[發(fā)明專利]msCT-AcAPc2融合蛋白轉(zhuǎn)基因工程菌株無效
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201210585365.6 | 申請(qǐng)日: | 2012-12-31 |
| 公開(公告)號(hào): | CN103031266A | 公開(公告)日: | 2013-04-10 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人: | 余瓊 | 申請(qǐng)(專利權(quán))人: | 黑龍江大學(xué) |
| 主分類號(hào): | C12N1/21 | 分類號(hào): | C12N1/21;C12N15/63;C12N15/62;C12N9/64;C12R1/19 |
| 代理公司: | 暫無信息 | 代理人: | 暫無信息 |
| 地址: | 150080 黑龍*** | 國省代碼: | 黑龍江;23 |
| 權(quán)利要求書: | 查看更多 | 說明書: | 查看更多 |
| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | msct acapc2 融合 蛋白 轉(zhuǎn)基因 工程 菌株 | ||
1.msCT-AcAPc2融合蛋白轉(zhuǎn)基因工程菌株,其特征在于msCT-AcAPc2融合蛋白轉(zhuǎn)基因工程菌株名為大腸桿菌BL21(DE3-msCT/AcAPc2),大腸桿菌BL21(DE3-msCT/AcAPc2)按以下步驟制備:
一、將含有msCT-AcAPc2融合蛋白基因的質(zhì)粒載體pUC(msCT/AcAPc2)用BamH?I和EcoRⅠ雙酶切,獲得msCT-AcAPc2融合蛋白的DAN片段;
二、用BamHI和EcoRⅠ雙酶切質(zhì)粒pGEX-6P-1;
三、msCT-AcAPc2融合蛋白的DAN片段與經(jīng)過雙酶切的載體pGEX-6P-1進(jìn)行酶連接,然后16℃放置連接過夜,得到載體pGEX-msCT/AcAPc2;
四、用載體pGEX-msCT/AcAPc2轉(zhuǎn)化大腸桿菌BL21(DE3),選擇陽性重組子,即獲得msCT-AcAPc2融合蛋白轉(zhuǎn)基因工程菌大腸桿菌BL21(DE3-msCT/AcAPc2)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的msCT-AcAPc2融合蛋白轉(zhuǎn)基因工程菌株,其特征在于步驟一中質(zhì)粒載體pUC(msCT/AcAPc2)酶切反應(yīng)體系為
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的msCT-AcAPc2融合蛋白轉(zhuǎn)基因工程菌株,其特征在于步驟二中質(zhì)粒pGEX-6P-1酶切反應(yīng)體系為
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的msCT-AcAPc2融合蛋白轉(zhuǎn)基因工程菌株,其特征在于步驟三中酶連接反應(yīng)體系為
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的msCT-AcAPc2融合蛋白轉(zhuǎn)基因工程菌株,其特征在于步驟一中msCT-AcAPc2融合蛋白的基因序列如SEQ?ID?NO:1所示。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的msCT-AcAPc2融合蛋白轉(zhuǎn)基因工程菌株,其特征在于步驟一中msCT-AcAPc2融合蛋白的氨基酸序列如SEQ?ID?NO:2所示。
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