菌株。

具體實施方式

以下對本發明的具體實施方式進行詳細說明。應當理解的是，此處所描述的具體實施方式僅用于說明和解釋本發明，并不用于限制本發明。

一方面，本發明提供了一種培養基組合物，該培養基組合物含有氮源，其中，所述氮源含有尿素和/或氨基酸，以氮元素計,尿素和/或氨基酸占氮源總含量的80重量%以上，以培養基組合物的總重量為基準，以氮元素計，所述氮源的總含量為0.02-15重量%。