[發明專利]來源于極端嗜酸菌的泛應急蛋白FaUSPA基因、表達載體及其構建和應用

有效

• 申請號: 201210585227.8
• 申請日: 2012-12-28
• 公開（公告）號: CN103898126A
• 公開（公告）日: 2014-07-02
• 發明（設計）人: 彭日荷;姚泉洪;田永生;趙偉;付曉燕;朱波;許晶;高建杰;韓紅娟;王波;王麗娟;韓靜;薛永
• 申請（專利權）人: 上海市農業科學院
• 主分類號: C12N15/31
• 分類號: C12N15/31;C12N15/74;C12N1/21;C12R1/145
• 代理公司: 上海開祺知識產權代理有限公司 31114
• 代理人: 費開逵

1.一種來源于極端嗜酸菌Ferroplasma?acidarmanus的泛應急蛋白FaUSPA基因，其核苷酸序列如SEQ?ID?NO1所示。

2.包含權利要求1所述的來源于來極端嗜酸菌的泛應急蛋白FaUSPA基因的大腸桿菌-梭菌穿梭表達載體。

3.根據權利要求2所述的大腸桿菌-梭菌穿梭表達載體，其特征在于，所述表達載體是以pSOS94載體為基礎載體，將氯霉素抗性基因表達單元，梭菌CAC3645基因啟動子、權利要求1所述的FaUSPA基因的閱讀框表達單元和枯草桿菌pyruvate?kinase基因終止子定向連接后替換pSOS94載體中的ctfAB及abc表達單元構建而成的。

4.根據權利要求3所述的大腸桿菌-梭菌穿梭表達載體，其特征在于，從pXYP251載體中擴增氯霉素表達單元，引物為cm1:5’-AAGCTTATAACTTCGTATAATGTATGCTATACGAAG-3’，cm2:5’-TCTAGATATACGAAGATAACTTCGTATAGCATACAT-3’；擴增條件為94℃30s，60℃30s，72℃60s；25循環。

5.根據權利要求3所述的大腸桿菌-梭菌穿梭表達載體，其特征在于，從梭菌C.acetobutylicum?ATCC824中擴增CAC3645基因啟動子，引物為c3645z:5’-TCTAGATAACCTGTAAAAAGATGATGG-3’，c3645f:5’-GGATCCCTTGTTTCTCCTCTCACTTGA-3’。擴增條件為94℃30s，60℃30s，72℃30s；25循環。

6.根據權利要求3或5所述的大腸桿菌-梭菌穿梭表達載體，其特征在于，所述梭菌CAC3645基因啟動子的堿基序列如SEQ?ID?NO2所示。

7.根據權利要求3所述的大腸桿菌-梭菌穿梭表達載體，其特征在于，從枯草桿菌Bacillus?subtilis168中擴增PYK基因終止子，引物為pyk1:5’-GAGCTCTTACAGGTGAAAATGGAAGGGGA-3’，pyk2:5’-CATATGTATAGCGGGTAACCCAACGGGATAAGAAGACAGGCGCCG-3’；擴增條件為94℃30s，60℃30s，72℃30s；25循環。

8.權利要求1所述的來源于來極端嗜酸菌Ferroplasma?acidarmanus的泛應急蛋白FaUSPA基因在提高梭菌丁醇耐受性中的應用。

9.權利要求1所述的來源于來極端嗜酸菌Ferroplasma?acidarmanus的泛應急蛋白FaUSPA基因在提高梭菌丁醇產量中的應用。