[發明專利]一種辣椒無菌苗培養技術

無效

• 申請號: 201210588214.6
• 申請日: 2012-12-29
• 公開（公告）號: CN103004605A
• 公開（公告）日: 2013-04-03
• 發明（設計）人: 胡能兵;隋益虎;舒英杰;周玉麗;何克勤;張子學;崔廣榮
• 申請（專利權）人: 安徽科技學院
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

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技術領域

一種辣椒無菌苗培養技術，屬于生物技術領域，更具體的說是一種在現有辣椒無菌苗培養技術的基礎上，增加一道無菌水震蕩浸種的工序，排毒充氧，促進芽苗生長，提高無菌苗培養效率的方法。

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背景技術

無菌外植體的獲得是植物組織培養的重要環節，可用于原生質體融合、細胞培養、離體快繁及植物轉基因等方面。雙子葉植物無菌外植體的獲取多采用的是將種子滅菌后轉變為無菌苗后，取其葉片、下胚軸進行離體快繁或轉基因研究，因而，無菌苗的培養周期及群體的整齊程度成為制約后續試驗環節的瓶頸。目前，辣椒無菌苗獲得一般都采用自來水清洗→乙醇消毒→氯化汞消毒→無菌水清洗→培養基接種的傳統程序。這種方法的缺點在于無菌苗生長慢，成苗時間長，效率低。經分析，我們認為，上述方法無菌苗生長不良的原因一是在經過氯化汞消毒后，種子表面或內部殘留的氯化汞，對種子產生毒害，影響種子的生活力；二是將種子接種在瓊脂培養基上，由于接種深淺不同、體位不同等原因，使得種子吸水緩慢且不夠均勻，導致出苗緩慢且大小不一，工作效率低下。

發明內容

一種辣椒無菌苗培養技術的發明目的是，針對現有辣椒無菌苗培養技術的不足，提供一種高效率的辣椒無菌苗培養新技術。本發明的特點是在現有技術的基礎上，在辣椒種子接種之前增加一道無菌水震蕩浸種的操作，提高辣椒無菌苗的成苗速度、出苗率及整齊度。

本發明是這樣實現的：

一種辣椒無菌苗培養技術包括自來水清洗、超凈臺消毒、乙醇消毒、氯化汞消毒、無菌水清洗、培養基接種工序，其特點在于，在培養基接種之前加入了一道無菌水振蕩浸種的工作，其整個操作的程序變成自來水清洗→超凈臺消毒→乙醇消毒→氯化汞消毒→無菌水清洗→無菌水震蕩浸種→培養基接種共七道工序，具體步驟如下：

①自來水清洗：將種子裝在尼龍種子袋中，置于自來水下沖洗3-5分鐘。

②超凈臺消毒：將種子袋置于超凈臺內的組培空瓶內，噴灑75%酒精進行臺面及空間消毒，開啟紫外燈、打開無菌風開關，滅菌30min。

③乙醇消毒：用75%酒精浸沒組培瓶內種子袋，消毒1min。

④氯化汞消毒：將種子轉入0.1%氯化汞溶液中，消毒15min。

⑤無菌水清洗：將種子轉入無菌水中搖晃清洗30s。

⑥無菌水浸種：將種子轉入無菌水中，30℃振蕩浸種24hr。

⑦接種：將種子接種于僅含瓊脂粉的培養基表面，25℃催芽。

一種辣椒無菌苗培養技術的有益效果：本發明在現有技術基礎上，增加無菌水震蕩浸種環節，可以產生如下的作用：一是24hr的浸種使種子消毒時殘留在種子上的氯化汞得以充分釋出，起到排除毒素的作用；二是通過浸種使辣椒種子在接種前均勻地吸足水分，滿足了種子萌動對水分的需求；三是震蕩浸種還可以增加無菌水內的溶氧量，也有利于激發種子的萌動。由于上述原因，本發明產生了如下的有益效果：第一，芽苗生長快，傳統的方法接種到成苗需30-45天甚至更長，而采用本方法僅需20天左右。第二，發芽整齊。現有技術培養的辣椒無菌苗，大小不一，而本發明的方法培養出的辣椒苗大小整齊一致；第三，本方法簡單易行，操作方便，便于推廣。簡言之，本發明的有益效果是排毒充氧，促進種子萌動，促進芽苗生長，簡單易行。

具體實施方式：

下面結合具體實施例對本發明進行進一步的描述。

實施例1：?用一種辣椒無菌苗培養技術培養9050辣椒無菌苗

1.自來水清洗：將100粒9050辣椒種子裝在尼龍種子袋中，置于自來水下沖洗3-5分鐘。

2.超凈臺消毒：將種子袋置于超凈臺內的組培空瓶內，噴灑75%酒精進行臺面及空間消毒，開啟紫外燈、打開無菌風開關，滅菌30min。

3.乙醇消毒：用75%酒精浸沒組培瓶內種子袋，消毒1min。

4.氯化汞消毒：將種子轉入0.1%氯化汞溶液中，消毒15min。

5.無菌水清洗：將種子轉入無菌水中搖晃清洗30s。

6.無菌水浸種：將種子轉入無菌水中，30℃振蕩浸種24hr。

7.接種：將種子接種于僅含瓊脂粉的培養基表面，25℃催芽。

通過以上步驟在25瓶中獲得脫殼的無菌幼苗92株，出苗率達92%；培養歷時20天，比現有的技術減少10-25天左右，且無菌苗生長整齊茁壯。

實施例2：用一種辣椒無菌苗培養技術培養7036辣椒無菌苗

1.自來水清洗：將120粒7036辣椒種子裝在尼龍種子袋中，置于自來水下沖洗3-5分鐘。